江艳
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
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- 核内不均一性核糖核蛋白A2/B1在胰腺癌中的表达及其对B细胞淋巴瘤/白血病-X选择性剪切的调控机制
- 2015年
- 目的 探讨核内不均一性核糖核蛋白（hnRNP） A2/B1作为下游靶蛋白参与Fyn诱导的胰腺癌细胞B细胞淋巴瘤/白血病-X（bcl-X）选择性剪切调控的作用及其机制.方法 通过免疫组织化学方法观察28例胰腺癌标本hnRNP A2/B1的表达,并探讨其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.通过RNA-免疫共沉淀技术,探讨受Fyn活性调控的hnRNP A2/B1的下游靶基因.通过改变hnRNP A2/B1的表达,观察对bcl-X选择性剪切的影响.结果 28例胰腺癌组织标本中有23例出现hnRNP A2/B1的表达,表达水平与胰腺癌TNM分期（R =0.854,P＜0.05）、是否发生远处转移（R =0.698,P＜0.05）相关等因素有关.RNA-免疫共沉淀证实,hnRNP A2/B1能够与BxPC3细胞中bcl-X基因的Pre-mRNA结合.hnRNP A2/B1表达水平的改变参与BxPC3胰腺癌细胞中bcl-X两种剪切体比例的调控.结论 hnRNP A2/B1的表达水平与胰腺癌组织侵袭转移能力密切相关;hnRNPA2/B1可以与胰腺癌细胞中bcl-X基因结合,从而影响bcl-X选择性剪切.
- 江艳刘炜陈志宇
- 关键词：选择性剪切腺癌
- 肝内胆管上皮细胞上皮-间叶转化的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的观察人肝内胆管上皮细胞(human intrahepatic biliary epithelial cells,HIBEpiC)上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)现象,探讨EMT在胆管周围纤维化中的作用及其可能的分子机制。方法HIBEpiC用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理48、72 h后,用PCR及Western blot技术检测E-cadherin、S100A4和α-SMA的表达,以及与EMT信号通路相关的TGF-β1的表达;同时用紫杉醇、siRNA smad2/3阻断TGF-β1的作用,探讨TGF-β1/smad2/3信号通路在HIBEpiC发生EMT时的可能作用。结果HIBEpiC经LPS处理后,TGF-β1 mRNA表达于48 h达到高峰,72 h后开始下降,但维持较高水平(P<0.01,P<0.05);EMT标志物E-cadherin mRNA和蛋白表达随培养时间的延长逐渐降低(P<0.01),而S100A4、α-SMA mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01,P<0.05)。紫杉醇可使HIBEpiC中LPS所诱导的TGF-β1、Smad2/Smad3 mRNA表达明显下降,特别是在48 h最明显(P<0.01)。用siRNA技术可使Smad2/3 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01),同时可使与HIBEpiC共培养EMT标志物E-cadherin mRNA及蛋白质表达上调(P<0.01,P<0.05),S100A4和α-SMA表达明显下调(P<0.01)。结论LPS可诱导HIBEpiC中TGF-β1的表达,使胆管上皮细胞发生EMT,抑制TGF-β1或Smad2/3,可使EMT发生逆转,提示TGF-β1或Smad2/3可能成为预防胆道周围纤维化的一个潜在靶点。
- 赵礼金杨日高程龙王麦建江艳余德刚周廷梅王曙光
- 关键词：肝内胆管上皮细胞脂多糖类转化生长因子-Β1
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合雷公藤甲素诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合雷公藤甲素（Triptolide）诱导胰腺癌细胞凋亡的机制.方法 （1）将人胰腺癌细胞MiaPaca-2（简称MiaPaca-2细胞）分为4组：空白对照组（不加任何药物）,TRAIL^＋ Triptolide^-组（仅加TRAIL）,TRAIL^-Triptolide^＋组（仅加Triptolide）和TRAIL^＋Triptolide^＋组（加TRAIL和Triptolide）.采用CCK-8检测各组细胞活力.采用Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白多聚ADP核糖聚合酶（PARP）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8（Caspase-8）的表达.加入Caspase-8特异性抑制剂Z-IETD-FMK后,采用CCK-8检测细胞活力,采用Caspase-Glo荧光检测法检测Caspase-8活性.采用Western blot检测各组细胞髓样细胞白血病-1（Mcl-1）、额外的大B细胞淋巴瘤（Bcl-xL）和B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白的表达.（2）将MiaPaca-2细胞分为8组：①TRAIL-Mcl-1 siRNA-组（不加TRAIL、不转染Mcl-1 siRNA）,TRAIL^＋ Mcl-1siRNA-组（加TRAIL、不转染Mcl-1 siRNA）,TRAIL^-Mcl-1 siRNA^＋组（不加TRAIL、转染Mcl-1 siRNA）和TRAIL^＋ Mcl-1 siRNA＋组（加TRAIL、转染Mcl-1 siRNA）.②TRAIL^-Bcl-xL siRNA-组（不加TRAIL、不转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^＋ Bcl-xL siRNA^-组（加TRAIL、不转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^-Bcl-xL siRNA^＋组（不加TRAIL、转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^＋ Bcl-xL siRNA^＋组（加TRAIL、转染Bcl-xL siRNA）.