孙芳
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低中心静脉压对肝癌手术患者围术期免疫功能的影响
- 目的:探讨低中心静脉压(Low central venous pressure，LCVP)对肝癌手术患者围术期免疫功能的影响。 方法:采用前瞻性研究方法，选择2016年10月至2017年1月我院收治的术前确诊为肝细胞肝...
- 孙芳
- 关键词：低中心静脉压肝癌围术期免疫功能肝转氨酶
- 文献传递
- 利用CRISPR-Cas9技术敲除MAS1基因的质粒构建与酶切方案优化的研究
- 2019年
- CRISPR-CAS9技术是新一代基因编辑技术,可简便快捷地对哺乳动物细胞进行指定基因的敲除,实现沉默外源基因表达的目的。但传统的CRISPR-CAS9技术提供的酶切方案没有特异性,致使酶切效率不稳定,影响胶回收率以及后续实验。本实验通过改变酶切体系大小,以及酶切反应时间,继而通过胶回收率及测序检测的方法验证最佳酶切条件,最后通过荧光定量PCR和Western blotting实验检测目的基因的表达量,确认是否成功敲除目的基因。研究结果说明:BbsⅠ酶与px459质粒比值为1μL:500 ng,酶切体系为50μL,酶切时间为45 min时,酶切效果最佳、胶回收率最高,且此时目的基因在细胞内的表达量为0,确定该实验条件下目的基因被成功敲除。
- 孙芳廖维芳廖维芳赵瑞强张洋洋廖志红赵瑞强
- RAS对各肝病影响的研究进展被引量：5
- 2017年
- 肾素-血管紧张素系统(rennin angiotensin system,RAS)是机体内重要的具有调节血压、水钠平衡等功能的内分泌调节系统。近年在各肝病的研究中发现,RAS失衡与各种肝病的发生与发展均有密切关系。肝组织内存在局部的完整RAS系统,当肝细胞或肝组织受到某种致病因素的刺激时,局部RAS被激活,各成分活性增强并重新分布,继而影响肝病的发展。早期研究已证实ACE-AngⅡ-AT1R轴表达上调可加重肝脏损伤,促进各肝病的进展。新近研究发现的ACE2-Ang(1-7)-Mas轴被不断证明是ACE-AngⅡ-AT1R轴的反向调节轴,被称为"替代RAS经典轴",发挥拮抗ACE-AngⅡ-AT1R轴的作用,对肝病的进展起一定的缓解或逆转作用。本研究就近年来关于RAS对各肝病的影响的相关研究做一综述,为找到更有效的缓解和治愈肝病的新方法提供新思路。
- 孙芳廖维芳林文珍
- 关键词：肾素-血管紧张素系统肝炎脂肪肝肝纤维化
- 过表达和敲除G蛋白偶联受体Mas对人肝癌细胞生物学作用的影响
- 孙芳
- Lnc01089在肝癌细胞中的表达分析被引量：1
- 2018年
- 为探讨Lnc01089与肝癌细胞侵袭的关系,本研究分析了Lnc01089在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达情况。从肝癌细胞株HepG2、Huh7、SMMC-7721和15例成对的肝癌组织及其癌旁组织中提取总的RNA,经逆转录得到cDNA,通过qRT-PCR实验,分析Lnc01089在肝癌组织和这三种肝癌细胞株中的表达水平。结果发现Huh7、SMMC-7721中Lnc01089的表达量明显低于HepG2;肝癌组织中Lnc01089的平均表达量也明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义（p〈0.05）。结果提示Lnc01089表达水平的降低与肝细胞的恶性程度有关。因此Lnc01089可能与肝癌的发生、发展有密切联系,有望为肝癌治疗提供新的靶点。
- 张洋洋吕智略孙芳周素芳曾麒燕
- 关键词：长链非编码RNA肝癌QRT-PCR
- 优化脂质体对肝癌细胞株HepG2细胞转染效率被引量：4
- 2016年
- 摸索用Lipofectamine 2000(Lipo)转染质粒pEGFP-C1到肝癌细胞HepG2较为合适的转染条件。以HepG2细胞为研究对象,采用脂质体Lipofectamine 2000转染pEGFP-C1质粒,在24孔板先按每孔0.5μg固定pEGFP-C1质粒用量,摸索Lipo在1μL、1.5μL、2μL、2.5μL量上较为合适的用量,确定Lipo用量后,然后固定Lipo为1μL,摸索质粒用量0.5μg、1μg,确定脂质体与质粒的最佳比例。此外,对转染中培养基是否含血清,Lipofectamine 2000与pEGFP-C1质粒比例为1:0.5的基础上,扩大用量,即Lipofectamine 2000 2μL和pEGFP-C1质粒1μg,以及脂质体复合物孵育细胞时间进行优化。最后,采用荧光倒置显微镜观察细胞转染效率和方差分析及秩和检验的统计学方法进行统计分析。结果显示,pEGFP-C1质粒固定为0.5μg时,Lipo用量在1μL及1.5μL用量组转染效率最好,之后随着Lipo用量加大,转染效率下降;固定Lipo用量1μL,pEGFP-C1质粒0.5μg时转染效率最好(p<0.05),比例不变,扩大Lipo和质粒用量,并不增加转染效率。转染后于3 h、6 h、8 h、12 h、24 h换成正常培养基培养,转染6 h后换液较好。此外,研究发现培养基是否含血清不影响转染效率。本研究表明在24孔板板中用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞时较为合适的转染条件为每孔1μL Lipofectamine 2000和0.5μg质粒,脂质体与质粒的最佳比例为2:1,血清不影响转染效率,用含血清培养基转染后6 h换液培养。
- 廖维芳李建玲孙芳吴正远林文珍
- 关键词：HEPG2细胞LIPOFECTAMINE转染效率
- MAS基因在不同组织表达量的差异分析研究
- 2017年
- 肾素-血管紧张素是人体肿瘤微环境的重要组成部分。肾素血管-紧张素素系统(RAS)是人体非常重要的调节系统。RAS系统包含经典轴ACE-AngII-AT1R和替代经典轴的ACE2-Ang(1-7)-Mas。作为非经典替代轴受体的MAS基因,发挥了重要的拮抗经典轴的作用。在之前的研究中,我们对MAS基因在肝癌中的表达差异做了研究,发现其在肝癌组织和血清中的表达均高于健康对照组。有报道称,MAS基因在其它组织中也有异常表达。目的:分析MAS在不同组织中的表达情况,并分别与对应的癌旁组织对照,更加全面的了解MAS基因在人体不同组织的表达情况。方法:本文通过生物信息学手段分析MAS在人体不同部位的表达差异,数据来源GEO数据库。结果:结果显示MAS基因在心脏中的表达最高,并且其在癌组织中的表达量均高于其对应的癌旁组织。结论:综上所述,提示我们MAS基因在人体中扮演着重要的角色,本文将为研究MAS基因的拮抗机制提供更好的思路。
- 李建玲孙芳孙芳林文珍
- 关键词：RAS系统MAS受体表达量
