王亮
- 作品数：18 被引量：71H指数：4
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 水痘减毒活疫苗的研制及免疫效果观察被引量：30
- 2006年
- 目的观察由日本大阪大学微生物病研究会（BIKEN）提供的Oka株水痘病毒研制的水痘减毒活疫苗的稳定性、安全性和免疫原性。方法按WHO规程要求建立主种子批和工作种子批，检测病毒的生物学特性和疫苗稳定性。在上海市、江苏省进行临床试验，5批疫苗共接种468名2～6岁易感儿童，观察接种者的不良反应，测定抗体阳转率及抗体几何平均滴度。结果Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上传10代，其生物学特性相似，疫苗在2～8℃保存2年，病毒滴度下降0．3～0．51gPFU／剂。易感儿童接种后皮疹发生率为0．21％；低、中、高发热反应率分别为21．79％、10．68％、0．64％。抗体阳转率平均为92．03％。结论研制的水痘减毒活疫苗的质量与国外同类产品相似，在易感儿童中的安全性与免疫原性良好，宜推广应用。
- 陈志慧王宪明殷月娣王亮沈谊清徐建军吕国贞王树巧
- 关键词：水痘疫苗稳定性免疫效果
- 水痘疫苗生产工艺变更前后Oka株病毒基因序列及疫苗质量分析被引量：3
- 2017年
- 目的 通过对采用细胞工厂工艺进行细胞培养前后的Oka株病毒基因序列和水痘疫苗质量进行分析比较，评价生产工艺变更对水痘疫苗质量的影响。方法 从水痘疫苗原液提取病毒基因组，采用PCR法扩增片段，通过对PCR产物测序或克隆质粒测序并拼接，获得Oka株的病毒全基因序列，并与GenBank中相关序列比对。对工艺变更前后生产的疫苗进行病毒滴度、牛血清白蛋白残留量和抗生素残留量比较。结果 工艺变更前后的疫苗病毒基因序列一致，检测到33个单核苷酸多态性位点为亲本型和疫苗型碱基共存，具有典型的Oka株特征，没有GenBank或文献报道的新突变。工艺变更前后生产疫苗的平均病毒滴度分别为5.00和5.02 lg蚀斑形成单位/ml，两者间的差异无统计学意义（t＝1.1，P＝0.26），且各项关键指标均符合企业标准和药典要求。结论 将细胞工厂引入生产工艺后，水痘疫苗具有与原工艺生产的制品相似的安全性和质量一致性。
- 袁萍谢蕾王月红黄帼英孙范玉刘朝阳周翎乔马雷钧石玮王亮朱为
- 关键词：水痘疫苗
- 水痘-带状疱疹病毒Oka株与临床分离株可变区基因的序列分析被引量：2
- 2012年
- 目的对水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)Oka株(V-Oka株)与分离于临床水痘患者的野毒株进行可变区基因序列比对分析。方法提取V-Oka株和VZV临床分离株的基因组DNA,对其串联重复序列区(R区)进行PCR扩增和测序;将R3基因的纯化产物与pMD18-T载体连接,转化感受态大肠杆菌JM109,提取质粒,经双酶切鉴定及测序;将测序结果与GenBank中登录的V-Oka株基因序列进行比对分析。结果 R1～R5基因扩增产物及R3基因重组质粒的双酶切产物片段大小均与预期相符;V-Oka株较稳定,测序结果与GenBank中登录的V-Oka株R1～R5基因序列一致,野毒株R区序列呈现多态性,与V-Oka株有差异,R4区序列区别明显。结论水痘患者的致病毒株为野毒株;R4的重复单位拷贝数可为临床快速鉴别V-Oka株与野毒株提供科学的手段。
- 陈哲文金于兰瞿爱东马相虎王亮
- 关键词：水痘疫苗可变区
- 水痘-带状疱疹病毒Oka疫苗株与野毒株序列比对被引量：1
- 2011年
- 目的观察水痘-带状疱疹病毒（varicella—zoster virus，VZV）Oka疫苗株（V—Oka株）的传代稳定性，并与分离于水痘患者的野毒株进行序列比对。方法将V—Oka株在人二倍体细胞MRC-5中连续传代培养至50代，提取32、34、38、42、46和50代V—Oka株及野毒株的DNA，对主要基因（ORF31、ORF62、ORF68、R区）进行PCR扩增和测序，并进行序列比对。结果与GenBank中的V—Oka株序列相比，32代至50代V-Oka株的ORF31、ORF62、ORF68、R区序列稳定，并趋于减毒。未发现野毒株序列发生如同V—Oka株的独特变异。结论连续传代培养至50代，V—Oka株的分子遗传学特性保持稳定。序列比对显示，水痘患者的致病毒株为野毒株，而非V—Oka株。
- 陈哲文金于兰瞿爱东马相虎王亮
- 关键词：水痘疫苗
- 细胞工厂培养箱在水痘疫苗生产中的应用研究被引量：2
- 2016年
- 目的 应用细胞工厂培养箱在水痘疫苗生产过程中进行细胞培养和病毒培养,以提高病毒滴度,减少批间差异.方法 采用细胞工厂培养箱对MRC-5细胞和水痘病毒Oka株进行培养,以传统孵房培养为对照,比较两种方式的细胞生长和病毒感染情况,以及原液病毒滴度和半成品得率.采用t检验对结果进行比较.结果 在同批次同量细胞复苏的情况下,细胞工厂培养箱培养的细胞和病毒与传统孵房培养相比,分布更密集、更均匀,且批间差异较小.细胞工厂培养箱培养得到的水痘病毒滴度为5.1～5.2 lg噬斑形成单位（plaque-forming unit,PFU）/ml,高于传统孵房培养病毒（4.9～5.1 lgPFU/ml）（t=-3.17,P＜0.05）;前者培养制备的半成品得率也高于后者,分别为100％和76％～100％（t=-2.69,P＜0.05）.结论 在水痘疫苗生产过程中应用细胞工厂培养箱,能够提高病毒滴度和批间均一性,适合水痘疫苗的大规模生产.
