何平
- 作品数：52 被引量：145H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 格列本脲对泡沫细胞形成的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:研究格列本脲(glibenclamide)对THP-1单核巨噬细胞形成泡沫细胞的影响及机制。方法:体外培养人THP-1单核细胞系,由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者再由乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)进行脂质负荷转变为泡沫细胞。不同质量浓度的格列本脲单独或与Ac-LDL共同作用于上述巨噬细胞,以放射性同位素标记底物法检测酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)活性的变化,油红O染色法检测泡沫细胞的形成,酶比色法检测细胞中的总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量。结果:格列本脲使脂质负荷的巨噬细胞转变为泡沫细胞的数目减少,并明显抑制脂质负荷前后巨噬细胞中ACAT酶活性;随着格列本脲剂量增加,脂质负荷前后的巨噬细胞中胆固醇酯含量逐渐降低,呈剂量依赖性趋势。结论:格列本脲抑制泡沫细胞形成,其作用机制可能与其抑制ACAT酶活性和细胞中胆固醇酯含量有关。
- 何平成蓓王洪星戚本玲
- 关键词：酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶格列本脲胆固醇泡沫细胞
- 缬沙坦对阿霉素心肌病大鼠的心脏保护作用及机制研究被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨AT1受体阻滞剂缬沙坦对阿霉素心肌病(ADR-DCM)大鼠的心脏保护作用及其机制。方法:雄性Wistar大鼠分3组:(1)阿霉素心肌病组(ADR-DCM,n=25),阿霉素2.5 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续10周;(2)阿霉素心肌病+缬沙坦治疗组(ARB,n=10),缬沙坦30 mg/kg,每天1次,灌胃治疗;(3)正常对照组(CON,n=10)。12周时进行超声和血流动力学检测,氯胺T法检测羟脯氨酸及胶原含量,Western印迹分析检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达,明胶酶谱法检测MMPs活性。结果:ARB组死亡率明显低于ADR-DCM组(20%vs40%,P<0.01)。ADR-DCM组大鼠左室内径大于CON组,心功能明显低于CON组,ARB组左室内径增加程度及心功能各项指标变化低于ADR-DCM组。ADR-DCM组心肌羟脯氨酸及胶原含量高于CON组,ARB组显著低于ADR-DCM组(P<0.01)。ADR-DCM组左室心肌MMP-2、MMP-9蛋白表达及MMPs明胶酶活性明显高于CON组(P<0.01),ARB组MMP-2、MMP-9表达及活性明显低于ADR-DCM组(P<0.01),而TIMP-1的表达在3组间均无显著差异(P>0.05)。结论:缬沙坦部分通过抑制MMPs表达及活性逆转ADR-DCM左室重构,改善心功能。
- 戚本玲刘洪智曹林生成蓓管思明刘承云张湖萍何平吴剑萍
- 关键词：多柔比星心肌疾病基质金属蛋白酶血管紧张素
- TNF-α,ox-LDL对人单核细胞株U937胆固醇酰基转移酶1表达的影响
- 2004年
- 目的 观察肿瘤坏死因子 α (TNF α)和氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响。方法 U937细胞培养到足够数量后 ,细胞计数传代分组 :①对照组 :加等量的培养基 ;②TNF α组 :加入TNF α ,使其终浓度为 10ng/ml;③ox LDL组 :加入ox LDL ,终浓度为 10 0 μg/ml。应用RT PCR检测ACAT1mRNA表达 ,蛋白定量应用免疫印迹法。 结果 与对照组相比 ,TNF α组ACAT1mRNA表达显著增加 (0 5 73± 0 0 32vs0 990± 0 0 2 2 ,P <0 0 1) ,而ox LDL组ACAT1mRNA表达水平 (0 5 5 4± 0 0 2 6 )无显著变化。 3组之间ACAT1酶蛋白含量差异无显著性意义。结论 TNF α能促进A CAT1mRNA表达 ,但未见TNF α和ox
- 成蓓王毅何平吴剑萍狄鸣王洪星
- 关键词：TNF-ΑOX-LDL单核细胞株肿瘤坏死因子-ΑTNF-Α
- 泡沫细胞形成过程中酰基CoA:胆固醇酰基转移酶1活性改变及其机制研究被引量：25
- 2004年
