赵光宇
- 作品数：73 被引量：101H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 具备中和中东呼吸综合征冠状病毒活性的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备并鉴定对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)具有中和活性的单克隆抗体,为进一步开展MERS-CoV感染与免疫保护机制研究,以及发展诊断与治疗手段奠定基础。方法 MERS-CoV S蛋白受体结合区与人IgG Fc片段融合表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA筛选出阳性克隆,随后通过多次亚克隆筛选出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定;通过MERS-CoV假病毒及活病毒中和试验筛选出中和单抗。结果获得了10株能够稳定分泌抗原特异性单抗的杂交瘤细胞株。制备的腹水单抗亚类均为IgG1;其中7株单抗抗体ELISA效价达到10 000以上,并有1株单抗对MERS-CoV具有良好的中和活性。结论本研究获得了1株对MERSCoV具有良好中和活性的单克隆抗体。
- 于虹邱洪杰潘婷李琳唐健郭彦孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：单克隆抗体中和活性
- 一种抗SARS－CoV IgY抗体及其制备方法
- 本发明的公开一种新型的用于治疗、预防SARS－CoV的鸡抗SARS－CoV IgY抗体蛋，同是本发明公开一种新型的用于治疗、预防诊断SARS－CoV的鸡抗SARS－CoV IgY抗体。本发明抗体能特异消灭SARS－CoV...
- 王希良杜新安石辛甫张松乐赵光宇田光刘士山朱和平周华
- 文献传递
- 新发病毒(SARS和H5N1病毒)新型表位性疫苗研究
- 新发病毒性疾病是影响人类健康的重要传染病,防治该类疾病的有力措施是发展预防该类病毒感染的疫苗。SARS和H5N1病毒是两种烈性的新发病毒,已经或正在对人类的健康带来危害。SARS和高致病禽流感病毒都是以急性感染为主的传染...
- 周育森赵光宇孙世惠王弋嘉陈万荣
- 关键词：SARSH5N1病毒结构蛋白传染病防治
- 文献传递
- 一种植物蛋白的肿瘤抗原活性的研究被引量：4
- 2004年
- 目的探讨一种植物蛋白是否具有肿瘤抗原活性。方法用淋巴细胞转化实验测定植物蛋白对正常人和食管癌患者淋巴细胞的刺激指数。将131Ⅰ标记植物蛋白免疫兔抗体注射给Lewis肺癌荷瘤小鼠,然后测定不同时段不同单位组织的放射性剂量占注射剂量的百分率(％ID/g)。结果该植物蛋白对食管癌患者淋巴细胞具有特异性刺激作用。单位肿瘤组织的％ID/g明显高于心、肝、脾、肾、肌肉等组织。结论该植物蛋白具有肿瘤抗原活性,其抗体可望用于肿瘤靶向治疗的载体。
- 邓学峰赵光宇单保恩郑振海丁献义王增林
- 关键词：植物蛋白肿瘤抗原靶向治疗
- 一种具有较高免疫原性的融合蛋白及其应用
- 本发明公开了一种具有较高免疫原性的融合蛋白及其应用。该融合蛋白，是在S1的氨基末端或羧基末端融合抗原表位肽得到的蛋白质；所述S1是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序...
- 周育森赵光宇管洁肖文珺李军锋何玉先于虹陈万荣
- 文献传递
- 可调控肝脏特异性表达HCV全基因转基因小鼠模型的建立
- 2015年
- 目的:构建一种可调控肝细胞特异性表达丙型肝炎病毒(HCV)全基因的小动物模型。方法:将9.6 kb的HCV全长基因JFH1插入Tet-on系统效应表达载体p TRE2中,并在HCV全基因3'端插入丁型肝炎病毒(HDV)核酶序列,从而构建转基因载体p TRE2-JFH1(HCV);将该转基因载体线性化后显微注射获得整合有HCV全基因的TRE2-HCV首建鼠;将该阳性鼠与本室保存的Alb-rt TA转基因小鼠杂交,获得肝细胞白蛋白启动子调控HCV全基因表达的Tet-on-Alb-HCV双转基因小鼠;在强力霉素(Dox)诱导后通过PCR、Western印迹、免疫组化等方法鉴定转基因小鼠HCV基因整合及HCV蛋白在肝组织中的表达;实时定量PCR检测小鼠血清及肝组织中的HCV滴度;用HCV反义小分子药物anti-mi R122评价该模型在药物评价中的应用。结果:获得了整合rt TA基因和HCV全长基因的双转基因小鼠;Dox诱导下,该转基因小鼠可在肝组织长期特异性表达HCV全长基因,小鼠血清中可检测到HCV的RNA;分子药物anti-mi R122可降低血清中的HCV滴度。结论:构建了可调控肝组织特异性表达HCV全基因的转基因小鼠模型,该小鼠模型可应用于HCV药物筛选和评价研究。
- 高同同刘晨风姜玉庭王友亮吴小红曾扬赵亚光郭彦于虹赵光宇高基民孙世惠周育森
- 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠药物评价
- 表达miR-192的重组腺病毒的构建及其在肝细胞中的表达分析被引量：1
- 2013年