- 毛树宝程庆陈越王亮谢蕾
- 关键词：细胞培养技术水痘疫苗病毒滴度
- 水痘减毒活疫苗无明胶稳定剂的筛选和应用被引量：3
- 2014年
- 目的 研制不含明胶的新型稳定剂,以提高水痘减毒活疫苗的安全性.方法 以现行水痘减毒活疫苗稳定剂配方为基础,去除明胶,配制4种不同的新型稳定剂（B、C、D、E配方）.用无明胶稳定剂制备水痘减毒活疫苗,并将制备的无明胶稳定剂疫苗（B、C、D、E疫苗）与现行的含明胶稳定剂疫苗（作为对照的A疫苗）进行比较,确定最佳稳定剂配方.结果 疫苗成品于37℃放置7d后,A、B、C、D、E疫苗的相关质量指标均符合《水痘减毒活疫苗注册标准》的要求,病毒滴度分别为3.6、3.5、3.3、3.3、3.3 lgPFU/0.5 ml,但C、D、E疫苗的病毒滴度已降至临界值.疫苗成品于2～8℃放置24个月后,A、B、C、D、E疫苗的病毒滴度分别为3.4、3.4、3.2、3.0、2.8 lgPFU/0.5 ml,其中C、D、E疫苗的病毒滴度已低于规定的标准（3.3 lgPFU/0.5 ml）,仅B疫苗的相关质量标准符合规定的要求,且与A疫苗（对照）没有差异.结论 去除明胶的B配方稳定剂对水痘病毒有较好的保护作用.
- 马相虎沈谊清杨月莲陈哲文程鹏飞王亮
- 关键词：水痘减毒活疫苗稳定性
- 自动化系统在水痘疫苗半成品配制中的应用
- 2017年
- 目的应用自动化系统进行水痘疫苗的半成品配制，以降低劳动强度，提高产品均一性。方法采用自动化系统完成水痘疫苗的原液稀释和半成品分装，并与人工操作方法进行比较，比较两种方法的清洁、灭菌和保温效果以及疫苗半成品、成品的检定结果。结果自动化操作可使工作人员减少60％，工时缩短80％。两种方法对容器或罐体的清洗和灭菌效果均达到工艺要求。采用自动化方法保温时温度可控。用自动化操作系统制备的半成品疫苗，其滴度差异小于人工操作方法，变异系数分别为0．00）％和2．17％。两种方法生产的成品疫苗的稳定性试验结果均达到标准[病毒滴度不低于3．3lg蚀斑形成单位（plaque-formingunit，PFU）／o．5ml]。自动化和人工方法生产的成品疫苗于37℃放置7d，病毒滴度分别为3．7和3．6lgPFU／0．5ml；于2～8℃放置18个月分别为3．5和3．4lgPFU／0．5ml。结论将自动化系统应用于水痘疫苗的原液稀释、半成品分装，可降低劳动强度，提高产品的均一性。
- 郑波彭晓魏祯杨月莲马相虎徐敏菁姚远王亮
- 关键词：水痘疫苗自动化工艺学制药药物稳定性
- 冻干水痘减毒活疫苗的生产工艺被引量：5
- 2002年
- 目的以MRC-5人二倍体细胞为基质,建立制备Oka株水痘减毒活疫苗的生产工艺。方法Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上培养,收获细胞,经冻融,超声波,纯化,澄清,冻干等工序,生产8批疫苗,按规程要求进行检定。结果 各项指标全部合格,制品质量稳定,37℃ 7d热稳定性良好,儿童免疫后抗体阳转率为92.7％。结论 工艺流程合理,制品质量符合WHO规程要求,免疫后副反应甚微,免疫原性良好。
- 徐建军王宪明殷月娣沈谊清张英王亮王树巧陈志慧
- 关键词：冻干水痘减毒活疫苗生产工艺质控
- 疫苗生产中使用的酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响
- 2015年
- 目的：观察疫苗生产中使用的消毒剂酸性苯酚和碱性苯酚对M RC‐5细胞生长的影响。方法将酸性苯酚（0．37％）和碱性苯酚（0．74％）分别加入M RC‐5细胞培养瓶中，观察细胞生长形态，绘制细胞生长曲线，测定细胞贴壁率。分别采用 t检验和χ2检验对结果进行比较。结果加入酸性和碱性苯酚后，第7天的细胞数分别为6．65×10^5和7．12×10^5，与对照组（6．93×10^5）相比，差异无统计学意义（t＝0．476，P＝0．654；t＝0．334，P＝0．752）；第8小时的细胞贴壁率分别为88．3％和96．0％，与对照组（90．3％）相比，差异亦无统计学意义（χ^2＝0．765，P＝0．659；χ^2＝0．376，P＝0．585）。结论微量酸性和碱性苯酚对M RC‐5细胞的生长没有显著影响。
- 杨月莲王亮周锋谢蕾沈谊清蒋樱王伟周翎乔
- 关键词：细胞消毒剂
- 水痘减毒活疫苗Oka株与野生型水痘病毒序列的比较
- 目的:观察水痘减毒活疫苗Oka株(V-Oka)的传代稳定性,并与来源于水痘患者的野生型病毒序列做比较。方法:将V-Oka病毒在人二倍体细胞MRC-5连续传代至50代,提取32、34、38、42、46、50代V-Oka病毒...
- 陈哲文金于兰瞿爱东马相虎王亮
- 关键词：水痘减毒活疫苗
- 文献传递
