寇志华
- 作品数：80 被引量：108H指数：4
- 供职机构：许昌市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 抗肝癌活性单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗肝癌活性单克隆抗体及其应用。该单克隆抗体，是可以与GPC3抗原表位特异性结合的单克隆抗体；所述GPC3抗原表位的氨基酸序列为自GenBank accession Number为AAA98132.1的氨基...
- 周育森李军锋张慧娜于虹寇志华陈万荣
- 文献传递
- 钩端螺旋体膜表面蛋白LipL41基因的克隆、序列分析及表达被引量：2
- 2002年
- 目的：进一步分析钩端螺旋体LipL－41的免疫原性。方法：通过PCR的方法，以我国特有的钩端螺旋体流感伤寒群临海型lin6株（56609）的 DNA为模板，扩增目的基因 LipL41，克隆至 PcDNA3载体上，以自动测序仪测序后进行序列分析，然后克隆至原核表达载体pGEX－5T进行原核表达，Western印迹分析其免疫原性。珐票：获得长 1068 hp的片段，DNA序列分析表明该菌株的LipL41基因与文献报道具有很高的同源性（95．0％～99．4％），在大肠杆菌中获得了表达，并与抗钩端螺旋体血清反应。结论：该抗原为致病性钩端螺旋体所具有的保守性抗原成分，可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用。
- 寇志华孙树汉郭嬴军陈祖欢施柯胡振林张洪英周凤娟
- 关键词：免疫原性钩端螺旋体外膜蛋白原核表达基因克隆
- 具备中和中东呼吸综合征冠状病毒活性的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备并鉴定对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)具有中和活性的单克隆抗体,为进一步开展MERS-CoV感染与免疫保护机制研究,以及发展诊断与治疗手段奠定基础。方法 MERS-CoV S蛋白受体结合区与人IgG Fc片段融合表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA筛选出阳性克隆,随后通过多次亚克隆筛选出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定;通过MERS-CoV假病毒及活病毒中和试验筛选出中和单抗。结果获得了10株能够稳定分泌抗原特异性单抗的杂交瘤细胞株。制备的腹水单抗亚类均为IgG1;其中7株单抗抗体ELISA效价达到10 000以上,并有1株单抗对MERS-CoV具有良好的中和活性。结论本研究获得了1株对MERSCoV具有良好中和活性的单克隆抗体。
- 于虹邱洪杰潘婷李琳唐健郭彦孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：单克隆抗体中和活性
- 人源靶向补体抑制物CR2-CD59在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达
- 2010年
- 目的构建人源靶向补体抑制物CR2-CD59,并筛选中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)高效表达细胞株。方法运用FuGENE6转染试剂,将含有人CR2-CD59的重组PEE14.1质粒转入CHO细胞,蛋氨酸亚氨基代砜(MSX)筛选出阳性克隆,并利用无血清培养基对CHO细胞表达株进行培养获得重组蛋白,以ELISA、SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定。结果成功构建PEE14.1-CR2-CD59重组质粒,获得CHO细胞稳定表达株。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CR2-CD59的相对分子质量同预期结果一致。ELISA和Western blot鉴定重组蛋白CR2-CD59可与CR2、CD59多克隆抗体特异性结合。且与含血清培养基相比,无血清培养基能明显提高CHO细胞的蛋白表达量(P<0.05)。结论在CHO细胞中成功表达人源靶向补体抑制物CR2-CD59。
- 郭彦寇志华孙世惠张传福赵光宇于虹宋宏彬乔飞陈万荣周育森