- 目的:构建表达miR-192的重组腺病毒,感染HepG2细胞建立miR-192高表达的细胞模型,以研究miR-192在肝细胞中的功能。方法:将miR-192前体基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack,构建miR-192穿梭载体pAdTrack-miR-192,经线性化和同源重组,构建重组腺病毒载体pAd-miR-192;线性化后,在QBI-293A细胞中进行病毒包装;用包装成功的重组腺病毒感染HepG2细胞,72 h后收集细胞,提取总RNA,逆转录后进行定量PCR,检测miR-192和潜在靶分子视网膜母细胞瘤基因1(RB1)mRNA的变化。结果:获得670 bp的miR-192前体基因,经过穿梭载体后重组构建表达miR-192的腺病毒载体pAd-miR-192;将pAd-miR-192转染QBI-293A细胞,第8 d细胞病变及荧光的表达结果表明重组腺病毒成功包装;感染HepG2细胞后,定量PCR检测表明miR-192的表达较对照增加了835.87倍,同时检测到细胞中RB1 mRNA的表达显著降低。结论:构建了高效表达miR-192的腺病毒,建立了miR-192高表达的肝细胞模型,证明在肝细胞中抑制的RB1是miR-192靶分子,为后续miR-192在肝细胞中功能的研究奠定了基础。
- 代晓朋李军锋张红飞张伟赵光宇于虹郭彦周育森
- 关键词：腺病毒载体肝癌细胞
- 抗GPC3 C端抗体辅助杀伤肝癌细胞HepG2的活性检测及抗原表位鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的：检测制备的7株抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白C端单克隆抗体是否具有辅助杀伤肝癌细胞的活性，并研究其识别的抗原表位。方法：用细胞增殖法检测制备的抗体是否具有抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性；用生物信息软件分析GPC3蛋白C端（359～580残基）的结构及抗原特征，并据此将其分为4个截短片段，将克隆的各基因片段分别连接到原核表达载体pGEX-4T-1中，进行蛋白表达和纯化，用间接ELISA和Western印迹分析GPC3C端单克隆抗体的表位识别情况。结果与结论：制备的7株单克隆抗体对肝癌细胞HepG2均具有不同程度的辅助杀伤作用，其中5号单克隆抗体的辅助杀伤效果最好；表达并纯化了GPC3C端4个截短片段的重组蛋白；间接ELISA和Western印迹检测结果表明，7株抗体均特异性结合GPC3蛋白的473～525残基区段。
- 张红飞张慧娜李军锋于虹代晓朋赵光宇郭彦王凯娟张建营周育森
- 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3肝癌细胞HEPG2
- 人源靶向补体抑制物CR2-CD59在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达
- 2010年
- 目的构建人源靶向补体抑制物CR2-CD59,并筛选中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)高效表达细胞株。方法运用FuGENE6转染试剂,将含有人CR2-CD59的重组PEE14.1质粒转入CHO细胞,蛋氨酸亚氨基代砜(MSX)筛选出阳性克隆,并利用无血清培养基对CHO细胞表达株进行培养获得重组蛋白,以ELISA、SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定。结果成功构建PEE14.1-CR2-CD59重组质粒,获得CHO细胞稳定表达株。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CR2-CD59的相对分子质量同预期结果一致。ELISA和Western blot鉴定重组蛋白CR2-CD59可与CR2、CD59多克隆抗体特异性结合。且与含血清培养基相比,无血清培养基能明显提高CHO细胞的蛋白表达量(P<0.05)。结论在CHO细胞中成功表达人源靶向补体抑制物CR2-CD59。
- 郭彦寇志华孙世惠张传福赵光宇于虹宋宏彬乔飞陈万荣周育森
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞补体
- 高致病性禽流感H5N1病毒M1蛋白的重组表达及在感染检测中的初步应用
- 2011年
- 目的:原核表达重组高致病性禽流感基质蛋白M1并分析其在感染检测中的作用。方法:根据NCBI公布的基质蛋白M1的核苷酸序列设计特异性引物,用高致病禽流感H5N1病人分离的病毒提取病毒RNA进行反转录合成cD-NA,扩增基质蛋白M1基因。将M1基因克隆到pQE30原核表达载体进行非融合表达,纯化重组表达的蛋白并用免疫学方法检测分析。结果:克隆了高致病禽流感H5N1病毒基质蛋白M1基因,并采用pQE30原核表达载体成功表达该蛋白。以该重组蛋白为检测包被抗原建立间接ELISA,检测6份病人血清标本均为阳性,而正常对照人群为阴性。结论:高致病禽流感H5N1病毒M1蛋白可以应用于感染检测中。
- 茹志涛寇志华李军锋孙世慧赵光宇郭彦董雨春周育森
- 关键词：非融合表达
