李启明
- 作品数：24 被引量：110H指数：5
- 供职机构：北京生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学理学更多>>
- 麻疹疫苗株S-191全基因序列测定及与流行株进化关系的初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的对国内现在使用的Shanghai-191（S-191）疫苗株进行全基因组测序，针对国内已经分离出的毒株，分析它们与疫苗株的核酸序列差异以及流行特征。方法利用RT-PCR的方法分段扩增S-191疫苗株的全基因并测序，从GenBank中获得全球24条麻疹全基因序列和211株中国各省分离到的麻疹流行株以及WHO各基因型参考株的N基因C端456个核苷酸序列，计算麻疹序列13个编码区和非编码区的突变率，分析病毒株和疫苗株基因型和遗传距离，构建基因亲缘性关系树。结果获得S-191疫苗株的全基因序列并递交GenBank收录，进化树分析表明大部分流行株为H1基因型。各省流行株与S-191相比遗传距离为6．7％～8．2％。突变率分析显示非编码区的突变率明显高于编码区，编码区中N基因的突变率最大。结论本研究表明，中国大陆的麻疹病毒流行株以H1基因型为主，不存在明显的地域流行差异，在时间上也没有明显的突变积累特征。S-191疫苗株与近年来的麻疹流行株在遗传距离上差异较大，其保护作用需做进一步追踪探讨。
- 于洁王海龙陈实张靖张卿靳玉琴李启明
- 关键词：麻疹病毒RT-PCR
- 肺炎球菌表面黏附素A和表面膜蛋白A的研究进展被引量：1
- 2011年
- 肺炎球菌表面黏附素A(Pneumococcal surface adhesin A,PsaA)为脂蛋白,属于ABC型转运蛋白复合物(ATPbinding cassette transporter),存在于各型肺炎球菌中,是其重要的毒力因子和黏附因子,编码基因高度保守,具有转运Mn2+及黏附功能。肺炎球菌表面膜蛋白A(Pneumococcal surface protein A,PspA)是与其毒力相关的一种重要的表面抗原,在目前发现的所有临床分离的肺炎球菌中几乎均存在,其编码基因变异性较大。PsaA和PspA均为肺炎球菌的保护性抗原和新型肺炎球菌疫苗的研发热点之一。本文就这两种蛋白的结构、功能、免疫学特性及应用的研究进展作一综述。
- 唐玉龙李启明
- 关键词：链球菌肺炎
- 重组诺如病毒GⅠ．1和GⅡ．4型类病毒颗粒免疫效果初步评价被引量：10
- 2016年
- 目的初步评价基于汉逊酵母表达系统的重组诺如病毒（norovirus，NoV）GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白类病毒颗粒（virus-like particles，VLPs）的免疫效果。方法将纯化后VLPs经SDS-PAGE和Western blot分析及鉴定，透射电镜观察颗粒形态，动态光散射仪分析颗粒粒径大小及分布情况。将GⅠ.1和GⅡ.4型VLPs按照不同的免疫方案免疫BALB/c小鼠，组织血清抗原（histo-blood group antigen，HBGA）-VLPs阻断试验检测50%阻断滴度（50% of blocking titer，BT50）。结果纯化后重组GⅠ.1和GⅡ.4型VP1蛋白纯度大于90%，Western blot分析可见特异性条带。VLPs直径为30～50 nm，界限清晰，颗粒直径与天然病毒颗粒接近，颗粒大小分布均一。免疫小鼠血清中佐剂组BT50明显高于无佐剂组。结论应用含铝佐剂的GⅠ.1和GⅡ.4型VP1 VLPs免疫小鼠，诱生了较好的HBGA阻断抗体，可作为诺如病毒疫苗的组分抗原。
- 马智静唐芳张学峰张靖侯俊伟陈实李启明
- 关键词：诺如病毒
- 人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法和外源蛋白表达盒、表达系统
- 本发明涉及一种人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法，该方法使人乳头瘤病毒的结构蛋白L1和L2在同一双缺陷型甲醇酵母菌表达系统中共表达，所述表达系统使用包含以下元件的外源蛋白表达盒：a)标记基因序列；b)源自甲醇酵母菌的启动子...
