沈谊清
- 作品数：10 被引量：48H指数：4
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：湖南省高校创新平台开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 水痘减毒活疫苗的研制及免疫效果观察被引量：30
- 2006年
- 目的观察由日本大阪大学微生物病研究会（BIKEN）提供的Oka株水痘病毒研制的水痘减毒活疫苗的稳定性、安全性和免疫原性。方法按WHO规程要求建立主种子批和工作种子批，检测病毒的生物学特性和疫苗稳定性。在上海市、江苏省进行临床试验，5批疫苗共接种468名2～6岁易感儿童，观察接种者的不良反应，测定抗体阳转率及抗体几何平均滴度。结果Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上传10代，其生物学特性相似，疫苗在2～8℃保存2年，病毒滴度下降0．3～0．51gPFU／剂。易感儿童接种后皮疹发生率为0．21％；低、中、高发热反应率分别为21．79％、10．68％、0．64％。抗体阳转率平均为92．03％。结论研制的水痘减毒活疫苗的质量与国外同类产品相似，在易感儿童中的安全性与免疫原性良好，宜推广应用。
- 陈志慧王宪明殷月娣王亮沈谊清徐建军吕国贞王树巧
- 关键词：水痘疫苗稳定性免疫效果
- 疫苗生产中使用的酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响
- 2015年
- 目的：观察疫苗生产中使用的消毒剂酸性苯酚和碱性苯酚对M RC‐5细胞生长的影响。方法将酸性苯酚（0．37％）和碱性苯酚（0．74％）分别加入M RC‐5细胞培养瓶中，观察细胞生长形态，绘制细胞生长曲线，测定细胞贴壁率。分别采用 t检验和χ2检验对结果进行比较。结果加入酸性和碱性苯酚后，第7天的细胞数分别为6．65×10^5和7．12×10^5，与对照组（6．93×10^5）相比，差异无统计学意义（t＝0．476，P＝0．654；t＝0．334，P＝0．752）；第8小时的细胞贴壁率分别为88．3％和96．0％，与对照组（90．3％）相比，差异亦无统计学意义（χ^2＝0．765，P＝0．659；χ^2＝0．376，P＝0．585）。结论微量酸性和碱性苯酚对M RC‐5细胞的生长没有显著影响。
- 杨月莲王亮周锋谢蕾沈谊清蒋樱王伟周翎乔
- 关键词：细胞消毒剂
- 人巨细胞病毒gB/AD1基因在CHO细胞中的表达和纯化被引量：1
- 2015年
- 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)在自然界中普遍存在,g B是该病毒表面的一种重要糖蛋白,其AD1序列是主要的中和抗体表位之一。首先以HCMV基因组为模板,通过PCR技术扩增出g B基因的一个片段,该片段删除了跨膜区和胞内区,仅保留AD1中和抗体表位,然后被连接到哺乳动物细胞表达质粒p SGHV0上,与dhfr基因通过电击转染至CHO/dhfr-细胞,继而用60 nmol/L MTX筛选稳定表达细胞株,用ELISA和Western blot检测AD1重组蛋白的表达,最后用Ni2+-NTA亲和层析进行纯化。获得了真核细胞表达的重组融合蛋白,表达量约为10 mg/L,蛋白纯度可达到80%以上,为HCMV表面糖蛋白g B功能的进一步研究以及基因工程疫苗的开发奠定了基础。
- 董金蓉毛树宝谢震渊沈谊清吴金妍罗剑方芳
- 关键词：CHO细胞纯化
- 水痘减毒活疫苗无明胶稳定剂的筛选和应用被引量：3
- 2014年
- 目的 研制不含明胶的新型稳定剂,以提高水痘减毒活疫苗的安全性.方法 以现行水痘减毒活疫苗稳定剂配方为基础,去除明胶,配制4种不同的新型稳定剂（B、C、D、E配方）.用无明胶稳定剂制备水痘减毒活疫苗,并将制备的无明胶稳定剂疫苗（B、C、D、E疫苗）与现行的含明胶稳定剂疫苗（作为对照的A疫苗）进行比较,确定最佳稳定剂配方.结果 疫苗成品于37℃放置7d后,A、B、C、D、E疫苗的相关质量指标均符合《水痘减毒活疫苗注册标准》的要求,病毒滴度分别为3.6、3.5、3.3、3.3、3.3 lgPFU/0.5 ml,但C、D、E疫苗的病毒滴度已降至临界值.疫苗成品于2～8℃放置24个月后,A、B、C、D、E疫苗的病毒滴度分别为3.4、3.4、3.2、3.0、2.8 lgPFU/0.5 ml,其中C、D、E疫苗的病毒滴度已低于规定的标准（3.3 lgPFU/0.5 ml）,仅B疫苗的相关质量标准符合规定的要求,且与A疫苗（对照）没有差异.结论 去除明胶的B配方稳定剂对水痘病毒有较好的保护作用.
