张艺平
- 作品数：15 被引量：27H指数：3
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- 小分子干扰核糖核酸转染小鼠成骨细胞的效率研究
- 2009年
- 目的研究直接转染化学合成小分子干扰核糖核酸(small interfering ribonucleic acid,siRNA)和通过质粒转导后在细胞内合成siRNA两种方法转染小鼠成骨细胞的转染效率,并优化实验条件。方法从无特定病原体(specefic pathogen free,SPF)级BALB/c新生鼠取材进行成骨细胞原代培养,经碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)和矿化结节检测鉴定为成骨细胞后传代至第3代,接种至24孔培养板。使用化学合成的经羧基荧光素标记的siRNA和带绿色荧光蛋白基因的质粒分别转染小鼠成骨细胞,在实验中改变siRNA和脂质体的用量,并改变转染时的细胞密度,通过荧光显微镜检测转染效率。同时,使用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的转染试剂的细胞毒性。结果使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞获得了较高的转染效率,其最大值达到90%以上,与质粒的转染效率相比有很大提高,且其细胞毒性在可接受的范围内。结论使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞可以获得较高的转染效率,是一种理想的实验方法。
- 付强李友瑞徐亚娟张艺平沈韵吴昌敬
- 关键词：SIRNA转染成骨细胞质粒
- 细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用，为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB／c小鼠成骨细胞，将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组，细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1．2Pa的流体剪切力，另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）和免疫荧光检测c—fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平，并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组，流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平（分别为0．1637±0．0303和0．0104±0．0070）和蛋白荧光强度（分别为177．14±9．37和150．95±6．17）升高，与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞（mRNA相对水平分别为0．0057±0．0021和0．0032±0．0014，蛋白荧光强度分别为117．96±4．11和119．77±5．19）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流体剪切力加载下，细胞松弛素D组细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因表达过程中的重要条件。
- 徐亚娟张艺平覃峰吴昌敬李友瑞付强
- 关键词：细胞骨架成骨细胞基因FOS流体剪切力
- 中医骨科康复治疗老年骨性膝关节炎临床疗效观察被引量：2
- 2014年
- 目的:观察中医骨科康复治疗老年骨性膝关节炎的临床疗效。方法自2013年3月~2014年3月,应用针灸、药浴、推拿及功能锻炼的中医骨科综合康复治疗方法治疗老年骨性膝关节炎患者33例,应用口服布洛芬缓释胶囊,疼痛剧烈者给予关节注射医用透明质酸钠治疗32例。对两组患者疼痛缓解及关节功能恢复作比较。结果观察组患者有效率为97.0%,对照组患者有效率为75.0%,两组患者有效率比较,差异有统计学意义(<0.05)。对照组患者治疗过程中3例出现不良反应,观察组患者未发现不良反应。结论采用中医骨科康复综合治疗的方法治疗老年骨性膝关节炎,可有效缓解疼痛症状,提高患者生活质量,不良反应少,安全性高。
- 张艺平
- 关键词：老年骨性关节炎
- 细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用。方法原代培养BALB/c小鼠颅骨成骨细胞,采用细胞松弛素D(CD)破坏细胞骨架完整性;以12dyne/cm2的流体剪切力对成骨细胞加载1.5h;分别应用实时荧光定量巢式PCR和免疫荧光的方法检测COX-2基因mRNA和蛋白的表达水平,并对结果进行双因素方差分析。结果采用CD破坏细胞骨架完整性,可以对流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达起拮抗作用(P<0.05);在无流体剪切力加载条件下,CD处理对COX-2mRNA和蛋白的表达水平无显著影响(P>0.05);流体剪切力加载1.5h能使成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);CD处理可显著降低流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论保持细胞骨架完整性是流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达过程中所必需的。
- 吴昌敬李友瑞徐亚娟郭玲张艺平付强
- 关键词：COX-2基因流体剪切力细胞骨架成骨细胞
- siRNA沉默小鼠原代成骨细胞LIMK2基因的实验研究
- 2010年
- 目的探讨采用RNA干扰抑制原代成骨细胞中LIMK2的表达及其抑制效率,为进一步研究LIMK2基因的作用奠定基础。方法针对小鼠LIMK2基因,化学合成3条siRNA,分别编号为R1、R2、R3,用脂质体分别介导转染到小鼠原代成骨细胞中,转染后24、48h提取细胞的总RNA和总蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,研究3条siRNA在不同时间点对LIMK2基因的抑制效率。结果RT-PCR结果显示编号为R3的siRNA对LIMK2mRNA表达的抑制效率最高,两组应用R3siRNA后的LIMK2 mRNA表达量分别为对照组的19.30%(转染后24h)、18.63%(转染后48h);Westernblot检测显示编码为R3的siRNA对LIMK2蛋白表达的抑制效果最明显,两组应用R3siRNA的LIMK2蛋白表达量分别仅为空白对照组的1.32%(转染后24h)、1.19%(转染后48h)。结论编号为R3的siRNA可以很好地抑制小鼠原代成骨细胞的LIMK2表达。
- 李友瑞覃峰张艺平邵敏锋陈睿沈韵付强
- 关键词：RNA干扰成骨细胞
