余瑞荣
- 作品数：13 被引量：12H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 尿激酶对纤维蛋白低亲和性的结构基础——Ⅱ.尿激酶A链149—157片段对纤维蛋白促进tPA激活纤溶酶原的抑制作用被引量：1
- 1991年
- 本文从低分子量尿激酶(LUK)中分离并纯化了UK 135—157片段,用放射结合分析证明UK 135—157片段和纤维蛋白对tPA的结合呈竞争关系。用酪蛋白降解系统证明此片段可抑制纤维蛋白促进tPA对纤溶酶原的激活。化学合成了UK149—157九肽(R-肽)以及由Asp取代Arg 154和Arg 156的相应九肽(D-肽),发现R-肽对纤维蛋白促进tPA激活纤溶酶原有显著的抑制作用,而D-肽却全无作用。本文结果证明:UK 149—157片段中的正电荷残基在抑制环饼结构域的纤维蛋白结合活性中起重要作用。
- 宋安刘建宁余瑞荣崔大敷周同明崔恒苒朱德煦
- 关键词：尿激酶纤维蛋白亲和性
- 人血管内皮细胞存在尿激酶受体u-PA及PMA引起的受体调变
- 1992年
- 尿激酶为体内一种纤溶酶原激活因子,在血栓溶解及血栓病的治疗中起了重要作用。同样,血管内皮细胞在凝血和纤溶中也起着重要作用,它们两者关系如何?本实验通过体外培养人脐带静脉内皮细胞,用标记的^(125)Ⅰ-尿激酶进行放射结合分析。本实验发现,脐带静脉内皮细胞上存在尿激酯受体,每个细胞上尿激酶最大结合位点为1.4×10~6个,解离常数Kd值为7.5×10^(-12)M;经过PMA作用后,每个细胞上最大结合位点上升至2.2×10~6个,解离常数Kd上升至9×10^(012)M。证明人脐带静脉内皮细胞上存在尿激酶受体,PMA可促进尿激酶受体在培养内皮细胞上的表达,而解离常数Kd值变化不大。
- 邢军任雪峰余瑞荣顾平陈海滨
- 关键词：尿激酶类内皮
- 纤维蛋白高亲和性尿激酶变体的研究被引量：1
- 1996年
- 150～156位氨基酸缺失的变体尿激酶原scu-PA(dscu-PA)和未突变的尿激酶原(rscu-PA)均在E.coli中获得表达.经体外变复性,抗体亲和层析,2种表达产物均被纯化至银染1条带.经plasmin活化,从dscu-PA得到的变体双链尿激酶dtcu-PA,从rscu-PA得到的重组双链尿激酶rtcu-PA和天然双链尿激酶ntcu-PA对合成底物S2444具有相似的酶学性质,说明缺失突变未影响尿激酶的催化活性中心.对纤维蛋白 fibrin-clot和^(125)I-fibrin-sepharose诱导的纤溶, dtcu-PA明显优于 rtcu-PA,甚至还优于rscu-PA.dtcu-PA对血浆中纤维蛋白原的含量几乎无影响.结果表明dtcu-PA具有较高的fibrin选择性,同时也证明双链尿激酶能够通过改造而获得较高的fibrin选择性.
- 马忠余瑞荣华子春朱德煦
- 关键词：尿激酶药物化学
- 尿激酶B链的制备及性质研究
- 1992年
- 本文将巯基乙醇还原法与苯甲脒-Sepharose 4B亲和层析法相结合,于亲和柱上裂解了尿激酶蛋白的A、B链,制备出高纯度的尿激酶B链,活力回收达89.3％。样品经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为均一单带,测得分子量为32KD,比活为214×10~3iu/mg蛋白,活性的最适pH为8.0。在体外测活系统中,尿激酶B链有类似于尿激酶的性质。若以纤维蛋白溶酶原为底物,测得B链的Km值为尿激酶的3.2倍。由此推测,天然形成的尿激酶结构更有利于纤溶反应。
- 汪继东余瑞荣司世林
- 关键词：尿激酶B链
- tPA Kringle-2结构域基因的合成及其在大肠杆菌中表达
- 1993年
- 本文用固相磷酸三酯法合成了组织型纤溶酶原激活剂(tPA)174-262片段(Kringle-2结构域)对应的DNA序列。利用PIN Ⅲ OmpA2表达质粒的信号序列和Plpp-lac启动子在大肠杆菌中表达了tPA Kringle-2。约2/3的表达产物分泌在大肠杆菌的周间质中。经硫酸铵盐析,Lysine-Sepharose亲和层析和FPLC-MONOQ离子交换层析等3步纯化后其氨基酸组成和tPA 174-262片段的组成一致。放射结合分析证明重组表达的tPA Kringle-2具有纤维蛋白结合活性。
- 华子春付和亮陈于红余瑞荣王进朱德煦
- 关键词：TPA大肠杆菌基因表达
- 五种尿激酶变体基因及在大肠杆菌中的表达
- 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域，其目的是利用寡核苷酸介导的定点突变，改造人尿激酶基因，获得五种尿激酶变体基因，即：(Lys<Sup>151</Sup>→Glu)UK，(Lys<Sup>151...
