王乐
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种改良的基因组DNA提取方法
- 1991年
- 限制性片段长度多态性(RFLP)分析法是以DNA水平诊断遗传性疾病和研究疾病的重要手段。在RFLP流程中,从血细胞中提取基因组DNA最为方便。本文介绍一种较易获得纯度高,产量多的基因组DNA提取方法。1 材料和方法1.1 试剂:Proteinase K、Sarcosine、RNase(Boehringer)。酚、氯仿抽提液:酚与氯仿(氯仿:异成醇,24:1,v/v)以1:1(v/v)混合。酚重蒸后用Tris·HCl pH8.
- 李传富刘丽萍蔡海江王乐柴建华
- 关键词：基因脱氧核糖核酸
- 载脂蛋白多基因家族分子进化的研究被引量：2
- 1994年
- 与脂质运输有关的载脂蛋白基因构成了一个复杂的多基因家族。为探讨这种演化时间长的基因家族的进化规律，本文首先建立了一种在非均衡进化速率条件下计算系统发生树中任意分支长度的简易方法，并可在此基础上算出无根分支系统树中分歧年代的期望值。进一步对本文１０个种属共２６种载脂蛋白的系统演化作了实际分析，结果提示：①ＡｐｏＡ－Ｉ、ＡｐｏＡ－ＩＶ，ＡｐｏＥ及ＡｐｏＡ－ＩＩ的共同祖先可能在奥陶纪水生脊椎动物中就已存在（４６０百万年前），其共同祖先似与七鳃鳗体内的主要载脂蛋白ＬＡＬ１和ＬＡＬ２有关；③祖先载脂蛋白基因在分化的早期可能同时受到了两种不同的选择压力，从而产生了结构上明显差异的两类载脂蛋白；③在啮齿动物门中ＡｐｏＥ分子高演化现象可能与其基因组中含有大量隐匿替换及在相应的系统分支中同义密码子使用的进化钟的破坏有关；④在系统发生过程中，不同载脂蛋白的分支演化速率差异明显，其平均单位进化期（ＵＥＰ）分别为：ＡｐｏＡ－Ｉ、ＡｐｏＡ－ＩＶ，均为２．０ＭＹ，ＡｐｏＡ－ＩＩ为１．７ＭＹ，ＡｐｏＥ为２．４ＭＹ；⑤ＡｐｏＥ中ＬＤＬ受体结构域的一级结构的进化保守性仍强于其它片段。最后，本文讨论了基因重复在载脂蛋白多基因家族演化中的作用。
- 王乐柴建华陆宇谈家桢
- 关键词：载脂蛋白分子进化多基因家族
- DMD基因全顺序的YAC克隆被引量：5
- 1992年
- 假肥大型肌营养不良症(duchenne/becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种主要发生于男性的进行性肌肉萎缩症。DMD病人一般在5岁左右发病,在20岁之前常由于心力及呼吸衰竭而死亡;BMD病人症状较轻,寿命也较长。发病率在活产男婴中为1/3500。基因组探针、cDNA探针印迹杂交及脉冲电泳分析都表明,该病主要由基因部分缺失(占病例的65％)所致。约有6％的病例已发现有基因部分重复(我们实验室的结果亦如此。
- 柴建华顾杨洪张成王乐
- 关键词：DMD
- 载脂蛋白基因家族的密码子空间分析──核苷酸替换的非随机进化选择
- 1996年
- ＤＮＡ分子进化中，对核苷酸替换的选择可呈选择中性或选择倾向性。为研究载脂蛋白基因进化过程中对核苷酸变化的选择方式，本文建立了基因的密码子空间分析方法。密码子空间是由密码子３个位置上核苷酸出现机率所组成的矩阵。对该空间中核苷酸分布的非随机性度量可以反映进化过程中核苷酸替换的选择方式。应用该法，我们发现载脂蛋白基因密码子空间第一及第三位的核苷酸分布呈高度非随机性。进一步研究表明：这种核苷酸的非随机分布可能与腺苷酸、胸苷酸对密码子位置的非中性选择有关。此外，还研究了同义密码子的选择使用与分支种系发生的关系。结果显示：载脂蛋白分子演化中存在着同义密码子使用的分子进化钟。这些研究提示密码子空间中核苷酸替换的非随机选择可能是载脂蛋白基因进化的一种特征。
- 王乐柴建华谈家桢
- 关键词：载脂蛋白基因核苷酸
- 酵母人工染色体DNA的大尺度物理图谱分析
- 1993年
- 以不同PBR322质粒DNA片段作为YAC(yeast artificial chromosome,酵母人工染色体)DNA左右臂探针,使用稀切点限制性内切酶和脉冲电泳(pul-sed field electrophoresis)技术对含有2bA3的800kbYAC作了4种限制酶大尺度物理图谱分析。
- 柴建华顾杨洪王乐张成
- 关键词：YACDNA酵母大尺度物理图谱