- 手法复位夹板外固定治疗桡骨远端屈曲型粉碎性骨折的临床分析被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨手法复位夹板外固定治疗桡骨远端屈曲型粉碎性骨折的临床效果。方法:对湘乡市中医院2012-2014年收治的60例桡骨远端屈曲型粉碎性骨折患者进行回顾性分析。其中应用手法复夹板外固定35例,应用外固定支架固定术治疗25例,对两组患者治疗前后尺偏角、掌倾角、腕关节功能评分进行比较。结果:观察组的优良率为91.43%;对照组的优良率为64%,两组比较显著性差异(P<0.05)。结论:手法复位夹板外固定治疗桡骨远端屈曲型粉碎性骨折的疗效显著。
- 张艺平孙之镐
- 关键词：手法复位
- 肩臂形态塑形三块夹板治疗肱骨外科颈骨折的临床研究被引量：7
- 2012年
- 目的:比较肩臂形态塑形三块夹板与传统的四块夹板治疗肱骨外科颈骨折的疗效。方法:自2004年10月～2010年10月,应用肩臂形态塑形三块夹板治疗肱骨外科颈骨折46例,传统超肩关节四块夹板治疗45例,分别对2组病人的疼痛、功能、活动范围、解剖位置进行回顾性评估比较。结果:治疗组效率为97.8%;对照组有效率为84.4%,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。结论:肩臂形态塑形三块夹板是治疗肱骨外科颈骨折的一种理想的外固定装置。
- 张艺平孙之镐方楚权万仲梅黄乐辉罗韶君
- 关键词：肱骨外科颈骨折小夹板外固定
- 沉默LIMK2基因对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的采用RNA干扰沉默LIMK2基因来抑制细胞骨架的改建，观察流体剪切力作用下其对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后，进行流体剪切力加载或不加载。分别应用逆转录（RT）一PCR和免疫荧光检测c—fosm RNA和蛋白的表达，并进行统计学分析。结果在无流体剪切力加载条件下，单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建，并不能使成骨细胞c-fos mRNA（0．0108±0．0074与0．0042±0．0018，t=-1．86，P〉0．05）和蛋白（121±7与1194-6，t=-1．272，P〉0．05）的表达升高；流体剪切力能使成骨细胞c-fosmRNA（0．22034-0．1532比0．0042±0．0018，t=-707．35，P〈0．05）和蛋白（1784-12比119±6，t=-30．761，P〈0．05）的表达水平显著升高；RNA干扰处理可显著提高流体剪切力诱导成骨细胞c-fosmRNA（0．52804-0．0879比0．22034-0．1532，t=-1007．00，P〈0．05）和蛋白（224±46比1784-12，t=-6．853，P〈0．05）的表达水平；采用RNA干扰的方法抑制细胞骨架的改建，可以对流体剪切力诱导成骨细胞c—fosmRNA（F=84．388，P〈0．05）和蛋白（F=42．409，P〈0．05）的表达起协同作用。结论采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架的改建，可以促进成骨细胞在流体剪切力作用下的c-fos基因表达。
- 张艺平覃峰吴昌敬李友瑞陈睿邵敏峰付强
- 关键词：成骨细胞基因FOS流体剪切力
- 补肾活血汤治疗神经根型颈椎病32例临床观察被引量：1
- 2008年
- 目的:观察补肾活血汤治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法:将64例神经根型颈椎痛患者随机分为治疗组与对照组各32例,治疗组用补肾活血汤配合颈椎牵引治疗,对照组用扶他林片合颈椎牵引治疗。观察比较两组治疗两个疗程后的综合疗效及复发率。结果:治疗组总有效率为93.7%,对照组为75.0%;治疗组综合疗效优于对照组(P<0.05),两组复发率比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血汤治疗神经根型颈椎病炎疗效显著,复发率低。
- 张艺平伍小伟
- 关键词：补肾活血汤神经根型颈椎病扶他林片
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力(FSS)下成骨细胞增殖和分化的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰两种处理后,进行FSS加载或不加载。分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增殖、检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、采用流式细胞仪检测细胞周期,并进行统计分析。结果在无FSS加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能促进成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(3.600±0.447)%与(3.420±0.217)%,t=-0.810,P>0.05]、成骨细胞增殖性能(0.208±0.724与0.211±0.044,t=0.251,P>0.05)及ALP活性(0.095±0.001与0.090±0.020,t=-1.857,P>0.05)增高;FSS能使成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(11.110±3.840)%>(3.420±0.217)%,t=-4.460,P<0.05]、成骨细胞的增殖性能(0.336±0.029>0.211±0.044,t=-13.878,P<0.05)及ALP的活性(0.110±0.010>0.090±0.012,t=-7.937,P<0.05)增高;RNA干扰处理可显著提高FSS下的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(25.140±3.329)%>(3.600±0.447)%,t=-14.339,P<0.05]、成骨细胞增殖性能(0.480±0.953>0.208±0.724,t=-13.454,P<0.05)及ALP活性(0.140±0.006>0.095±0.001,t=-7.384,P<0.05)。抑制细胞骨架改建与FSS作用两因素对提高成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比(F=240.125,P<0.05)、成骨细胞增殖性能(F=44.550,P<0.05)及ALP活性(F=13.798,P<0.05)存在正交互作用。结论采用RNA干扰抑制细胞骨架改建,可以促进FSS作用下成骨细胞的增殖和分化。
- 邵敏锋徐亚娟向映辉李友瑞张艺平陈睿付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