- 马忠朱德煦彭贵洪余瑞荣薛宇鸣
- 文献传递
- 去糖人绒膜促性腺激素的制备及其性质鉴定被引量：1
- 1990年
- 人绒膜促性腺激素(hCG)是一种糖蛋白,我们用Sephadex G-100和SE-Se-phadex C-50二步柱层析从人尿hCG粗品纯化了hCG,样品经三氟甲烷磺酸(TFMS)处理,得到在非还原条件下SDS-PAGE单带纯的DG-hCG。初步研究表明DG-hCG与天然hCG具有相似的圆二色性谱,但它们体内的代谢清除率完全不同。
- 余瑞荣侯伟陈琳
- 关键词：HCG糖蛋白
- 人黑色素瘤细胞分泌的组织纤溶酶原激活剂(t-PA)的纯化被引量：1
- 1990年
- 本文报道了培养的人黑色素瘤细胞分泌的组织纤溶酶原激活剂(t-PA)的纯化方法。Bowes株人黑色素瘤细胞的分泌产物,经CM-Sephadex C--50层析,赖氨酸-Sepharose 4B,苯甲眯-sepharose 4B亲和层析后,即可得到纯化470倍的蛋白纯品。样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为均一单带,测得其分子量约为72kD。纯化的t-PA与尿激酶相比较,发现前者有更高亲和纤维蛋白的能力。
- 余瑞荣法明刘建宁
- 关键词：黑色素瘤细胞T-PA纯化
- 纤维蛋白高选择性尿激酶变体的研究被引量：2
- 1997年
- 双链尿激酶(tcu-PA)作为最早进入临床使用的溶栓药物,由于它对纤维蛋白(fibrin)没有选择性,大剂量静脉注射时会使血液中纤维蛋白原(Fibrinogen)降解,从而引发出血,因此在临床应用上受到限制.单链尿激酶(scu-PA,又称尿激酶原)是tuc-PA的前体,但它不同于一般的酶原,具有一定的内在纤溶酶原激活剂(PA)活性,而且能选择性地在Fibrin表面活化纤溶酶原,从而选择性地溶解血栓凝块.scu-PA经纤溶酶(Plasmin)的作用在Lys158-Ile159肽键断裂,转变成tcu-PA,由Cys148和Cys279间形成的一对二硫键将两条钛链连接、我们以前的工作证明尿激酶A链的Lys151和Arg154氨基酸残基是导致双链尿激酶对纤维蛋白低选择性的结构基础.本文通过定点突变手段构建了变体尿激酶原(Glu151-Gly154-rscu-PA)基因(以下简称mscu-PA),并在E.coli中获得表达、测定了表达产物的双链形式mtcu-PA及未突变的重组尿激酶原(rscu-PA)及其双链形式(rtcu-PA)对Fibrin的亲和性以及对血浆中纤维蛋白的选择性,结果证明所得变体双链尿激酶对Fibrin具有较高的选择性.
- 彭贵洪马忠余瑞荣薛宇鸣朱德煦
- 关键词：定点突变纤维蛋白选择性尿激酶
- 抗活化血小板单克隆抗体与尿激酶杂合分子的纤溶作用被引量：5
- 1993年
- 用双功能团试剂将尿激酶(UK)B链和抗人活化血小板α-颗粒膜蛋白GMP-140单克隆抗体(SZ-51)的Fab片段共价偶联。偶联的杂合分子UK-SZ-51保留了原抗体的结合专一性,它在体外的溶栓效率较尿激酶提高约5倍,其溶栓作用对血浆中纤维蛋白原的含量无影响。
- 杜鸰余瑞荣华子春朱德煦吴国新阮长耿
- 关键词：单克隆抗体尿激酶纤溶作用抗体
