李友瑞
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
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- 两种形态纤维桩修复离体前牙抗折性的研究
- 目的：探讨两种不同形态纤维桩修复对根管治疗前牙的抗折强度和折裂型的影响.方法：24颗上前牙随机分成3组,每组8颗.分别行A组：柱形纤维桩/树脂核/全瓷冠、B组：锥形纤维桩/树脂核/全瓷冠及C组：直接全瓷冠修复.测定各样本...
- 郭玲刘艳辉郑树灿罗祖凤李友瑞付强
- 关键词：纤维桩根管治疗牙抗折强度
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 目的：研究RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力下成骨细胞增殖和分化的影响.方法：对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后,进行流体剪切力加载或不加载.分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增...
- 徐亚娟邵敏锋向映辉李友瑞张艺平付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 小分子干扰核糖核酸转染小鼠成骨细胞的效率研究
- 2009年
- 目的研究直接转染化学合成小分子干扰核糖核酸(small interfering ribonucleic acid,siRNA)和通过质粒转导后在细胞内合成siRNA两种方法转染小鼠成骨细胞的转染效率,并优化实验条件。方法从无特定病原体(specefic pathogen free,SPF)级BALB/c新生鼠取材进行成骨细胞原代培养,经碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)和矿化结节检测鉴定为成骨细胞后传代至第3代,接种至24孔培养板。使用化学合成的经羧基荧光素标记的siRNA和带绿色荧光蛋白基因的质粒分别转染小鼠成骨细胞,在实验中改变siRNA和脂质体的用量,并改变转染时的细胞密度,通过荧光显微镜检测转染效率。同时,使用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的转染试剂的细胞毒性。结果使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞获得了较高的转染效率,其最大值达到90%以上,与质粒的转染效率相比有很大提高,且其细胞毒性在可接受的范围内。结论使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞可以获得较高的转染效率,是一种理想的实验方法。
- 付强李友瑞徐亚娟张艺平沈韵吴昌敬
- 关键词：SIRNA转染成骨细胞质粒
- 细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用。方法原代培养BALB/c小鼠颅骨成骨细胞,采用细胞松弛素D(CD)破坏细胞骨架完整性;以12dyne/cm2的流体剪切力对成骨细胞加载1.5h;分别应用实时荧光定量巢式PCR和免疫荧光的方法检测COX-2基因mRNA和蛋白的表达水平,并对结果进行双因素方差分析。结果采用CD破坏细胞骨架完整性,可以对流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达起拮抗作用(P<0.05);在无流体剪切力加载条件下,CD处理对COX-2mRNA和蛋白的表达水平无显著影响(P>0.05);流体剪切力加载1.5h能使成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);CD处理可显著降低流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论保持细胞骨架完整性是流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达过程中所必需的。
- 吴昌敬李友瑞徐亚娟郭玲张艺平付强
- 关键词：COX-2基因流体剪切力细胞骨架成骨细胞
- siRNA沉默小鼠原代成骨细胞LIMK2基因的实验研究
- 2010年
- 目的探讨采用RNA干扰抑制原代成骨细胞中LIMK2的表达及其抑制效率,为进一步研究LIMK2基因的作用奠定基础。方法针对小鼠LIMK2基因,化学合成3条siRNA,分别编号为R1、R2、R3,用脂质体分别介导转染到小鼠原代成骨细胞中,转染后24、48h提取细胞的总RNA和总蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,研究3条siRNA在不同时间点对LIMK2基因的抑制效率。结果RT-PCR结果显示编号为R3的siRNA对LIMK2mRNA表达的抑制效率最高,两组应用R3siRNA后的LIMK2 mRNA表达量分别为对照组的19.30%(转染后24h)、18.63%(转染后48h);Westernblot检测显示编码为R3的siRNA对LIMK2蛋白表达的抑制效果最明显,两组应用R3siRNA的LIMK2蛋白表达量分别仅为空白对照组的1.32%(转染后24h)、1.19%(转染后48h)。结论编号为R3的siRNA可以很好地抑制小鼠原代成骨细胞的LIMK2表达。
- 李友瑞覃峰张艺平邵敏锋陈睿沈韵付强
- 关键词：RNA干扰成骨细胞
- 细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用，为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB／c小鼠成骨细胞，将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组，细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1．2Pa的流体剪切力，另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）和免疫荧光检测c—fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平，并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组，流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平（分别为0．1637±0．0303和0．0104±0．0070）和蛋白荧光强度（分别为177．14±9．37和150．95±6．17）升高，与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞（mRNA相对水平分别为0．0057±0．0021和0．0032±0．0014，蛋白荧光强度分别为117．96±4．11和119．77±5．19）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流体剪切力加载下，细胞松弛素D组细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因表达过程中的重要条件。
