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一种鉴定miRNA靶基因的试剂盒及其应用: 本发明公开了一种鉴定miRNA靶基因的试剂盒及其应用。本发明报告载体在鉴定miRNA靶基因和/或检测miRNA表达中的应用；试剂盒在鉴定miRNA靶基因和/或检测miRNA表达中的应用；载体在鉴定miRNA靶基因和/或检...; 李军锋周育森鲍春旸于虹郭彦; 文献传递

一种鉴定miRNA靶基因的试剂盒及其应用: 本发明公开了一种鉴定miRNA靶基因的试剂盒及其应用。本发明报告载体在鉴定miRNA靶基因和/或检测miRNA表达中的应用；试剂盒在鉴定miRNA靶基因和/或检测miRNA表达中的应用；载体在鉴定miRNA靶基因和/或检...; 李军锋周育森鲍春旸于虹郭彦

肝炎病毒感染相关microRNA调控作用的研究进展被引量：1: 2010年; 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是导致肝硬化和肝细胞癌的高危险因素.microRNA(miRNA)在转录后水平调控基因表达,参与多种生物学进程的调控.近期研究表明,miRNA在肝炎病毒的复制、基因表达和致病性等方面都起到了重要的作用,基于miRNA的药物研发为抗肝炎病毒的治疗带来新的曙光.本文对肝炎病毒相关miRNA的最新研究进展进行了综述.; 鲍春旸李军锋周育森; 关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒 MICRORNA

用于鉴定microRNA靶基因的新型双萤光素酶报告基因系统的构建及应用被引量：4: 2011年; 目的:构建用于鉴定microRNA靶基因的报告基因系统。方法:在pGL3-Basic载体的luc基因上游插入CMV启动子,下游插入用于克隆靶基因3'UTR的多克隆位点,构建报告基因载体pMIR-luciferase;将pMIR-lu-ciferase载体的luc基因替换成Rluc基因,构建内参载体pMIR-control;将补体因子H(CFH)的3'UTR插入pMIR-luciferase载体的多克隆位点处,构建含有CFH 3'UTR的报告基因载体;用pIRES2-EGFP载体构建microRNA146a真核表达载体;将含有CFH 3'UTR的报告基因载体、microRNA146a真核表达载体及内参载体共转染HepG2细胞,进行报告基因的活性检测。结果:构建了报告基因载体、内参载体和microRNA146a真核表达载体,经酶切和测序鉴定正确;microRNA146a真核表达载体转染细胞72 h后,经荧光显微镜观察确认载体转染及表达;用实时定量PCR检测,microRNA146a的表达水平显著上调(P<0.01);用构建的报告基因系统检测,结果表明microRNA146a显著地抑制了含CFH 3'UTR的报告基因的活性(P<0.05)。结论:构建了一种新型的报告基因载体系统,该系统可用于miRNA靶基因的鉴定。; 鲍春旸李军锋张慧娜张红飞孙世惠于虹周育森; 关键词：MICRORNA

重组表达乙肝病毒x蛋白的腺病毒构建及在HepG2细胞的表达被引量：1: 2012年; 目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经PacⅠ酶切线性化后,转染到QBI-293A细胞中,根据EGFP的表达判断重组腺病毒的包装情况。RT-PCR鉴定重组腺病毒的HBx基因表达。根据GFP的表达检测病毒滴度和感染效率。将病毒感染人肝癌HepG2细胞,48h后收集裂解细胞,Westernblot检测HBx蛋白的表达。结果:重组腺病毒载体pAd-HBx经酶切鉴定确认构建成功。将pAd-HBx转染到QBI-293A细胞,荧光检测提示病毒获得成功包装,RT-PCR检测到细胞中HBx基因的表达。重组病毒感染人肝癌HepG2细胞,Westernblot检测到HBx蛋白表达。结论:成功构建了携带HBx基因的重组腺病毒,感染肝癌HepG2细胞后检测到了HBx蛋白的表达,提示建立了HBx高表达的细胞模型,为后续的HBx的功能研究奠定了基础。; 张红飞李军锋户义张慧娜鲍春旸王凯娟周育森; 关键词：腺病毒载体 HBX基因肝癌细胞

HBV复制相关miRNA表达谱的分析及miR-192的生物学功能研究: 乙型肝炎病毒﹙HBV﹚的感染是引发肝细胞癌﹙HCC﹚的主要危险因素之一。MicroRNA﹙miRNA﹚在调控HBV的复制和致病性等方面起到了重要作用。因此,研究miRNA在HBV相关性HCC﹙HBV-HCC﹚进程中的作用...; 鲍春旸; 关键词：乙型肝炎病毒肝细胞癌; 文献传递

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鲍春旸