南华大学生命科学与技术学院药物药理研究所
- 作品数：12 被引量：34H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅优秀青年基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤细胞信号干预治疗现状被引量：2
- 2005年
- 在肿瘤发生与发展的过程中,由于正常的基因调控紊乱,可导致细胞信号传导网络的异常,肿瘤细胞内较常出现异常的通路包括受体酪氨酸激酶通路、磷脂酰肌醇3激酶通路、Wnt通路和Rb信号通路等。传统肿瘤化学治疗的主要目的是杀伤癌细胞,但此类细胞毒性药物难以避免选择性差和毒副反应大等缺点。随着分子肿瘤学和细胞分子生物学的进步,采用小分子抑制剂、单克隆抗体和反义核苷酸等选择性针对信号传导通路中某些特定靶分子进行干预治疗,抑制细胞过度增生、上调细胞凋亡以及通过构建重组细胞系,根据虫荧光素酶的表达水平开发出一种实用的高通量抗肿瘤药物筛选体系,已经给肿瘤临床治疗带来希望,并已成为有前景的新领域。
- 曾勇智唐圣松
- 关键词：信号传导肿瘤
- 微小核糖核酸与转录因子调控基因表达机制的研究进展被引量：1
- 2009年
- 微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一种在后转录水平上调节基因表达的小分子RNAs,其可与转录因子(transcription factors,TFs)组成配偶体,对共同作用的靶基因进行调节,构成基因表达调控网络。在miRNA-TF共同对靶基因调节作用的过程中,TFs可以调节miRNAs,反过来也可受到miRNAs的调节,形成多样性的前馈环路(feed-forward loops,FFLs)。该现象表明,在错综复杂的基因转录-后转录调控网络中miRNAs与TFs对靶基因的表达具有精细的调节作用。
- 黎媚媚欧和生
- 关键词：微小核糖核酸转录因子
- Bcl-XL siRNA对人胃腺癌MGC-803细胞药物敏感性的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:研究靶向Bcl-XL基因的小干扰RNA对胃腺癌MGC-803细胞Bcl-XL基因表达的作用及对药物敏感性的影响。方法:构建的Bcl-XLsiRNA载体或阴性siRNA并稳定转染到胃癌MGC-803细胞,G418抗生素筛选阳性克隆,克隆扩大培养,免疫荧光观察细胞蛋白表达。用不同浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,MTT观察细胞增殖的变化。用一种浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,流式细胞术观察亚G1细胞的比例。结果:免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA稳定转染组细胞中Bcl-XL蛋白的表达比阴性siRNA稳定转染组细胞Bcl-XL基因的表达均有明显的降低。当不同浓度的5-FU(13、130、1 300、13 000 mg.L-1)或DADS(20、35、50mg.L-1)处理细胞24 h后,MTT结果表明Bcl-XLsiR-NA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照明显降低,细胞生长抑制率明显增高。5-FU或DADS药物的IC50值在Bcl-XLsiRNA细胞组有明显降低。使用5-FU(130 mg.L-1)或DADS(50mg.L-1)处理细胞24 h后,流式结果表明,Bcl-XL-siRNA细胞组较阴性siRNA和正常对照细胞组亚G1细胞比例有明显增高。结论:Bcl-XL siRNA下调了MGC-803细胞Bcl-XL基因的表达;Bcl-XLsiRNA能够促进MGC-803细胞凋亡,增强细胞对化疗药物的敏感性。
- 钟苗雷小勇冯兰芳朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词：MGC-803细胞DADS
- 转录因子对内皮型一氧化氮合酶表达的调节作用
- 2009年
- 血管内皮细胞损伤及其功能紊乱在心血管疾病(如冠心病)发生发展过程中起重要作用。某些内皮特异性基因的表达直接影响病变的发生和发展进程,如内皮型一氧化氮合酶。后者介导体内左旋精氨酸降解产生一氧化氮。内皮型一氧化氮合酶的基因表达调控有转录水平的调控、转录后调控和翻译后调控,而转录因子在内皮型一氧化氮合酶基因的表达调控过程中起关键性作用。
- 黎媚媚欧和生
- 关键词：内皮型一氧化氮合酶转录因子启动子转录调节
- 二烯丙基二硫诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及机制的研究被引量：7
- 2007年
- 目的:研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其分子机制。方法:AO／EB荧光染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测DADS对caspase-3剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-JNK、JNK表达的影响。结果:DADS对乳腺癌细胞株MCF-7生长具有明显的抑制作用,经AO／EB形态变化分析,可见明显的细胞凋亡特征;DADS处理MCF-7细胞6、12、24、48 h,流式细胞仪检测细胞的凋亡率分别为3．74％、9．22％、20.2％、42％,而对照组细胞的凋亡率仅为3．03％(P<0．05);不同浓度的DADS作用于MCF-7细胞24 h后,Western blot法检测发现caspase-3出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显。进一步研究发现,DADS处理MCF-7细胞后,JNK磷酸化水平明显升高。结论:DADS能诱导乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡,JNK信号通路抑制可能是DADS诱导其调亡的分子机制之一。
- 姚淑琼刘丽娟黄泽香雷小勇朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词：DADSMCF-7细胞细胞凋亡JNK
- p38MAPK与内皮细胞损伤的关系被引量：1
- 2004年
- p3 8MAPK通过磷酸化转录因子引起多种相关基因转录 ,调控活性物质的表达 ,参与血管内皮细胞氧化应激损伤甚至凋亡等过程。在信号通路水平阻断和调控p3 8MAPK的表达和活性 ,可以达到控制和减轻内皮细胞损伤或凋亡的目的。
- 庹勤慧廖端芳
- 关键词：P38MAPK内皮细胞细胞凋亡
- Daxx及相关蛋白在介导ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡中的作用
- 目的探讨Daxx及相关蛋白在介导ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡中的作用。方法通过MTT比色法检测ox-LDL对RAW264.7细胞生长的影响;用AO/EB染色、流式细胞术和DNA断裂片段分析研究ox-LDL诱导的细胞凋亡;...
