徐亚娟
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
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- 小分子干扰核糖核酸转染小鼠成骨细胞的效率研究
- 2009年
- 目的研究直接转染化学合成小分子干扰核糖核酸(small interfering ribonucleic acid,siRNA)和通过质粒转导后在细胞内合成siRNA两种方法转染小鼠成骨细胞的转染效率,并优化实验条件。方法从无特定病原体(specefic pathogen free,SPF)级BALB/c新生鼠取材进行成骨细胞原代培养,经碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)和矿化结节检测鉴定为成骨细胞后传代至第3代,接种至24孔培养板。使用化学合成的经羧基荧光素标记的siRNA和带绿色荧光蛋白基因的质粒分别转染小鼠成骨细胞,在实验中改变siRNA和脂质体的用量,并改变转染时的细胞密度,通过荧光显微镜检测转染效率。同时,使用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的转染试剂的细胞毒性。结果使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞获得了较高的转染效率,其最大值达到90%以上,与质粒的转染效率相比有很大提高,且其细胞毒性在可接受的范围内。结论使用化学合成的siRNA转染原代培养的小鼠成骨细胞可以获得较高的转染效率,是一种理想的实验方法。
- 付强李友瑞徐亚娟张艺平沈韵吴昌敬
- 关键词：SIRNA转染成骨细胞质粒
- 细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达中的作用。方法原代培养BALB/c小鼠颅骨成骨细胞,采用细胞松弛素D(CD)破坏细胞骨架完整性;以12dyne/cm2的流体剪切力对成骨细胞加载1.5h;分别应用实时荧光定量巢式PCR和免疫荧光的方法检测COX-2基因mRNA和蛋白的表达水平,并对结果进行双因素方差分析。结果采用CD破坏细胞骨架完整性,可以对流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达起拮抗作用(P<0.05);在无流体剪切力加载条件下,CD处理对COX-2mRNA和蛋白的表达水平无显著影响(P>0.05);流体剪切力加载1.5h能使成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);CD处理可显著降低流体剪切力诱导成骨细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论保持细胞骨架完整性是流体剪切力诱导成骨细胞COX-2基因表达过程中所必需的。
- 吴昌敬李友瑞徐亚娟郭玲张艺平付强
- 关键词：COX-2基因流体剪切力细胞骨架成骨细胞
- 细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用，为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB／c小鼠成骨细胞，将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组，细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1．2Pa的流体剪切力，另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）和免疫荧光检测c—fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平，并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组，流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平（分别为0．1637±0．0303和0．0104±0．0070）和蛋白荧光强度（分别为177．14±9．37和150．95±6．17）升高，与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞（mRNA相对水平分别为0．0057±0．0021和0．0032±0．0014，蛋白荧光强度分别为117．96±4．11和119．77±5．19）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流体剪切力加载下，细胞松弛素D组细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因表达过程中的重要条件。
- 徐亚娟张艺平覃峰吴昌敬李友瑞付强
- 关键词：细胞骨架成骨细胞基因FOS流体剪切力
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力(FSS)下成骨细胞增殖和分化的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰两种处理后,进行FSS加载或不加载。分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增殖、检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、采用流式细胞仪检测细胞周期,并进行统计分析。结果在无FSS加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能促进成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(3.600±0.447)%与(3.420±0.217)%,t=-0.810,P>0.05]、成骨细胞增殖性能(0.208±0.724与0.211±0.044,t=0.251,P>0.05)及ALP活性(0.095±0.001与0.090±0.020,t=-1.857,P>0.05)增高;FSS能使成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(11.110±3.840)%>(3.420±0.217)%,t=-4.460,P<0.05]、成骨细胞的增殖性能(0.336±0.029>0.211±0.044,t=-13.878,P<0.05)及ALP的活性(0.110±0.010>0.090±0.012,t=-7.937,P<0.05)增高;RNA干扰处理可显著提高FSS下的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(25.140±3.329)%>(3.600±0.447)%,t=-14.339,P<0.05]、成骨细胞增殖性能(0.480±0.953>0.208±0.724,t=-13.454,P<0.05)及ALP活性(0.140±0.006>0.095±0.001,t=-7.384,P<0.05)。抑制细胞骨架改建与FSS作用两因素对提高成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比(F=240.125,P<0.05)、成骨细胞增殖性能(F=44.550,P<0.05)及ALP活性(F=13.798,P<0.05)存在正交互作用。结论采用RNA干扰抑制细胞骨架改建,可以促进FSS作用下成骨细胞的增殖和分化。
- 邵敏锋徐亚娟向映辉李友瑞张艺平陈睿付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 目的：研究RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力下成骨细胞增殖和分化的影响.方法：对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后,进行流体剪切力加载或不加载.分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增...
- 徐亚娟邵敏锋向映辉李友瑞张艺平付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化的影响
- 目的：研究RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力下成骨细胞增殖和分化的影响。
方法：原代培养BALB/c小鼠颅骨成骨细胞，采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架改建;以12 dyne/cm2流体剪切力对成骨细...
- 徐亚娟
- 关键词：成骨细胞细胞分化流体剪切力细胞骨架RNA干扰
- 文献传递
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 付强张艺平徐亚娟李友瑞邵敏锋
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因表达的影响
- 目的研究细胞骨架的完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因表达中的作用。材料与方法原代培养BALB/c小鼠成骨细胞采用细胞松弛素D处理的方法破坏成骨细胞细胞骨架的完整性以12dyne/cm2的流体剪切力对成骨细胞进行...
- 付强张艺平徐亚娟吴昌敬陈睿
- 文献传递
- 细胞体外流体剪切力加载装置平行平板流室的合理设计与应用被引量：6
- 2009年
- 【目的】不同形式的剪切力作用对维持细胞、组织及机体正常生理状态有重要意义,合适的加载装置是细胞力学研究的前提。参照传统平行平板流室的理论和方法,研究适用于体外细胞的流体剪切力加载装置。【方法】设计制作平行平板流室加载装置,通过多普勒超声测速技术对流室流速等流体特征进行检测;并通过对小鼠成骨细胞的加载实验,检测装置的可行性与可操作性。【结果】彩色多普勒检测结果显示该装置内流体流动较均匀,剪切力加载均匀准确,操作简单方便。【结论】本研究装置可用于体外研究成骨细胞等力学敏感细胞在形态学、生理生化等方面对剪切力的反应。
- 付强刘艳辉徐亚娟郭玲吴昌敬
- 关键词：流体剪应力多普勒超声成骨细胞
- IPS e．maxPress全瓷冠和三单位固定桥的临床评价被引量：4
- 2009年
- 目的探讨在牙科美容修复中应用IPSe．maxPress全瓷冠桥的临床疗效及其对基牙牙周组织的影响，总结相关影响因素。方法采用前瞻性研究的方法，对符合纳入标准的19例患者行IPSe．maxPress全瓷冠或全瓷三单位固定桥修复，其中全瓷冠25例，全瓷三单位固定桥6例，参照改良美国公共健康协会标准，对其临床效果进行追踪评价，并记录修复体及对照牙菌斑指数（plagueindex，PLI）及龈沟出血指数（suleus bleading index，SBI）。结果经过3～12个月的临床追踪观察，无1例IPSe．maxPress修复体松动、折裂、脱落或被替换，修复体组和对照牙组的PLI及SBI的差异无统计学意义，修复体组在不同复诊时间PLI及SBI前后差异无统计学意义。结论IPSe．maxPress全瓷冠桥可获良好的近期临床效果。
- 郭玲郑树灿罗祖凤覃峰徐亚娟付强
- 关键词：全瓷冠固定桥
