彭贵洪
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 人尿激酶原及其变体的研究
- 彭贵洪
- 关键词：大肠杆菌
- 五种尿激酶变体基因及在大肠杆菌中的表达
- 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域，其目的是利用寡核苷酸介导的定点突变，改造人尿激酶基因，获得五种尿激酶变体基因，即：(Lys<Sup>151</Sup>→Glu)UK，(Lys<Sup>151...
- 马忠朱德煦彭贵洪余瑞荣薛宇鸣
- 文献传递
- T7 启动子作用下人尿激酶原 cDNA 在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化被引量：6
- 1997年
- 化学合成的人尿激酶原ｃＤＮＡ克隆在表达质粒ｐＥＴ１１ｄ中，在Ｔ７启动子的作用下，经０１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中获得表达。其表达量占菌体总蛋白的１５％，表达产物以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，Ｚｎ２＋选择性沉淀，抗体亲和柱层析，及Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ亲和吸附，所表达的人尿激酶原被纯化为单一条带，其比活约１１００００ＩＵ／ｍｇ。
- 彭贵洪马忠薛宇鸣陈于红朱德煦
- 关键词：人尿激酶原T7启动子
- 五种尿激酶变体基因及在大肠杆菌中的表达
- 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域，其目的是利用寡核苷酸介导的定点突变，改造人尿激酶基因，获得五种尿激酶变体基因，即：(Lys<Sup>151</Sup>→Glu)UK，(Lys<Sup>151...
- 马忠朱德煦彭贵洪余瑞荣薛宇鸣
- 文献传递
- 纤维蛋白高选择性尿激酶变体的研究被引量：2
- 1997年
- 双链尿激酶(tcu-PA)作为最早进入临床使用的溶栓药物,由于它对纤维蛋白(fibrin)没有选择性,大剂量静脉注射时会使血液中纤维蛋白原(Fibrinogen)降解,从而引发出血,因此在临床应用上受到限制.单链尿激酶(scu-PA,又称尿激酶原)是tuc-PA的前体,但它不同于一般的酶原,具有一定的内在纤溶酶原激活剂(PA)活性,而且能选择性地在Fibrin表面活化纤溶酶原,从而选择性地溶解血栓凝块.scu-PA经纤溶酶(Plasmin)的作用在Lys158-Ile159肽键断裂,转变成tcu-PA,由Cys148和Cys279间形成的一对二硫键将两条钛链连接、我们以前的工作证明尿激酶A链的Lys151和Arg154氨基酸残基是导致双链尿激酶对纤维蛋白低选择性的结构基础.本文通过定点突变手段构建了变体尿激酶原(Glu151-Gly154-rscu-PA)基因(以下简称mscu-PA),并在E.coli中获得表达、测定了表达产物的双链形式mtcu-PA及未突变的重组尿激酶原(rscu-PA)及其双链形式(rtcu-PA)对Fibrin的亲和性以及对血浆中纤维蛋白的选择性,结果证明所得变体双链尿激酶对Fibrin具有较高的选择性.
- 彭贵洪马忠余瑞荣薛宇鸣朱德煦
- 关键词：定点突变纤维蛋白选择性尿激酶
