王娟
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划陕西省卫生厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核杆菌DnaA蛋白的原核表达及免疫血清的制备和检测被引量：3
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白,对表达产物进行纯化、鉴定后制备DnaA蛋白特异性免疫血清并进行Western blot检测。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,PCR扩增DnaA基因,构建DnaA原核表达质粒pET-DnaA,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,非变性条件下镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白pET-DnaA,并用Western blot检测和鉴定重组蛋白,用纯化得到的重组蛋白制备特异性免疫血清。结果成功构建了结核杆菌pET-DnaA重组质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达;用分离纯化后的重组蛋白免疫动物,获得高效价的特异性免疫血清。结论结核杆菌DnaA蛋白及其特异性抗体的成功制备,为进一步研究该蛋白在结核菌DNA复制机制中的作用奠定了基础。
- 周爱萍韩蕾王娟段艳吴晓康徐纪茹
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 临床感染肠球菌的分型、耐药基因筛选及质粒消除研究
- 采用API 20系统和16S rRNA PCR分型方法、K-B法和微量稀释法和多重PCR方法对我校第一附属医院2008-2009年临床分离的90肠球菌进行分型、耐药性和耐药基因分析,并对耐药性质粒进行了消除实验.
- 王娟Muhammad Nawaz吴晓康张宁黄君华徐纪茹
- 2型糖尿病患者肠道拟类菌属和双歧杆菌属多样性的PCR-DGGE指纹图谱分析被引量：7
- 2010年
- 目的分析2型糖尿病患者肠道拟类菌属和双歧杆菌属的多样性及其与健康个体的差异,探讨糖尿病与肠道优势菌属的相关性。方法收集2型糖尿病患者和健康志愿者粪样,提取样品中菌群总DNA,利用拟类菌和双歧杆菌16SrRNA种属特异性引物,进行PCR扩增,将产物用变性梯度凝胶电泳分离,获得肠道菌群分子指纹图谱,进行多样性和相似性等特征分析。结果糖尿病组和健康人组样品DGGE图谱多样性指数范围分别是:拟类菌属0.89(0.75～0.95),0.95(0.89～0.97);双歧杆菌属:0.85(0.75～0.94),0.87(0.73～0.93)。组内成对相似性系数累积曲线分析,拟类菌属:小于0.5的Cs值在糖尿病组占到总Cs值个数的85.83%,而健康人组只占到35.71%;双歧杆菌属:小于0.4的Cs值在糖尿病组占到总Cs值个数的90%,健康人组占到总Cs值个数的60.7%。结论糖尿病患者和健康人肠道拟类菌属和双歧杆菌属指纹图呈现个体特异性,糖尿病患者两种菌属多样性与健康个体无显著差异,而糖尿病患者个体之间的相似性较健康个体之间低。
- 吴晓康徐纪茹张旭燕马超锋韩蕾申艳星NAWAZ M王娟
- 关键词：变性梯度凝胶电泳指纹图谱技术多样性