- 李启明张靖陈实靳玉琴马智静梁宇张学峰于洁卫江波沈心亮
- 文献传递
- 我国生物医学期刊稿件中动物伦理和福利问题的调查与分析被引量：18
- 2017年
- 【目的】了解我国生物医学期刊关于动物伦理和福利的现状,加强我国生物医学期刊动物伦理审查,促进我国动物伦理学发展。【方法】分析我国15种生物医学期刊近2~3年发表的涉及动物实验的所有论著中关于动物伦理和福利的处理情况。【结果】共检索到涉及动物实验的论文531篇,其中实验通过动物伦理委员会批准的论文占比为21.66%,获得伦理审批号的论文仅占2.45%;声明研究遵循国际、国家或者机构动物保护和使用指南的论文所占比例仅为10.55%。【结论】我国生物医学期刊的动物伦理审查现状有待改善,建议通过学习国际生物医学编辑组织关于动物伦理和福利的要求以及国内外实验动物伦理和福利的法律法规,提高我国研究人员以及编审人员的动物伦理意识,提升我国生物医学期刊动物伦理和福利的水平。
- 刘凤华陈立敏李启明
- 关键词：实验动物
- 流行性腮腺炎疫苗株S79全基因序列测定与分析被引量：2
- 2010年
- 目的 腮腺炎疫苗株S79工作种子噬斑纯化及全基因组测序,针对国内已经分离出的毒株,从分子生物学角度探讨疫苗保护力相关问题.方法 噬斑纯化S79疫苗株,利用RT-PCR分段扩增S79株两种亚株的全基因并测序,比较S79株与其来源株Jeryl Lynn（JL）核酸序列差异;从GenBank中获得WHO各基因型参考株和中国腮腺炎流行株疏水蛋白（SH）序列,分析病毒株和疫苗株遗传距离,并构建基因亲缘性关系树.结果 S79疫苗株由两种亚株构成,比例为2∶5（major∶minor）,获得全基因序列并递交GenBank;与相应的JL株相比,核苷酸序列同源性分别为99.7%和100%.亚株序列中存在散在区段异源重组.S79疫苗株为A基因型,中国的流行株为F基因型,遗传距离为11.2%～20.0%.结论 S79疫苗株由两种亚株构成,两亚株的全基因序列与JL株基本一致,但亚株的比例与国际上应用的其他JL疫苗株存在较大差异.疫苗株与中国流行株不属于同一基因型,遗传距离较远.S79疫苗免疫保护效果的差异可能主要与疫苗株和流行株不属于同一基因型有关.
- 张靖梁宇陈实于洁靳玉琴马智静张学峰卫江波李启明
- 关键词：腮腺炎病毒
- 一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法
- 本发明提供了一种重组多形汉逊酵母菌及其制备方法。本发明的重组多形汉逊酵母菌(Hansenula polymorpha)包含乙肝病毒的L蛋白的编码基因和S蛋白的编码基因。本发明的多形汉逊酵母菌与现有技术相比具有以下优点和积...
- 李启明张靖张学峰梁宇靳玉琴马智静陈实于洁
- 文献传递
- 多糖结合疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种多糖结合疫苗，包含细菌多糖与载体蛋白的化学偶联物，所述载体蛋白为细菌粘膜侵袭相关蛋白，如大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位、空肠弯曲菌鞭毛分泌蛋白A1、空肠弯曲菌鞭毛分泌蛋白A2、肺炎球菌表面蛋白、肺炎球菌表面黏...
- 李启明张学峰马智静唐玉龙张靖陈实靳玉琴卫江波
- 文献传递
- J链的分子特性及其生物学功能的研究进展被引量：1
- 2008年
- 人呼吸道和胃肠道的黏膜表面占人体总黏膜表面的很大比例，它很容易受到病原体和毒性物质的侵袭。黏膜表面是机体抵御外源微生物侵袭的第一道防线。它不仅可以拥有黏液层，而且黏膜固有层的浆细胞可以产生和运输抗体，主要是分泌型IgA（SIgA）和IgM（SIgM）。分泌型抗体可以为黏膜层提供获得性免疫保护。
- 高岩岩李启明沈心亮
- 关键词：生物学功能分子特性黏膜固有层毒性物质免疫保护胃肠道
- 肺炎球菌表面蛋白A的原核表达及其作为多糖结合疫苗载体的可行性
- 2011年
- 目的原核表达肺炎球菌表面蛋白A(Pneumococcal surface protein A,PspA),并探讨其作为多糖结合疫苗候选载体的可行性。方法合成PspA基因,定向克隆至pET-30a(+)载体,构建重组表达质粒pET-30a-rPspA,转化E.coli Sta(rDE3)菌株,IPTG诱导表达。表达产物经Ni离子亲和层析纯化后,经Western blot鉴定。取破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)及纯化的rPspA,分别与A群脑膜炎球菌多糖(Group A meningococcal capsular polysaccharide,GAMP)通过溴化氰活化法进行偶联,获得rPspA-GAMP与TT-GAMP多糖蛋白结合物,对其进行纯化及检定。多糖结合物分别以滴鼻和肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,评价其诱发的体液免疫和黏膜免疫水平。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定构建正确;表达产物主要以可溶形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%,经纯化后纯度可达90%,可与His单抗特异性结合;肌肉注射途径显示,两种蛋白载体的结合物均能诱发较高水平的体液免疫,不同载体间差异无统计学意义(P>0.05);滴鼻途径显示,载体蛋白rPspA的结合物刺激产生sIgA的能力优于传统载体TT,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原核表达并纯化了rPspA,其具有新型多糖蛋白载体的潜力,也可作为黏膜投递型多糖结合疫苗的候选载体。
- 李启明唐玉龙张学峰靳玉琴马智静张靖
- 关键词：多糖结合疫苗
