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荧光素酶基因(Lux)在环境监测中的应用和研究: 1993年; 通过基因工程技术从发光细菌中无性繁殖荧光素酶基因(Lux),并转移到对污染物有特别敏感性的受体菌中表达,或组入对特定细菌种群有专一感染性的噬菌体基因组中,构建成基因工程菌或工程噬菌体用于环境监测,将能极大地提高监测的效率和灵敏性。该技术自80年代创立至今,已成功地用于多种污染物或细菌的监测,显示了较传统发光细菌监测法的明显优势,迅速成为污染生物监测研究的一个热点。本文综述了近年有关荧光素酶基因(Lux)的分子生物学特性及其监测应用的最新研究进展和尚存的问题。; 张蔚文; 关键词：环境监测基因工程

放线菌次生代谢的分子遗传学研究进展(上)被引量：4: 1997年; 1　绪论根据Mann的简单定义,次生代谢并非细菌自身生长、繁殖所必需的代谢,但是,次生代谢并不能够和初生代谢绝然分开来,它们之间有着直接的联系,初生代谢的大多数酶存在于所有细菌细胞中,而次生代谢途径中的酶,以及编码这些酶的基因,仅局限于少数种类的细菌中,这些基因可能来自初生代谢途径中基因的复制和趋异。; 张蔚文; 关键词：放线菌次生代谢分子遗传学

放线菌次生代谢的分子遗传学研究进展(下)被引量：2: 1997年; 至今为止，从各种产生抗生素的Streptornyces spp和Saccharopolyspora erythraea的生物合成基因簇中，已发现了12个可能的调控基因(表2)。; 张蔚文; 关键词：分子遗传学抗生素

地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质被引量：2: 1996年; 采用原生质体裂解方法确定甲基丙二酰CoA变位酶(MCM)和消旋酶(MCR)均是胞浆内酶。各经过四步纯化得到电泳纯酶。纯化MCM酶的比活力为12.84u/mg,纯化倍数为528,酶活回收为60％,纯化的MCM酶服从典型的米氏底物饱和曲线,对琥珀酰CoA和辅酶B_(12)的K_m值分别为9.723#mol/L和0.1277#mol/L。经SephadexG-150测定MCM分子量约为134.000±2000,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条分子量分别为67000和65000的蛋白带,说明该酶由两个大小不等亚基组成。吸收光谱测定每摩尔纯化全酶含两摩尔辅酶B_(12)。纯化MCR酶比活力为2.305u/mg,纯化倍数96,酶活回收46.7％。MCR酶由两个分子量均为17500的亚基组成。MCR酶活性能被二价金属离子Cu^(2+)、Co^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)和Fe^(2+)所促进。两酶的酶学性质和其他生物来源的MCM、MCR酶明显相似。; 张蔚文焦瑞身; 关键词：变位酶

丙酸盐对利福霉素生物合成的调控被引量：20: 1995年; 外源添加１０ｍｍｏｌ／Ｌ的丙酸盐能促进地中海拟无枝酸杆菌（Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）Ｕ３２合成利福霉素ＳＶ３０％：研究发现丙酸盐由两条酶学途径，即酰基ＣｏＡ合成酶系统、脂肪酸激酶偶联酰基磷酸转移酶系统激活形成丙酰ＣｏＡ，进而由丙酰ＣＯＡ羧化酶催化形成利福霉素合成前体（２Ｓ）－甲基丙二酰ＣｏＡ，因而促进了利福霉素的合成。在两个丙酸盐激活酶系统中，丙酰ＣｏＡ合成酶为组成型表达，而丙酸激酶／丙酰磷酸转移酶可由丙酸盐所诱导。过量的氨盐能阻遏丙酸盐激活酶系统以及利福霉素的合成。添加丙酸盐使受氨盐抑制的利福霉素的合成部分恢复，是由于促进了活化三碳单位的供应。; 张蔚文焦瑞身

力复霉素前体甲基丙二酰CoA合成途径的研究被引量：7: 1996年; 力复霉素合成的碳前体之一(2R)—甲基丙二酰CoA至少可以有三条酶学合成途径。三条途径中的关键酶分别为甲基丙二酰CoA转羧基酶、丙二酰CoA羧化酶、甲基丙二酰CoA变位酶和甲基丙二酰CoA消旋酶。通过比较各个酶活性的时间进程和力复霉素合成时间的相关性,以及各个酶的底物亲合力,对它们在地中海拟无枝酸菌(Amycolatopsis mediterranei)甲基丙二酰CoA合成中的贡献作了排序,发现甲基丙二酰CoA变位酶途径是主要负责酶系。但是各个途径的贡献排序并不是固定不变的,能受到环境因素的调控,丙酸盐的加入将抑制甲基丙二酰CoA变位酶活力,而使得甲基丙二酰CoA转羧基酶成为主要酶系。甲基丙二酰CoA合成途径的多样性有助于细胞对环境变化的灵活反应。此外,对各个酶的调控特性也进行了研究。; 张蔚文焦瑞身; 关键词：发酵

原核生物中的类钙调蛋白被引量：7: 1995年; 钙是重要的生命元素之一，真核生物中普遍存在介导钙信号的钙调蛋白已有深入的研究，证明钙调蛋白是细胞复杂调控系统中的一个重要成员，但是在原核生物中是否也存在类似的蛋白因子却一直说法不一。自８０年代初在大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）中首次发现类钙调蛋白（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ－ｐｒｏｔｅｉｎ）以来，已在多种原核生物中陆续发现了类钙调蛋白的存在，证明其可能参与了原核生物的孢子形成，细胞分裂，生物固氮，异型胞形成和兰细菌光合作用等多种调控功能。文章综述了近年来这一领域的部分研究成果。; 张蔚文; 关键词：原核生物生理功能

地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA转羧基酶的纯化及酶学特性被引量：1: 1996年; 经硫酸铵沉淀，ＤＥＡＥ－纤维素吸附，磷酸纤维素吸附和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯ＭＣＴ酶，酶比活力为３．２１Ｕ／ｍｇ，纯化倍数１７８，酶活回收１４．９％。酶反应的最适ｐＨ和温度分别为７．０和３５℃。纯化ＭＣＴ酶对底物丙酰ＣｏＡ和草酰乙酸的米氏常数分别为０．０２７ｍｍｏｌ／Ｌ０．０３５０９ｍｍｏｌ／Ｌ．经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０测定酶分子量为２０００００，ＳＤＳ－取丙烯酰胺电泳凝胶显示一条分子量６８０００的亚基蛋白带，说明该酶由三个等大小亚基组成．薄层等电聚焦测定酶等电点为ｐＩ６．０．二价金属离子Ｃｏ￣（２＋）和Ｆｅ￣（３＋）促进酶活力．采用原生质体裂解的方法发现ＭＣＴ酶是可能分布于胞浆和细胞膜上．; 张蔚文焦瑞身

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张蔚文