侯敏
- 作品数：37 被引量：98H指数：7
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- p47 GTP酶在日本血吸虫感染中的应答特征
- 2013年
- 目的建立日本血吸虫感染小鼠模型,研究IGTP和IRG-47在日本血吸虫感染中的作用特点及参与免疫应答的能力。方法以IGTP基因敲除(IGTP KO)小鼠、IRG-47基因敲除(IRG-47KO)小鼠和野生型C57BL/6J小鼠(WT)为研究对象,建立日本血吸虫感染实验模型。感染10周后计数成虫数和虫卵数,以HE染色观察肝脏的病理变化,以间接ELISA法检测血清中日本血吸虫特异性IgG抗体,以RTQ-PCR检测脾细胞中细胞因子和趋化因子的mR-NA表达水平。结果日本血吸虫感染10周后,IGTP KO小鼠与WT小鼠虫荷数和卵荷数差异无统计学意义(P<0.05),IRG-47KO小鼠的虫荷数和卵荷数均低于IGTP KO和WT小鼠。IRG-47KO组小鼠肝脏单个虫卵肉芽肿面积显著小于IGTP KO组和WT组(P<0.05)。日本血吸虫感染10周后,IGTP KO小鼠SWAP和SEA特异IgG2a水平高于IRG-47KO小鼠和WT小鼠(P<0.05);IGTP KO小鼠脾细胞il12、il4mRNA表达高于WT小鼠(P<0.05),且if-ng表达高于IRG-47KO小鼠(P<0.05);IRG-47KO小鼠趋化因子ccl3、cxcl9、cxcl10mRNA表达显著低于IGTP KO小鼠和WT小鼠(P<0.05)。结论 IRG-47缺失对日本血吸虫感染有一定保护作用,IRG-47KO小鼠肝脏病理特征与其趋化因子的表达相一致。
- 陈莹莹高雅楠陈琳侯敏王铖芸季旻珺吴观陵
- 关键词：GTP酶免疫应答
- 构建检测隐孢子虫特异性抗体的多重微粒子免疫检测法被引量：1
- 2011年
- 目的建立一种检测微小隐孢子虫特异性抗体的微粒子免疫检测法(MIA)。方法以纯化的重组蛋白CP23、SA35和SA40为检测抗原,以牛血清白蛋白(BSA)为内参,偶联微粒子,并进行蛋白偶联效率验证。比较单一MIA法和多重MIA法的一致性,以及多重MIA法检测的板内和板间差异。结果纯化蛋白和BSA成功偶联到相应的微粒子上,建立了多重MIA法检测血清隐孢子虫抗体的最佳检测条件,且证实多重检测并不降低检测的敏感性和特异性。结论多重MIA法可以快速检测隐孢子虫感染后人体产生的多种特异性抗体,敏感性、特异性均较高,可成为人群大规模血清流行病学调查的有力工具之一。
- 侯敏杜学利季旻珺吴海玮
- 关键词：微小隐孢子虫
- 日本血吸虫(中国大陆株)感染小鼠粪虫卵的分布特征
- 2010年
- 目的以数学模型描述感染日本血吸虫(中国大陆株)的小鼠阳性粪便虫卵数的时间动力学分布规律。方法自血吸虫感染小鼠后第5周至第11周,每周收集24 h粪便1次,并计数每克粪样中的虫卵数(EPG)。EPG的均数m≥400时,利用回归方程lg(v)=a+blg(m)的回归系数b是否接近2,来判断粪虫卵是否服从负二项分布。结果剔除EPG为0的结果,组内小鼠EPG在同一时间点上呈正态分布。取各时间点小鼠粪EPG的均值m,分别构建C57BL/6与BALB/c小鼠阳性粪样便EPG的回归方程,显示全部阳性粪样的方程系数b分别为1.72和1.39,连续7次阳性鼠粪EPG的回归方程系数b分别为1.71和1.26。结论实验室感染日本血吸虫的C57BL/6与BALB/c小鼠,粪虫卵的时间的分布均可以负二项分布来描述,但C57BL/6小鼠粪虫卵数随时间分布的拟合优度高于BALB/c。
- 储凯刘云屠小明侯敏吴海玮
- 关键词：小鼠负二项分布
- 巢式PCR法在日本血吸虫易感水域哨鼠监测中的应用被引量：6
- 2015年
- 目的建立巢式PCR法用以辅助日本血吸虫易感水域中哨鼠的监测。方法选择日本血吸虫基因组重复序列DNA SjR2（2456～3171bp）作为外道PCR的区域,其中2719～3019bp作为内道PCR的扩增区域。以不同稀释度的日本血吸虫成虫基因组DNA为模板进行敏感性测试,并对未感染和感染10条、40条尾蚴的小鼠血清进行检测。将巢式PCR法用于2013年8个哨鼠监测点的监测,观察其应用价值。结果巢式PCR中内道引物扩增产物为301bp,血吸虫基因组DNA浓度低至10-5ng/μl时,仍扩增阳性;以10条和40条尾蚴感染4周的小鼠血清DNA为模板进行巢式PCR,结果为阳性。将巢式PCR用于2013年血吸虫易感水域小范围哨鼠的监测,第2组的20只小鼠中有2只阳性,但解剖小鼠未检出虫体。结论巢式PCR法可辅助血吸虫易感水域中哨鼠的监测,特别对感染度较低水域的监测有一定帮助。
- 张凡侯敏余传信杨坤杨丙雅张文月骆晓凤陈琳季旻珺
- 关键词：巢式PCR哨鼠
- 卫氏肺吸虫重组抗原的制备及初步应用研究被引量：8
- 2004年
- 目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液相层析纯化,比较前后两法的纯化效果。初步纯化产物经氧化/还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原)。用该重组抗原,以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体,并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较。结果经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高,快速液相层析进一步纯化效果不明显。以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清,敏感性为91.07%,与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应;粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100%,但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为血吸虫病11.43%,肝吸虫病4.84%,囊虫病3.22%,包虫病5.88%,正常人为2.5%。结论研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高。
- 侯敏刘剑南姚永伟褚宏亮张耀娟章子豪
- 关键词：重组抗原纯化ELISA
- 一种检测幽门螺杆菌耐药基因的方法和检测试剂盒
- 本发明涉及一种检测幽门螺杆菌耐药基因的方法和检测试剂盒，该方法以待检样本基因组DNA为模板，用巢氏PCR外道引物进行PCR反应；再以巢式PCR的外道产物作为模板，用等位基因特异性引物作为内道引物进行PCR；内道PCR扩增...
