目的观察Exendin-4（Ex-4）介导的猪髋动脉内皮细胞（PIEC）内一氧化氮（NO）释放与钙离子变化的关系,探讨Ex-4影响内皮细胞功能的机制。方法免疫荧光法检测确认PIEC上存在胰高血糖素样肽-1受体（GLP-1R）。NO荧光探针（DAF-FM DA）标记细胞内NO,荧光酶标仪检测Ex-4作用内皮细胞后不同时间点[加药前（0h）,加药后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12h,共13个时点]细胞内NO释放情况;钙离子荧光探针（Fura-2 AM）标记细胞内钙,荧光酶标仪检测细胞内3个不同时段（0~30min,4~4.5h,8~8.5h）钙浓度变化情况;评价Ex-4诱导PIEC释放NO与细胞内钙的关系。结果 PIEC上有GLP-1R表达。Ex-4引起PIEC内NO增加,且有时间依赖关系,与0h比较,4h开始NO明显增高（P〈0.05）,8h时细胞内NO含量较其他各时点均明显增高（P〈0.05）。Ex-4干预后0~30min、4~4.5h和8~8.5h 3个时段细胞内钙均较对照组高（2.042±2.115 vs 0.634±0.352,P〈0.01;0.413±0.154 vs 0.113±0.111,P〈0.01;0.309±0.133 vs 0.063±0.120,P〈0.01）。Ex-4干预PIEC后NO释放前期前段（0~30min）,细胞内钙逐渐上升（拟合曲线：y=0.106x＋1.326）;NO释放中期前段（4~4.5h,y=0.003x＋0.374）和NO释放后期前段（8~8.5h,y=-0.001x＋0.324）细胞内钙浓度虽同NO一样也高于对照组,但没有明显的变化趋势。结论 Ex-4可增加内皮细胞内NO释放,该过程与细胞内钙变化密切相关。
