郑良凤
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金南通大学自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- B6-Co与B6小鼠眼睑胚胎发育的形态观察被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨遗传性角膜混浊突变系小鼠(B6-Co)胚胎期眼睑发育形态学差异。方法:将B6-Co小鼠与B6小鼠对照,取胚胎期16.5天(E16.5)的胚胎,切取整个头部固定、脱水,冷冻切片。采用HE染色观察胚胎期眼睑闭合状况;FITC-鬼笔环肽染色眼睑部位的细胞骨架;Hoechst染色眼睑部位细胞核。结果:B6小鼠在E16.5天眼睑完成闭合,而B6-Co小鼠眼睑不能闭合,眼睑细胞骨架异常,无微丝束形成,不利于细胞迁移。结论:B6-Co小鼠由于眼睑边缘部位细胞迁移障碍引起的眼睑发育缺陷,造成出生时眼睑开放。
- 王旭吴刘成刘春郑良凤邵义祥
- 关键词：角膜混浊细胞骨架免疫荧光染色法
- B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4突变候选基因克隆及测序
- 2012年
- 目的对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析，寻找是否存在突变位点。方法以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物，以mRNA为模板，采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增，将目的片段连接在T载体上，转化至感受态细胞，筛选阳性克隆，提取质粒DNA分子，电泳检测，EcoRE酶切释放目的片段，测序、分析、比对。结果Ddx4基因位于小鼠13号染色体第113412349的碱基由c转换成A，导致编码氨基酸的密码子改变，产物脯氨酸（P）变成谷氨酰胺（Q）。结论Ddx4基因发生单碱基突变，表明该突变可能与B6－co小鼠的EOB表型相关，但是有待于进一步研究。
- 李瑶吴刘成卢泽艳郑良凤葛良玉邵义祥
- 关键词：角膜混浊
- B6-Co与B6小鼠眼睑角质形成细胞的原代无血清培养及比较研究被引量：3
- 2013年
- 为进一步研究B6-Co小鼠眼睑发育缺陷机制,首次培养了小鼠眼睑角质形成细胞,并对B6-Co和B6小鼠眼睑角质形成细胞的迁移能力进行划痕实验分析,FITC-phalloidin染色比较B6-Co和B6小鼠肌动蛋白细胞骨架。结果表明,B6-Co小鼠眼睑角质形成细胞迁移的数目和距离明显少于B6小鼠,细胞骨架异常,B6-Co小鼠眼睑闭合不全(EOB)是由小鼠眼睑角质形成细胞迁移缺陷造成的。
- 卢泽艳郑良凤李瑶邵义祥
- 关键词：小鼠角质形成细胞肌动蛋白细胞骨架无血清培养
- circ_0014130在缺氧诱导肺腺癌侵袭转移中的作用机制
- 2022年
- 目的 探讨环状RNA(circRNA)circ_0014130在缺氧诱导肺腺癌侵袭转移中的作用机制。方法 收集2018年1月至2021年4月见未出现转移的肺腺癌患者46例、出现转移的肺腺癌患者42例和健康者50例。通过RT-qPCR检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA和circ_0014130的水平。通过Pearson检测二者的相关性。肺腺癌细胞分为对照组、缺氧组、si-circ_0014130组、缺氧+si-circ_0014130组。通过转染抑制circ_0014130,通过降低氧气浓度(10%)构建体外缺氧环境。比较各组细胞的迁移和侵袭能力。结果 肺腺癌组患者血清中的HIF-1α mRNA(2.14±0.27)和circ_0014130(2.59±0.23)水平均显著高于健康组(分别为1.00±0.16、1.00±0.14)(P<0.01);肺腺癌转移组的HIF-1α mRNA(3.85±0.42)和circ_0014130(4.36±0.44)水平均显著高于健康组和肺腺癌组(P<0.01);HIF-1α mRNA和circ_0014130的表达水平正相关(P<0.01);缺氧组的circ_0014130水平、增殖、迁移和侵袭能力显著高于对照组(P<0.01);si-circ_0014130组的circ_0014130水平、增殖、迁移和侵袭能力显著低于对照组(P<0.01);缺氧+si-circ_0014130组的circ_0014130水平、增殖、迁移和侵袭能力显著低于缺氧组且显著高于si-circ_0014130组(P<0.05)。结论 缺氧可能通过促进circ_0014130促进肺腺癌的转移。
- 严爱婷郑良凤王翠竹阙海涛刘春桂
- 关键词：肺腺癌缺氧缺氧诱导因子-1Α
- MEKK1在B6-Co小鼠胚胎发育过程中的表达
- 2015年
- 为了检测MEKK1在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达,探讨其在该突变系小鼠EOB(出生时眼睛睁开)表型形成过程中的作用,试验剖取E16.5和E18.5小鼠,剪取整个头部,用4%多聚甲醛固定脱水,制作冰冻切片,通过免疫荧光技术检测MEKK1在小鼠胚胎眼睑部位的表达;剪取胎鼠皮肤,提取蛋白,以GAPDH为内参,通过Western-blot检测MEKK1在B6-Co小鼠胚胎中的表达情况。结果表明:与B6小鼠相比较,MEKK1在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达差异不显著;但游离C端在E16.5小鼠的表达明显要高于E18.5的表达,差异显著。说明MEKK1对促进小鼠眼睑融合起到了重要作用。
- 郑良凤王胜洁吴刘成刘春李瑶邵义祥
