王芳
- 作品数:7 被引量:5H指数:1
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 犬2型腺病毒纤突、六邻体基因序列分析及纤突基因真核表达
- 王芳
- 关键词:犬2型腺病毒克隆真核表达
- 肠绒毛消化法所得仔猪小肠上皮细胞的培养与鉴定被引量:4
- 2011年
- 小肠上皮细胞作为肠道的主要功能细胞,在多种肠道疾病和上皮间质转化的研究中发挥着重要的作用。采取组织块消化和肠绒毛消化两种方法对新生仔猪小肠上皮细胞进行分离培养,传代后通过细胞形态学及免疫荧光等方法对其进行鉴定,结果表明:肠绒毛消化法所获得的小肠上皮细胞要远好于组织块消化法所得细胞,细胞在24~48h贴壁,呈现出典型的三角形或多角形样,10~12d细胞汇合成片、单层生长、互不重叠;细胞角蛋白18(cytokeratin-18)和尾型同源盒基因2(Cdx2)阳性,碱性磷酸酶检测阴性,扫描电镜下可以清楚地看到均匀分布的肠绒毛。以上结果表明,该实验成功建立出可连续传代并符合小肠上皮细胞鉴定标准的仔猪小肠上皮细胞。
- 李慧格日乐其木格王健宇王娟王芳薛冰华刘忠华
- 关键词:小肠上皮细胞
- 一种产共轭亚油酸微生物发酵剂及其制备方法
- 本发明提供了一种产共轭亚油酸微生物发酵剂及其制备方法,以植物乳杆菌CICC23138为出发菌株,0.9%的生理盐水活化后备用;按植物乳杆菌基础培养基的0.1%添加亚油酸,5%接种活化菌种,在37℃厌氧箱内静止培养30小时...
- 侯俊财刘艳平肖志刚于微王玉堂王芳
- 猪VHL基因克隆及敲低克隆胚胎的构建被引量:1
- 2013年
- 通过在细胞和胚胎水平对猪Von Hippel-Lindau(VHL)基因进行了基因敲低研究,以便为建立VHL疾病模型猪奠定基础。研究首先通过3 RACE和5 RACE克隆得到猪VHL基因cDNA全长序列(2 725 bp),Real-time PCR结果表明VHL基因广泛表达于猪的各种组织器官,其中在肾上腺、肝脏、胰腺、心脏和睾丸等组织器官高量表达。进一步在猪iPS细胞中对5条干扰片段进行筛选,获得2条高效的干扰片段,干扰效率分别达到72%(P=0.0012)和64%(P<0.01)。以稳定干扰VHL基因的猪胎儿成纤维细胞为核供体,构建克隆胚胎,结果表明,克隆胚胎的发育能力与对照组相比没有明显差异,而且在克隆囊胚中VHL基因的干扰效率达到71%(P<0.01)。综上所述,文中获得了猪VHL基因全长序列并获得该基因稳定敲低的猪细胞和胚胎,从而为VHL疾病模型猪的构建奠定了良好的基础。
- 金红红王健宇王芳马婧牟彦双刘忠华
- 关键词:VHL基因RNA干扰
- 一种产共轭亚油酸微生物发酵剂及其制备方法
- 本发明提供了一种产共轭亚油酸微生物发酵剂及其制备方法,以植物乳杆菌CICC23138为出发菌株,0.9%的生理盐水活化后备用;按植物乳杆菌基础培养基的0.1%添加亚油酸,5%接种活化菌种,在37℃厌氧箱内静止培养30小时...
- 侯俊财邹月利刘艳平肖志刚于微王玉堂王芳
- 文献传递
- 猪vhl基因克隆及敲低克隆胚胎的构建
- Von Hippel-Lindau(vhl)病为常染色体显性遗传病,主要临床表现为中枢神经系统成血管母细胞瘤和形成肾细胞癌等,在小鼠中vhl基因敲除后会引发心血管等疾病.鉴于猪是人类心血管疾病更好的模型,本文在细胞和胚胎...
- 金红红王健宇王芳马婧牟彦双刘忠华
- 关键词:VHL基因RNA干扰
- 猪脐带间充质干细胞的培养与鉴定
- 脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesnchymal stem cells,UCMSCs)是一种位于脐带沃顿氏胶(Wharton’s jelly)内和血管周围,来源于发育早期的中胚层和外胚层,具有自我更新...
- 李慧王芳韩小娇金红红王健宇刘忠华
- 关键词:脐带间充质干细胞多能性
- 文献传递