- 徐亚娟张艺平覃峰吴昌敬李友瑞付强
- 关键词：细胞骨架成骨细胞基因FOS流体剪切力
- 沉默LIMK2基因对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的采用RNA干扰沉默LIMK2基因来抑制细胞骨架的改建，观察流体剪切力作用下其对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后，进行流体剪切力加载或不加载。分别应用逆转录（RT）一PCR和免疫荧光检测c—fosm RNA和蛋白的表达，并进行统计学分析。结果在无流体剪切力加载条件下，单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建，并不能使成骨细胞c-fos mRNA（0．0108±0．0074与0．0042±0．0018，t=-1．86，P〉0．05）和蛋白（121±7与1194-6，t=-1．272，P〉0．05）的表达升高；流体剪切力能使成骨细胞c-fosmRNA（0．22034-0．1532比0．0042±0．0018，t=-707．35，P〈0．05）和蛋白（1784-12比119±6，t=-30．761，P〈0．05）的表达水平显著升高；RNA干扰处理可显著提高流体剪切力诱导成骨细胞c-fosmRNA（0．52804-0．0879比0．22034-0．1532，t=-1007．00，P〈0．05）和蛋白（224±46比1784-12，t=-6．853，P〈0．05）的表达水平；采用RNA干扰的方法抑制细胞骨架的改建，可以对流体剪切力诱导成骨细胞c—fosmRNA（F=84．388，P〈0．05）和蛋白（F=42．409，P〈0．05）的表达起协同作用。结论采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架的改建，可以促进成骨细胞在流体剪切力作用下的c-fos基因表达。
- 张艺平覃峰吴昌敬李友瑞陈睿邵敏峰付强
- 关键词：成骨细胞基因FOS流体剪切力
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力(FSS)下成骨细胞增殖和分化的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰两种处理后,进行FSS加载或不加载。分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增殖、检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、采用流式细胞仪检测细胞周期,并进行统计分析。结果在无FSS加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能促进成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(3.600±0.447)%与(3.420±0.217)%,t=-0.810,P>0.05]、成骨细胞增殖性能(0.208±0.724与0.211±0.044,t=0.251,P>0.05)及ALP活性(0.095±0.001与0.090±0.020,t=-1.857,P>0.05)增高;FSS能使成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(11.110±3.840)%>(3.420±0.217)%,t=-4.460,P<0.05]、成骨细胞的增殖性能(0.336±0.029>0.211±0.044,t=-13.878,P<0.05)及ALP的活性(0.110±0.010>0.090±0.012,t=-7.937,P<0.05)增高;RNA干扰处理可显著提高FSS下的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(25.140±3.329)%>(3.600±0.447)%,t=-14.339,P<0.05]、成骨细胞增殖性能(0.480±0.953>0.208±0.724,t=-13.454,P<0.05)及ALP活性(0.140±0.006>0.095±0.001,t=-7.384,P<0.05)。抑制细胞骨架改建与FSS作用两因素对提高成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比(F=240.125,P<0.05)、成骨细胞增殖性能(F=44.550,P<0.05)及ALP活性(F=13.798,P<0.05)存在正交互作用。结论采用RNA干扰抑制细胞骨架改建,可以促进FSS作用下成骨细胞的增殖和分化。
- 邵敏锋徐亚娟向映辉李友瑞张艺平陈睿付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 付强张艺平徐亚娟李友瑞邵敏锋
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 丝切蛋白在成骨细胞细胞骨架改建中的作用探讨
- 2010年
- 目的 采用流体剪切力加载成骨细胞,通过观察细胞骨架改建和测定丝切蛋白及磷酸化丝切蛋白的含量,探讨丝切蛋白在流体剪切力引起成骨细胞细胞骨架改建中的作用.方法 采用1.2 Pa的流体剪切力作用于成骨细胞0（空白对照组）、15、30、45、60、120 min后,蛋白质印迹法测定细胞内丝切蛋白及磷酸化丝切蛋白的含量,采用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色观察纤维型肌动蛋白的变化.结果 成骨细胞受流体剪切力刺激后,随加载时间延长,细胞内磷酸化丝切蛋白含量持续升高.流体剪切力作用60 min内丝切蛋白随加载时间延长有所下降,但加载120 min时细胞内丝切蛋白含量（0.254±0.026）为加载60 min（0.162±0.004）的1.5倍.随流体剪切力作用时间延长,各组细胞纤维型肌动蛋白染色逐渐增强,纤维增粗;加载120 min时的平均荧光强度（42.93±6.41）为空白对照组（15.41±3.60）的2.8倍（P＜0.05）.结论 流体剪切力刺激可通过丝切蛋白磷酸化,使成骨细胞细胞骨架发生改建.
- 刘艳辉李友瑞邵敏锋张晓娟付强
- 关键词：成骨细胞细胞骨架流体剪切力
