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剧克元
作品数:
1
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供职机构:
广东医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
何承伟
广东医学院基础医学院生物化学与...
刘芳
广东医学院基础医学院生物化学与...
张月飞
广东医学院
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张月飞
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何承伟
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2004
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一种质粒介导的RNAi系统的建立
2004年
目的 构建mU6启动子驱动的,在真核细胞内表达短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的质粒载体;以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)为靶点观察该载体介导的RNAi效应。方法 从已知质粒中获取mU6启动子,经亚克隆后替换pcDNA3质粒中的CMV启动子,构建成pmU6质粒;设计并构建能表达针对GFP的shRNA的重组质粒,与表达GFP的质粒共转染细胞,用流式细胞仪检测GFP的表达水平。结果 表达shRNA的pmU6质粒载体转染细胞后抑制了细胞中GFP的表达,针对GFP基因不同位点的shRNA的RNAi效应差异很大。结论 pmU6质粒载体能介导RNAi效应,该载体可作为RNAi用于基因功能和基因治疗研究的有用工具。
何承伟
刘芳
张月飞
剧克元
关键词:
质粒载体
质粒介导
共转染
流式细胞仪检测
靶点
GFP
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