监通
- 作品数：7 被引量：20H指数：1
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高层次人才科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 布鲁氏菌介导对细胞类泛素SUMO1表达影响的研究
- 2013年
- 为研究布鲁氏菌侵染细胞后对SUMO1表达的影响,本研究采用Ni柱亲和层析法纯化SUMO1蛋白,制备兔抗SUMO1多克隆抗体,布鲁氏菌M5-90和16M菌株分别侵染巨噬细胞后,通过免疫印迹方法和荧光实时定量方法分别检测细胞中类泛素SUMO1蛋白表达水平与mRNA转录水平。结果显示,表达并纯化了鼠源类泛素SUMO1蛋白,并制备了兔抗SUMO1多克隆抗体;布鲁氏菌M5-90和16M菌株侵染巨噬细胞后,SUMO1蛋白表达水平与mRNA转录水平在12 h内均呈现先上升后下降的趋势,M5-90菌株侵染4 h时SUMO1表达量最高(p<0.01),16M菌株侵染8 h时SUMO1表达量最高(p<0.01)。实验结果表明布鲁氏菌在侵染细胞时能够引起类泛素SUMO1表达的增强,对布鲁氏菌在宿主细胞中存活和细胞抗菌均起一定作用。
- 监通陈创夫张辉张俊波张科李跃峰李蕊王讲德程婷婷
- 关键词：多克隆抗体布鲁氏菌
- 布鲁氏菌介导的宿主小泛素化及抗凋亡机制的研究
- 类泛素化修饰主要是参与细胞周期调控、信号传导、转录调控、细胞凋亡、细胞增殖与分化、蛋白转运、DNA修复以及应激反应等多种细胞功能调控。目前,有关类泛素对细菌介导的细胞生物进程变化研究较少。布鲁氏菌是一种典型的兼性胞内菌,...
- 监通
- 关键词：布鲁氏菌抗凋亡机制反应原性
- 文献传递
- 布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析法快速检测技术的建立被引量：18
- 2014年
- 目的建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法。方法利用胶体金免疫层析技术,以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26重组蛋白作为检测抗原,以金黄葡萄球菌A蛋白(SPA)作为胶体金标记物,制备胶体金免疫层析试纸条,用于检测布鲁氏菌抗体,并分析方法的敏感性和特异性。结果以粒径为40nm胶体金制备的试纸条检测布鲁氏菌抗体的敏感性最高,胶体金最佳标记pH为6.2,SPA蛋白最适标记量为6μg/ml。交叉试验证明试纸条不与其他非相关疾病感染血清反应,特异性高。试纸条检测结果与琥红平板试验方法的符合率为92%。结论制备的布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,可用于鉴别布鲁氏菌自然感染和人工免疫,并可区分牛、羊种布鲁氏菌感染,可在基层推广使用。
- 程婷婷石峰陈创夫王远志张辉李志强鲁芝子监通马齐蔓
- 关键词：布鲁氏菌胶体金免疫层析
- 结核分枝杆菌CFP10基因真核表达质粒的构建及表达被引量：1
- 2013年
- 为研究结核杆菌毒力因子CFP10在结核杆菌感染细胞过程中的功能,本研究根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的CFP10基因序列设计1对引物,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增得到CFP10基因DNA片段。将扩增片段克隆于pGM18-T载体中,测序验证后,再将CFP10基因亚克隆至pEGFP-N1中,经核苷酸序列测定和酶切鉴定获得重组表达质粒pEGFP-N1-CFP10,分别转染293T细胞和U937细胞。经western blot分析表明CFP10-EGFP融合蛋白在293T细胞和U937细胞中均获得了表达。通过激光共聚焦显微镜观察显示在293T细胞和U937细胞,CFP10-EGFP融合蛋白主要分布于细胞质。本研究为进一步研究毒力因子CFP10在感染宿主细胞中的作用奠定了基础。
- 李跃峰张俊波监通贺志锐王讲德张辉陈创夫曹旭东
- 关键词：结核病CFP10ESAT6
- 绵羊GM-CSF原核表达及蛋白功能检测
- 2012年
- 目的:构建GM-CSF原核表达载体,并诱导表达、纯化其蛋白。方法:将GM-CSF基因克隆至原核表达载体pET-32中,转化至BL21中,用智能蛋白质多维纯化系统(AKTAxpressTM)纯化目的蛋白,利用MTT法测定GM-CSF融合蛋白对绵羊外周血淋巴细胞的增殖活性。结果:成功获得了435bp的绵羊GM-CSF基因片段,诱导表达了35kDa融合蛋白GM-CSF,其纯度达95%以上,浓度达860mg/mL;通过MTT证明该融合蛋白对绵羊淋巴细胞具有增殖活性,其作用最明显的蛋白浓度是200μg/mL。结论:成功获得重组蛋白GM-CSF,该蛋白具有较好的生物活性,为免疫增强佐剂的开发奠定了基础。
- 李蕊陈创夫盛金良张辉杨霞黄林刘志方王讲德监通李天森
- 关键词：绵羊GM-CSF蛋白表达蛋白纯化
- 泛素样蛋白SUMO-1对羊种布鲁氏菌16M在小鼠RAW264.7细胞内生存影响的初步研究
- SUMO(small ubiquitin-related modifier)是泛素(ubiquitin)类蛋白质家族的重要成员之一,类泛素化修饰主要是参与细胞周期调控、信号传导、转录调控、细胞凋亡、细胞增殖与分化、蛋白转...
- 监通张俊波乔军陈创夫
- 关键词：细胞凋亡
- 文献传递
- 泛素样蛋白SUMO-1对羊种布鲁氏菌16M在小鼠RAW264.7细胞内生存影响的初步研究
- SUMO(small ubiquitin-related modifier)是泛素(ubiquitin)类蛋白质家族的重要成员之一,类泛素化修饰主要是参与细胞周期调控、信号传导、转录调控、细胞凋亡、细胞增殖与分化、蛋白转...
- 监通张俊波乔军陈创夫
- 关键词：羊种布鲁氏菌真核表达细胞凋亡
- 文献传递