采用CCK-8检测各组细胞活力.采用Western blot检测各组细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达.符合正态分布的计量资料以x^-±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 （1）空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组、TRAIL^-Triptolide^＋组和TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞活力分别为100.0％±1.1％、81.2％±2.3％、78.6％±3.6％、40.1％±2.5％;PARP蛋白相对表达量分别为0.510 ±0.028、0.720±0.072、1.250±0.023、
- 江艳刘炜陈志宇
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体雷公藤甲素
- CD44、CD133和TF与肝癌中门静脉癌栓形成及恶性预后相关被引量：9
- 2014年
- 目的探讨肝癌干细胞表面标志物CD44、CD133与组织因子(tissue factor,TF)在肝癌组织中的表达及分析其与肝癌临床病理资料及生存预后间的相互关系。方法应用免疫组化法检测387例肝癌组织中CD44、CD133和TF的表达,比较其表达与肝癌临床病理资料及预后间的关系。结果①387例肝癌组织中CD44、CD133和TF的阳性率分别为60.47%、55.81%和65.12%;CD44与CD133双阳性表达(CD44+CD133+)阳性率41.60%;CD44、CD133和TF三阳性表达(CD44+CD133+TF+)阳性率35.14%;②CD44、CD133与TF单独阳性表达以及CD44+CD133+和CD44+CD133+TF+均与肝癌患者门静脉癌栓、TNM分期和Edmendson分级具显著相关性(P<0.01);③CD90、CD44和CD133蛋白表达呈正相关(P<0.01);④CD44、CD133和TF阳性组的总生存时间短于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);CD44+CD133+组总生存时间短于非CD44+CD133+组总生存时间及CD44+CD133+TF+组总生存时间短于非CD44+CD133+TF+组,差异均有统计学意义(P<0.01);⑤多因素分析门静脉癌栓、TF+、CD44+CD133+和CD44+CD133+TF+是影响肝癌预后的独立危险因数(P<0.01)。结论 CD44、CD133和TF均与门静脉癌栓形成及恶性预后密切相关,可作为判断患者预后的指标。
- 陈凯李中虎江鹏张曦张玉君江艳李晓武
- 关键词：CD44CD133预后
- 肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA定量检测的临床意义被引量：3
- 2008年
- 目的:研究肝细胞肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量的变化,分析其作为微转移标记物的可行性及与复发转移的关系.方法:使用实时荧光定量RT-PCR检测64例肝细胞癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量,并进行平均6mo以上的随访;同时以8例肝硬化患者、4例肝增生患者、8例肝血管瘤患者和10例健康志愿者作为对照组,对比检测其外周血单核细胞AFP mRNA的表达量.结果:复发34例.HCC组的术前AFP mRNA表达量明显高于对照组.术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为85.9%,特异性为90.3%,准确率为87.4%.HCC患者术后外周血AFP mRNA表达量明显高于术前.HCC组外周血术前、术后AFP mRNA水平表达量与术后复发转移有明显相关性,与TNM分期、血管癌栓或侵犯有相关性,但与术时肿瘤数目、癌细胞分化程度、包膜完整性均与血清AFP浓度无相关.术后HCC组外周血AFP mRNA表达量与肿瘤大小有相关性.结论:实时荧光定量RT-PCR法检测HCC患者外周血AFP mRNA表达量有很高的敏感性和特异性,可以反映HCC患者血中是否存在肝癌细胞.手术可促进部分HCC细胞脱落入血.监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发转移有预测价值.
- 苏永杰揭中芳董家鸿陈志宇江艳
- 关键词：甲胎蛋白逆转录聚合酶链反应
- Fyn诱导Bcl-X选择性剪切调控胰腺癌细胞凋亡的机制研究
- 2015年
- 目的:明确非受体酪氨酸激酶Fyn在胰腺癌侵袭转移中的作用;探究Fyn是否参与Bcl-X基因的选择性剪切的调控,并阐明其分子机制。方法:对三种侵袭转移能力不同的胰腺癌细胞进行Fyn激酶活性测定,明确Fyn活性与胰腺癌侵袭转移能力之间的关系。将携带激酶活性缺失的KD-Fyn(Kinase Dead-Fyn)的腺病毒转染Bx PC3胰腺癌细胞,Transwell侵袭实验、TUNEL法分别检测抑制Fyn活性前后Bx PC3侵袭能力以及凋亡水平的改变。RT-PCR检测Bcl-X基因两种剪切体比例的变化。结果:转染KD-Fyn以后,Fyn激酶活性明显下降,降低至正常水平的1/2以下。抑制Fyn活性,转染组穿膜细胞数由原来的108±14降为54±7,明显降低了Bx PC3胰腺癌细胞侵袭运动能力,促进凋亡。RT-PCR证实,抑制Fyn活性明显改变了凋亡相关基因Bcl-X的选择性剪切方式。Bcl-X(s)/Bcl-X(L)的剪切比例由0.57±0.08改变为2.12±0.15。在裸鼠成瘤实验中,转染Fyn的裸鼠成瘤能力为100%(12/12),而转染KD-Fyn的裸鼠成瘤能力降低为16.7%(2/12),抑制Fyn活性可以明显抑制Bx PC3胰腺癌细胞在裸鼠中的成瘤能力。结论:抑制Fyn的激酶活性,可以下调胰腺癌细胞的侵袭转移能力,而这种作用是通过影响Bcl-X基因选择性剪切方式改变,进而影响胰腺癌细胞凋亡实现的。
- 陈志宇江艳李晓武
- 关键词：FYNBCL-X选择性剪切胰腺肿瘤凋亡