- 目的 研究人单核细胞系在分化为巨噬细胞及转化为泡沫细胞过程中酰基CoA :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)活性的改变及其机制。方法 体外培养人THP 1单核细胞系 ,由佛波酯作用使其分化为巨噬细胞 ,后者再由氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)进一步作用转变为泡沫细胞。此过程中以放射性同位素标记底物法检测ACAT1活性的变化 ,并用Westernblot法检测ACAT1蛋白的表达及RT PCR法检测ACAT1mRNA的水平。结果 在单核细胞分化为巨噬细胞的过程中ACAT1活性升高了 2倍 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 ) ,酶蛋白及mRNA水平呈现类似变化趋势 ,在进一步转化为泡沫细胞过程中 ,ACAT1活性、酶蛋白及mRNA仍处于较高水平 ,但与巨噬细胞相比差异无显著性。结论 单核细胞分化为巨噬细胞的过程中ACAT1转录水平的上调导致酶蛋白量合成增加 ,从而使ACAT1活性也大为增强 ,而Ox LDL对ACAT1活性影响则不明显。
- 何平成蓓彭雯王毅王洪星
- 关键词：泡沫细胞动脉粥样硬化巨噬细胞
- 人ACAT1基因P1启动子的克隆及意义
- 2007年
- 目的克隆人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT 1)基因P 1启动子。方法应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT 1基因P 1启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物信息学分析。结果经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,克隆的ACAT 1基因P 1启动子片段碱基序列与G enB ank数据库一致,未发现突变。结论人ACAT 1基因P 1启动子克隆成功,此为动脉粥样硬化(A S)过程中ACAT 1基因转录调控机制的研究奠定了基础。
- 葛晶成蓓文晖何平柯丽余其振
- 关键词：基因克隆
- 肺炎衣原体通过c-jun氨基末端激酶信号通路上调胆固醇酰基转移酶1的表达被引量：1
- 2009年
- 目的观察C-jun氨基末端激酶（JNK）信号通路在肺炎衣原体（C.pn）调控人单核细胞株（THP-1）源性巨噬细胞酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1（ACATl）表达中的作用，初步探讨C．pn诱导泡沫细胞形成的机制和途径。方法THP1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后随机分为4组：对照组、C．pn感染组、SP600125（JNK特异性抑制剂）＋C．pn组、SP600125组。分别用反转录聚合酶链反应（RTPCR）法和Western blot法检测各组细胞ACATl mRNA和蛋白表达，油红O染色和酶荧光化学法检测泡沫细胞的形成。结果C．pn组AcATl mRNA（4．16±0．26）及蛋白（1．20±0．10）表达明显高于对照组（分别为2．17±0．18和0．61±0．03，均P〈0．05），且可观察到C．pn诱导的泡沫细胞形成。而SP600125能呈浓度依赖性地抑制C．pn诱导的ACATl mRNA及蛋白表达上调（r值分别为-0．92和-0．96，均P％0．05）及泡沫细胞形成。结论C．pn通过JNK信号通路上调巨噬细胞ACATl的表达，导致细胞内胆固醇酯蓄积，从而诱导巨噬细胞源性泡沫细胞形成。
- 刘玮何平成蓓梅春丽王彦富万晶晶
- 关键词：衣原体肺炎JNK丝裂原活化蛋白激酶类酰基辅酶A泡沫细胞
- 粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α及血管壁细胞核因子-κB表达的影响被引量：11
- 2004年
- 目的观察中药粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管壁细胞核因子-κB表达的影响,进一步探讨粉防己碱抗动脉粥样硬化的机制。方法将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(普通饲料)、高脂模型组(高脂饲料)和粉防己碱组(高脂饲料+粉防己碱)。喂养12周后处死动物,放射免疫法检测血清IL-1β,TNF-α含量;采用逆转录聚合酶链式反应对血管壁细胞核因子-κBmRNA表达定量分析;Western杂交定量分析血管壁细胞核因子-κBp65蛋白亚基。结果高脂模型组血清IL-1β,TNF-α显著高于正常对照组和粉防己碱组(P<0.05),正常对照组和粉防己碱组差异无显著性意义(P>0.05);高脂模型组(1.414±0.106)NF-κBmRNA显著高于正常对照组(0.085±0.062)和粉防己碱组(0.453±0.034),而高脂模型组NF-κB蛋白亚基p65(10.08±5.75)显著低于正常对照组(35.90±3.07)和粉防己碱组(35.91±4.38)(P<0.001)。结论粉防己碱有抑制炎症因子IL-1β,TNF-α合成和分泌的作用;高血脂激活NF-κB,p65易位入胞核促进转录而降解,而粉防己碱对其有抑制作用,这可能是粉防己碱抗AS作用的机制。