- 马相虎沈谊清杨月莲陈哲文程鹏飞王亮
- 关键词：水痘减毒活疫苗稳定性
- H1N1裂解疫苗辅以C48/80佐剂滴鼻免疫小鼠能够提供抗甲流的保护作用
- 2014年
- 2009年"甲型H1N1流感"全球流行导致了数以万计人的死亡。疫苗的及时研制为预防、控制甲流的传播,减少发病率和死亡率做出了重大贡献。甲流疫苗辅以佐剂滴鼻免疫能更好地抵御甲流攻击。将A/California/7/2009(H1N1)裂解疫苗辅以化合物48/80(C48/80)佐剂滴鼻免疫雌性BALB/c小鼠,免疫一次,免疫后28 d,小鼠用致死剂量的同源病毒进行攻击。结果发现,滴鼻免疫组的抗体滴度均达到很高的水平,而且随着H1N1裂解疫苗剂量的增加,其对小鼠的保护作用越强,同时添加佐剂可以更有效提高H1N1裂解疫苗的保护效果。实验结果说明H1N1裂解疫苗辅以C48/80佐剂滴鼻免疫能够保护小鼠免受流感病毒的感染。
- 谢震渊方芳沈谊清吴金妍陈则郑眉
- 关键词：疫苗佐剂滴鼻免疫
- 冻干水痘减毒活疫苗的生产工艺被引量：5
- 2002年
- 目的以MRC-5人二倍体细胞为基质,建立制备Oka株水痘减毒活疫苗的生产工艺。方法Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上培养,收获细胞,经冻融,超声波,纯化,澄清,冻干等工序,生产8批疫苗,按规程要求进行检定。结果 各项指标全部合格,制品质量稳定,37℃ 7d热稳定性良好,儿童免疫后抗体阳转率为92.7％。结论 工艺流程合理,制品质量符合WHO规程要求,免疫后副反应甚微,免疫原性良好。
- 徐建军王宪明殷月娣沈谊清张英王亮王树巧陈志慧
- 关键词：冻干水痘减毒活疫苗生产工艺质控
- MRC-5人二倍体细胞培养OKa株水痘病毒的研究被引量：4
- 2001年
- 取自美国菌种保藏中心(ATCC)的MRC-5人二倍体细胞建立工作细胞库。按生物制品《人二倍体细胞建株、检定及制备疫苗规程》要求进行全面检定,证实其不携带外源因子,无致肿瘤源性,染色体正常,在该细胞上连续传代及培养的OKa株水痘病毒,其繁殖特性甚佳,细胞病变规律,病毒滴度稳定,是用于制备疫苗的良好细胞基质。
- 殷月娣徐建军王宪明张英沈谊清王亮程鹏飞陈志慧
- 关键词：疫苗病毒滴度
- 国产水痘减毒活疫苗的稳定性观察被引量：2
- 2014年
- 目的观察国产水痘减毒活疫苗的稳定性。方法取40批上海生物制品研究所有限责任公司（以下简称上海公司）2007~2013年生产的水痘减毒活疫苗,按照国家食品药品监督管理局批准的水痘减毒活疫苗注册标准和《中国药典》的要求进行各项检定：在0月进行热稳定性试验;在0和18月进行鉴别试验、物理检查、水分检测、无菌检查、异常毒性检查、牛血清白蛋白残留量检测、抗生素残留量检测（2010年10月以后生产的疫苗）;在0、6、12、18月进行病毒滴定。结果上海公司2007~2013年生产的水痘减毒活疫苗在有效期内各项指标检定结果均符合水痘减毒活疫苗注册标准和《中国药典》的相关要求。结论上海公司生产的水痘减毒活疫苗质量稳定,安全有效。
- 马相虎沈坚陈哲文王亮沈谊清晏子厚
- 关键词：水痘减毒活疫苗稳定性
- 冻干水痘活疫苗的研制被引量：1
- 1999年
- 陈志慧徐建军王宪明殷月娣仓尧卿沈谊清
- 关键词：冻干疫苗水痘活疫苗
- 细胞工厂自动化操作系统在水痘疫苗生产中的应用被引量：6
- 2014年
- 目的:应用细胞工厂自动化操作系统生产水痘疫苗,从而提高水痘疫苗产量,减少批间差异性。方法:采用细胞工厂及细胞工厂自动化操作系统进行水痘疫苗的传代制备,与人工操作细胞工厂进行传代制备作对照,比较两种操作方式的细胞生长情况、操作时间等,并对制备的原液进行各项检定。结果:在同样细胞复苏量的情况下,采用自动化操作系统比人工操作生产的水痘疫苗产量要高,批间差异小,操作时间短,且各项检测指标均合格。结论:利用细胞工厂自动化操作系统制备水痘疫苗,提高了疫苗批间均一性,降低人工劳动强度,缩短操作时间,可用于水痘疫苗的大规模生产。
- 马相虎沈谊清杨月莲周锋谢蕾树志龙周翎乔王亮
- 关键词：水痘疫苗细胞工厂
