王一恬
- 作品数：3 被引量：11H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 扣囊复膜孢酵母α-淀粉酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达与重组酶性质被引量：5
- 2014年
- 通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的α因子信号肽下游,构建重组表达载体pKLAClSfA。重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799,筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平较高的重组菌。酶活检测和SDS-PAGE电泳检测均显示,重组菌分泌重组酶SfA到发酵液中。酶学性质研究表明:SfA最适温度为45℃,最适pH5.0,在pH4.5~5.5、50℃条件下保持稳定。Ca^(2+)等二价金属离子对SfA酶活有激活作用,EDTA强烈的抑制SfA活性。HPLC分析显示SfA水解糊精获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽三糖是主要产物,占水解产物总量的52%。
- 郭玉婉沈微王一恬樊游陈献忠王正祥
- 关键词：乳酸克鲁维酵母麦芽三糖
- 果糖基转移酶在酿酒酵母中异源表达及酶学性质分析被引量：3
- 2015年
- 采用RT-PCR方法,获得编码黑曲霉YZ59果糖基转移酶的基因fwt,并在酿酒酵母中实现了异源表达。发酵48 h后,果糖基转移酶最高酶活力可达19.8 U/m L。纯化后,测定分析了果糖基转移酶的酶学性质。结果显示,果糖基转移酶FWT的最适温度为55℃,在低于50℃稳定。果糖基转移酶FWT的最适p H为5.5,稳定p H范围为4.0~9.0。果糖基转移酶FWT的Km和Vmax分别为169.5 g/L和0.7 g/(L·min)。Ni2+和Mg2+可显著激活果糖基转移酶FWT。
- 王一恬张玲沈微杨海麟
- 关键词：黑曲霉果糖基转移酶酿酒酵母
- 一种来源于克劳氏芽孢杆菌的高碱性尿酸氧化酶的异源表达及重组酶性质分析被引量：3
- 2013年
- 以碱性蛋白酶生产菌克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)基因组DNA为模板PCR扩增获得尿酸氧化酶基因(BcU),插入原核表达载体pET28α中,构建表达载体pET-BcU,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-BcU。经IPTG诱导,重组菌BL21(DE3)/pET-BcU表达出有活性的尿酸氧化酶,含空质粒的重组菌在同样条件下没有酶活。酶学性质分析显示,重组酶最适pH值为9.0,在pH值9.0～11范围内酶活几乎不变,是一种高碱性尿酸氧化酶。
- 王一恬沈微陈献忠樊游王正祥
- 关键词：尿酸氧化酶异源表达