- 季旻珺焦健华普汉明骆晓凤屈保进钱明芳杨丙雅侯敏
- 文献传递
- 中国日本血吸虫病流行区学龄儿童感染率用于评估社区人群感染率的研究
- 2010年
- 目的分析学龄儿童日本血吸虫感染率与社区人群感染率之间的相关关系。方法通过检索CNKI和PubMed,收集1990-2009年公开发表的在中国大陆开展的有关年龄分层日本血吸虫感染率的相关文献,采取最小二乘法和极大似然法,以线性回归和logistic回归对学龄儿童与社区总人群、学龄儿童与社区中其他人群日本血吸虫感染率之间的关系进行拟合分析,以期找到最适的回归拟合。结果变换后的logistic回归拟合学龄儿童与社区人群日本血吸虫感染率之间关系的效果最好,回归系数aG、bG、aI、bI、aA、bA值分别为0.4718、6.8462、0.7985、9.6128、0.1619和4.2688。结论学龄儿童日本血吸虫感染率可考虑作为评估中国社区人群日本血吸虫感染率的一个指标。
- 刘云屠晓明储凯徐晓丽侯敏吴海玮
- 关键词：日本血吸虫病感染率学龄儿童
- 弓形虫主要表面抗原P30两个不同片段的重组表达、纯化及应用被引量：1
- 2005年
- 目的将刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因两个不同片段重组表达,纯化所获重组蛋白用于弓形虫病免疫学诊断。方法根据弓形虫P30基因的全长序列,用PCR法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段,并构建相应克隆进行诱导表达,表达蛋白以western blot鉴定。用Amylose Resin以亲和层析法纯化所表达的蛋白。以弓形虫RH株感染家兔,用粗抗原和纯化重组抗原以ELISA法比较检测各种寄生虫病患者、感染家兔血清及疟原虫感染小鼠血清。结果1.成功构建相应克隆,并成功诱导表达,表达产物经纯化后获得高纯度目的蛋白。2.重组抗原与粗抗原相比,具有相同的敏感性和更高的特异性。结论成功获得弓形虫主要表面抗原P30的2个表达产物,以此重组抗原与粗抗原对比检测弓形虫相应抗体,结果证明重组抗原特异性高于粗抗原。
- 褚宏亮姚永伟芦王英侯敏章子豪张耀娟
- 关键词：刚地弓形虫ELISA
- 卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究被引量：4
- 2002年
- 目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Westernblotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中。其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。
- 凌家俭侯敏刘剑南章子豪张耀娟
- 关键词：卫氏并殖吸虫重组抗原亚克隆CDNA文库
- UV致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用的研究被引量：12
- 2006年
- 目的研究紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠的免疫保护作用。方法分别观察不同UV强度(300、400和500μW/cm2照射的日本血吸虫尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫剂量(8、24和300条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫位点(300条UV致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫)和不同免疫次数(100条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫3次)诱导C57BL/6小鼠抗血吸虫攻击感染(40条正常尾蚴经腹部皮肤感染)的保护力。同时观察免疫后小鼠的体液免疫应答变化。结果300、400和500μW/cm2UV照射的日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠诱导产生的减虫率分别为2.72%、11.37%和10.38%;8、24和300条致弱尾蚴免疫小鼠诱导产生的减虫率分别为38.67%、7.54%和16.36%;300条致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为16.36%和16.14%;100条致弱尾蚴免疫3次,诱导小鼠产生减虫率为4.88%。对300条UV照射尾蚴免疫后小鼠的体液免疫应答动态观察显示,与感染对照组相比,免疫组血清中可溶性成虫抗原(SWA)和可溶性虫卵抗原(SEA)特异的IgG于免疫后2周开始升高,正常尾蚴抗原(SCA)特异的IgG于免疫1周后开始升高,SWA和SCA特异的IgG随免疫次数的增加而升高。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠能诱导其产生高水平的体液免疫应答,但保护力水平较低,提示C57BL/6小鼠为对UV致弱日本血吸虫尾蚴的低应答品系。
- 胡姝颖张美娟郭彩琴单昊张素华张媛媛侯敏季旻珺吴海玮吴观陵
- 关键词：血吸虫C57BL/6小鼠保护力体液免疫
