陈进步
- 作品数：6 被引量：24H指数：4
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅重大科研项目江苏省科技厅社会发展基金江苏省实验诊断学重点实验室基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血浆DNA定量检测在鉴别诊断各种肝病中的临床应用价值
- 背景 乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个主要的人类健康问题。HBV是导致重症肝炎、急慢性肝炎、肝硬化以及原发性肝细胞肝癌(HCC)的主要原因。尤其在中国这样一个HBV感染的肝病大国,据报道HBV所致肝癌每年死亡数为384 ...
- 陈进步
- 关键词：血浆DNA原发性肝细胞肝癌重症肝炎实时荧光定量PCRALTAFP
- 文献传递
- 实时荧光定量检测人血浆中RASSF1A基因启动子甲基化被引量：5
- 2008年
- 目的建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法。方法以肺癌细胞株NCI-H460作为RASSF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μl健康人血浆中,制备得到模拟肺癌患者血浆。用磁珠法从模拟血浆样本和15例早期肺癌患者血浆中提取总DNA。对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以TaqMan技术的实时荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)进行检测。以模拟血浆样品作为标准品,用外标准曲线法对肺癌患者血浆中的甲基化RASSF1A进行定量。结果实时荧光定量MSP对模拟肺癌患者血浆的检测最低限为150拷贝(甲基化的肿瘤DNA)/ml(血浆)。15例肺癌患者5例RASSF1A甲基化阳性(33.3%)。5例肺癌患者血浆中甲基化的RASSF1A基因的浓度分别为2.56×103,8.20×104,1.45×104,3.31×104和4.24×104拷贝/ml。结论实时荧光定量MSP法检测肺癌患者血浆DNA中RASSF1A基因甲基化,灵敏度高,特异性强。
- 高丽潘世扬束永前谢而付陈进步赵文君穆原张丽霞陈丹黄珮珺张寄南
- 关键词：RASSF1A甲基化实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应血浆DNA
- 血浆中APC基因甲基化检测在早期肺癌诊断中的应用被引量：4
- 2008年
- 目的研究血浆DNA中APC基因启动子甲基化与肺部实体瘤良、恶性的关系,确定血浆中APC基因甲基化检测对早期肺癌诊断的意义。方法以92例CT检查发现肺部实体瘤(直径≤2 cm),并在CT引导下行肺部穿刺患者和23例健康人作为研究对象,收集血浆样本,利用磁珠法提取DNA,行亚硫酸氢盐化学修饰后,采用针对APC基因启动子区的甲基化引物和探针,以荧光定量MSP法(TaqM an探针)检测APC基因的甲基化。结果92例肺部实体瘤患者经病理诊断,有58例确诊为肺癌、31例为肺部良性疾病、3例未明确诊断。58例肺癌患者中有11例(19%)测出APC基因启动子区甲基化阳性,31例肺部良性疾病、3例未明确诊断和23例健康对照组均为阴性。结论检测血浆DNA中APC基因启动子甲基化有助于早期肺癌的诊断。
- 谢而付潘世扬高丽俞同福陈丹张丽霞陈进步穆原赵文君张寄南
- 关键词：血浆DNA早期肺癌甲基化APC基因
- 血浆中APC基因甲基化定量检测方法的建立及其初步应用
- 目的建立血浆APC基因甲基化荧光定量MSP检测方法,确定其检测的最低检出范围,并对肺癌患者的血浆进行定量分析。方法对APC基因启动子甲基化阳性肺癌细胞株NCI-H460细胞进行有限稀释法获取单个集落形成的细胞,以经典的酚...
- 潘世扬谢而付束永前高丽张丽霞陈丹陈进步赵文君穆原张寄南
- 关键词：肺肿瘤血浆DNAAPC甲基化
- 文献传递
- 血浆DNA定量用于重症肝炎患者肝细胞损伤评估被引量：9
- 2009年
- 目的定量重症肝炎患者血浆DNA的水平,与ALT比较,评估鉴别重症肝炎的临床应用价值。方法收集30例重症肝炎患者外周血标本6ml,以急性肝炎(20例)、慢性乙肝(90例)、肝硬化(45例)和健康体检者(100例)作为对照。用磁珠法提取血浆DNA,双重实时荧光定量PCR测定血浆DNA。结果乙型肝炎患者的血浆DNA水平(中位数)显著高于健康对照(104.2ng/mlvs.23.4ng/ml,P=0.0000)。血浆DNA水平在重症肝炎患者和急性肝炎、慢性乙肝及肝硬化患者之间都具有显著性差异(P=0.0018、0.0000和0.0000)。乙型肝炎患者的血清ALT水平(中位数)显著高于健康对照(107.5U/Lvs.24.1U/L,P=0.0000)。重症肝炎患者的血清ALT水平与急性肝炎之间有显著差异(P=0.0024),但与慢性乙肝和肝硬化之间没有差异(P=0.0600和1.0000)。ROC曲线分析显示,在鉴别重症肝炎和肝硬化以及慢性乙肝时,血浆DNA的鉴别能力显著优于血清ALT(AUC,0.95vs.0.51,P=0.0000;0.86vs.0.34,P=0.0000)。结论用双重荧光定量PCR检测血浆DNA水平,可以作为一个用于准确鉴别重症肝炎有价值的生物学标志。
- 陈进步潘世扬周镇先王芳徐建徐建陈丹黄珮珺蒋理顾兵
- 关键词：血浆DNA重症肝炎ALT肝细胞
- 肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化定量检测研究被引量：13
- 2009年
- 背景与目的:APC基因编码的蛋白参与信号转导途径,大量研究证实APC启动子区的高甲基化在肿瘤的发生发展中起重要作用。本研究建立血浆APC基因实时荧光定量甲基化特异性基因扩增(methylation-specificPCR,MSP)检测方法,并对临床肺癌患者血浆进行检测,以确定该方法在肺癌诊断中的应用价值。方法:将APC基因启动子甲基化阳性肺癌细胞株NCI-H460细胞用有限稀释法获取单个集落形成的细胞,以经典的酚-氯仿法提取细胞DNA,并用MSP对APC基因甲基化进行验证,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μL健康人血浆中,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟肺癌及肺癌患者、肺部良性疾病患者和健康对照者血浆中提取DNA,对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰;以模拟血浆样品作为标准品,采用外标准曲线法对各种血浆样品中APC甲基化进行定量分析。结果:所建立的实时荧光定量MSP检测方法的线性范围为1.5×102～1.5×105拷贝/mL,用该方法检测甲基化肿瘤细胞的DNA其最低检测限为1.5×102拷贝/mL。78例肺癌患者有40例组织中检测出APC基因甲基化阳性,其中的19例(47.5%)肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化阳性,APC甲基化浓度为1.67×102～6.78×103拷贝/mL,中位浓度为1.60×103拷贝/mL。38例组织阴性的肺癌患者、31例肺部良性疾病患者和23例健康者的血浆APC基因启动子甲基化均为阴性。结论:实时荧光定量MSP检测血浆APC基因甲基化在肺癌诊断方面具有潜在应用价值。
- 潘世扬谢而付束永前高丽张丽霞陈丹陈进步赵文君穆原张寄南
- 关键词：肺肿瘤血浆DNAAPC基因DNA甲基化