- 贺庆芝廖端芳
- 文献传递
- 荷脂细胞胆固醇流出的体系构成与偶联关系被引量：11
- 2004年
- 荷脂细胞外向转运胆固醇的能力是决定动脉粥样硬化进程与转归的关键。参与调控荷脂细胞胆固醇外向转运的蛋白质包括小凹蛋白家族、三磷酸腺苷结合盒转运体蛋白家族、亲免素家族、高密度脂蛋白受体家族等。作者根据各蛋白之间的相互联系提出了“四个体系、一个中心、偶联转运、相互调节”的细胞胆固醇外向转运工作模式 ,为动脉粥样硬化性疾病的发生发展及治疗提供了崭新的思路。
- 廖端芳庹勤慧罗迪贤严鹏科
- 关键词：荷脂细胞小凹蛋白
- bcl-2 siRNA的设计、合成及其对HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用被引量：6
- 2006年
- 目的应用RNA干扰技术研究bcl-2siRNA对白血病细胞HL-60bcl-2基因表达的干扰作用。方法扫描bcl-2mRNA的全序列,记录从AUG启动子的AA及下游19个核苷酸肽作为潜在作用靶点。GC含量控制在30%￣65%之间。由BLAST分析排除与其他基因有高度同源性的序列。由体外转录合成法合成双链bcl-2siRNA,将bcl-2siRNA转染入HL-60细胞。收集转染48h后的细胞,流式细胞术检测蛋白表达情况,筛选出最佳作用序列进一步作各项指标检测。从mRNA水平、蛋白质水平等观察bcl-2siRNA对细胞HL-60bcl-2基因表达的干扰作用。结果收集转染48h后的细胞,经细胞免疫荧光、RT-PCR、MTT及Hoechst33258荧光染色等指标检测,可见转染bcl-2siRNA阳性组的细胞bcl-2基因表达降低及HL-60细胞凋亡等现象。而转染GAPDHsiRNA组的细胞对bcl-2表达无影响。结论采用生物信息学的方法设计出有效siRNA靶位点;bcl-2siRNA可通过降低bcl-2mRNA水平特异性抑制bcl-2蛋白质的表达。
- 燕春艳涂玉林钟苗陈欣雷小勇
- 关键词：BCL-2SIRNAHL-60BCL-2基因表达
- Smad4基因siRNA表达载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:以Smad4基因为靶标构建小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法:根据GenBank公布的人Smad4核酸序列及SiRNA设计原则,用AmbionRNAi在线软件,筛选得到2个19bp片段为靶序列,合成两端带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点的发夹结构寡核苷酸序列,经过退火,将此序列克隆到真核表达质粒pSilencerTM3.1-H1neovector中,构建成重组质粒,酶切及测序验证。脂质体介导转染人原代增生性瘢痕成纤维细胞,经G418筛选细胞克隆,并用RT-PCR检测Smad4基因的表达。结果:成功构建了pSilencerTM3.1-H1neo-Smad4shRNA表达载体克隆,插入片段测序结果与合成的siRNA序列一致。RT-PCR结果显示转染shRNA1、shRNA2重组质粒的成纤维细胞内Smad4 mRNA水平均降低,其中以pSilencerTM3.1-H1-Smad4 shRNA1更为明显(P<0.01)。结论:构建p-Smad4 shRNA表达载体成功,为进一步研究Smad4基因的RNA干扰奠定了基础。
- 何云武张彩平龙石银王思远崔慧辉雷小勇
- 关键词：RNA干扰SMAD4成纤维细胞转化生长因子Β