- 王毅马志强黄波冯义柏孙宝贵成蓓温沁竹汪芳张建军金炜张国兵何平
- 关键词：粉防己碱高脂饮食血清白细胞介素-1Β血清肿瘤坏死因子-Α
- 人ACAT1基因P7启动子的克隆及序列分析
- 2007年
- 克隆并测定人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因P7启动子的序列,进一步探讨ACAT1基因表达的转录调控特点并分析其特异性转录位点。根据GenBank数据库提供的人A- CAT1基因P7启动子核苷酸序列,应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT1基因P7启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物学信息分析。经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,克隆的ACAT1基因P7启动子片段碱基序列与Gen Bank数据库一致。成功克隆了ACAT1基因P7启动子,为研究在动脉粥样硬化过程中AcAT1基因的转录调控机制奠定基础。
- 葛晶成蓓何平戚本玲文晖白莉娟
- 关键词：酰基辅酶A克隆
- 罗格列酮对代谢综合征大鼠瘦素和TNF-α的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:通过观察代谢综合征大鼠血清瘦素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化,研究胰岛素抵抗与瘦素和TNF-α的关系。罗格列酮干预前后血清瘦素和TNF-α的变化,进一步探讨罗格列酮对胰岛素抵抗的影响。方法:将SD大鼠随机分为2组,即普通饲料喂养组和高糖高脂喂养组。12周后分别测血糖、血脂、血清胰岛素的水平,用稳态模型的胰岛素抵抗指数(Homa-IR)判断胰岛素抵抗的程度,另取大鼠腹内脂肪组织,用免疫组化的方法观测脂肪细胞中瘦素表达的情况。将造模成功的高糖高脂喂养组大鼠再随机分为2组,继续高糖高脂喂养的同时其中一组用罗格列酮灌胃(3mg·d-1·kg-1),4周后,观测两组血清中瘦素和TNF-α水平的变化。结果:12周后高糖高脂喂养组各项指标均高于普通饲料喂养组(P<0.01),胰岛素抵抗指数与普通饲养组相比有显著升高(P<0.05),血清瘦素和TNF-α与普通饲养组相比也有明显升高[(0.15±0.05)∶(0.41±0.23),P<0.01]。罗格列酮干预组大鼠体内瘦素和TNF-α的水平较高糖高脂喂养组相比有明显的降低[(0.41±0.23)∶(0.19±0.49),P<0.05],[(356.8±87.0)∶(196.9±32.5),P<0.01]。结论:高糖高脂饮食可诱导大鼠代谢综合征模型的建立,瘦素和TNFα-有可能介导了代谢综合征的关键环节胰岛素抵抗的发生和发展,罗格列酮改善胰岛素抵抗的作用有可能是通过影响瘦素和TNF-α来实现的。
- 戚本玲成蓓张丽莉何平王斌沈利亚
- 关键词：代谢综合征罗格列酮瘦素肿瘤坏死因子ASD大鼠
- 肺炎衣原体通过下调ABCA1和ABCG1诱导THP-1源性泡沫细胞形成被引量：5
- 2009年
- 目的:观察ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和ABCG1在肺炎衣原体(C.pn)诱导THP-1源性泡沫细胞形成中的作用,以初步探讨C.pn诱导泡沫细胞形成的分子机制。方法:C.pn在Hep-2细胞内增殖,将不同浓度的C.pn(1×105～1×106IFU)分别感染THP-1单核细胞源性巨噬细胞0～72小时,运用油红O染色观察细胞浆内脂滴的变化,用酶荧光学法检测细胞内胆固醇酯含量的变化,分别运用RT-PCR和Westernblot检测ABCA1、ABCG1mRNA和蛋白表达。结果:高浓度的C.pn(5×105和1×106IFU)感染THP-1单核细胞源性巨噬细胞48小时后,细胞浆内的脂滴明显增多,胆固醇酯与总胆固醇的比值明显增加(>50%)。C.pn感染呈浓度和时间依赖性地下调ABCA1、ABCG1mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:ABCA1和ABCG1表达下调是C.pn诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制之一,这可能为C.pn感染致动脉粥样硬化发病机制的研究提供一个新的理论依据。
- 梅春丽何平成蓓刘玮王彦富万晶晶
- 关键词：肺炎衣原体ATP结合盒转运体A1泡沫细胞形成