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞补体
- 一种伤寒沙门氏菌菌蜕、制备方法及作为递送系统的应用
- 本发明公开了一种伤寒沙门氏菌菌蜕，其制备方法以及其作为递送系统的应用。所述菌蜕由裂解基因E裂解伤寒沙门氏菌菌体而成，可以作为递送载体将目的分子递送至靶目标。
- 周育森寇志华温晶郭彦于虹赵光宇
- 文献传递
- 应用碘元素自动检测仪测定尿中碘含量的方法评价实验被引量：1
- 2021年
- 目的评价碘元素自动检测仪测定尿中碘含量方法的应用价值。方法应用DAT-50S碘元素自动检测仪测定尿中碘含量,对该方法进行方法学适用性实验,包括标准曲线以及检出限、精密度、标准物质测定、加标回收、方法对比实验等。结果在碘含量0~800μg/L范围内,标准曲线的相关系数为-0.9997,检出限为6.2μg/L。精密度:标准曲线范围内测定低、中、高3个碘含量尿样的相对标准偏差(RSD)分别为1.6%、1.1%、0.7%(n=8)。准确度:2个尿碘标准物质的测定值均在参考值范围内;标准曲线范围内低、中、高3个碘含量尿样的平均回收率为99.6%,范围为97.6%~101.2%。方法对比实验:与砷铈催化分光光度法(WS/T 107.1-2016)对比测定20份尿样,结果差异无统计学意义(t=0.984,P>0.05)。结论应用碘元素自动检测仪测定尿中碘含量的精密度、准确度均较高,操作简单,适宜在疾病预防控制机构推广应用。
- 葛荣正寇志华
- 关键词：碘
- 离子交换纯水器制备纯水方法的改进
- 2006年
- 目的改进离子交换纯水器的再生方法，提高纯水质量。方法对离子交换器的阴离子交换树脂（简称阴树脂）依次进行酸洗、碱洗。结果与原再生方法比较，改进再生法1周期可得比电阻（5．0×10^6-≥8．0×10^6）Ω·cm去离子水450L，而原再生法1周期可得比电阻（0．25×10^6-8．0×10^6）Ω·cm离子水约150L。由于阴树脂得以彻底清洗，水的纯度和产量都有很大提高。结论对离子交换纯水器的阴树脂依次进行酸洗-碱洗步骤，方法简便，可有效提高纯水质量。
- 高丽红寇志华孔丽君
- 关键词：阴树脂酸洗碱洗
- BALB/c小鼠滴鼻免疫灭活SARS病毒对全身性免疫的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 了解灭活SARS病毒滴鼻免疫小鼠对全身性免疫的影响。方法 将 5周龄雌性BALB c小鼠随机分为两组 ,每组 10只 ,免疫组小鼠每只免疫 5 0 μg的灭活病毒悬液 ,对照组注射等体积PBS。分别在免疫的 8d和 14d处死小鼠 ,分离脾细胞和外周血淋巴细胞 ,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型 ;间接ELISA法测定其血清中抗SARS病毒特异性抗体IgM和IgG。结果 第 8天脾脏的CD4 + T细胞的构成比增加 (P =0 .0 2 7)。外周血淋巴细胞表型在第 8天即开始发生改变 ,在第 14天变化明显 ,与对照组差异有显著性 ,CD4 + ,CD8+ ,CD3+ T细胞构成比和T B比值显著降低 (P <0 .0 5、0 .0 1、0 .0 1、0 .0 1) ,同时CD4 5R B2 2 0 + 细胞 (B细胞 )构成比显著增加 (P =0 .0 0 0 )。但是此时血清中特异性抗体未能被检测到。结论 在未应用佐剂的情况下 ,小鼠滴鼻接种灭活SARS病毒虽然可以导致诱导机体免疫细胞表型的变化 ,却未能诱导抗体的产生。
- 寇志华张松乐邢丽李彬赵光宇王东勇杨海荣张强周育森
- 关键词：小鼠免疫作用滴鼻免疫流式细胞分析严重急性呼吸综合征
- 钩端螺旋体DNA疫苗pcDL41的构建、体外表达及免疫保护效果
- 钩端螺旋体(简称钩体)病是一种常见的人兽共患病,严重威胁人类健康和畜牧业生产。在世界各地均有分布,我国大部分地区均有分布,尤其是长江流域的某些省份;近年来,北方许多省份不断有钩体病流行的报道。但目前尚缺乏一种有效的疫苗,...
- 寇志华张平武孙树汉陈祖欢
- 文献传递
- 56609株钩体lipL32基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的初步表达
- 2003年
- 寇志华孙树汉施柯郭瀛军陈祖欢
- 关键词：钩端螺旋体病聚合酶链反应大肠杆菌基因克隆
