刘家森
- 作品数:143 被引量:428H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- SPF鸡.微生物学监测.第7部分:SPF鸡.胚敏感试验
- GB/T 17999的本部分规定了胚敏感试验的技术要求。本部分适用于对SPF鸡进行禽脑脊髓炎病原抗体的检测。
- 曲连东刘家森韩凌霞邵卫星朱果单忠芳姜骞司昌德于海波孟庆文
- 关键词:畜牧业家禽生物学微生物学
- 文献传递
- 鸭肝炎病毒Ⅰ型结构基因vp1的原核表达及其抗原性分析被引量:4
- 2008年
- 通过RT-PCR方法克隆出DHV-1:161/79/V结构蛋白vp1基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中,测序结果为714bp。vp1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+),获得重组质粒pET-VP1,转入E.coli Rosetta-gami(DE3) pLysS,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明在大肠杆菌中表达了1个相对分子量约为47ku的融合蛋白(Trx-His-VP1),将此融合蛋白用His-Ni+亲和层析法进行纯化。Western blot分析表明,Trx-His-VP1能与DHV-1阳性血清发生特异性反应,说明表达的结构蛋白VP1具有良好的抗原性。
- 甘一迪刘家森姜骞孟庆文韩凌霞司昌德曲连东
- 关键词:VP1基因原核表达
- 仙台病毒P基因的原核表达及抗原性分析
- 2009年
- 根据GenBank公布的仙台病毒(SeV)磷蛋白(P)基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增P基因,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中;重组质粒经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞BL21(DE3)PlysS,经IPTG诱导表达,获得相对分子量为99.6ku的融合蛋白。经western blot及ELISA分析表明表达的融合蛋白具有良好的抗原性。
- 蒋良丰刘家森司昌德郭东春姜骞曲连东
- 关键词:仙台病毒P基因原核表达
- 猫疱疹病毒Ⅰ型RAA检测方法的建立与应用被引量:3
- 2023年
- 为建立一种快速检测猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的方法,本研究根据GenBank上登录的FHV-1 UL55序列设计特异性探针及引物,筛选最佳引物对,建立了FHV-1的重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法。该方法在39℃反应20 min即可快速、特异性地检测FHV-1。灵敏性试验结果显示,RAA最低检测限为7.60×101copies/μL,比普通PCR最低检测限高100倍。特异性试验结果显示,该RAA方法与猫杯状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、猫细小病毒无交叉反应。对34份临床样本进行检测,其中13份为阳性,阳性检出率为38.23%。综上所述,本研究成功建立了猫疱疹病毒Ⅰ型RAA检测方法。
- 王颖戚睿斌崔赛赛杨育鹏冯可昕刘家森姜骞杨鸣发康洪涛曲连东
- SLA-1不同等位基因与病毒CTLs表位特异性结合的研究
- 高彩霞姜骞刘家森郭东春刘大飞刘春国李志杰仇铮田进曲连东
- 不同品种绵羊及其杂交后代肉品质特性的研究
- 2010年
- 殷国梅卫智军钱宏光刘家森李蕴华巴图王子忠
- 关键词:绵羊品种杂交后代羊肉肉用品质产肉性能杂交试验
- SPF鸡.微生物学监测.第10部分:SPF鸡.间接免疫荧光试验
- GB/T 17999的本部分规定了间接免疫荧光试验的技术要求等。本部分适用于对SPF鸡进行鸡传染性贫血病毒(Chicken Infectious Anaemia Virus,CIAV)抗体的检测。
- 曲连东刘家森韩凌霞邵卫星朱果单忠芳姜骞司昌德于海波孟庆文
- 关键词:畜牧业家禽微生物学
- 文献传递
- 仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析被引量:5
- 2010年
- 为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆粒rBacmid-F,经PCR鉴定正确将rBacmid-F转染Sf9细胞,连续传代后,细胞病变明显。经SDS-PAGE分析,成功表达了相对分子量为65ku左右的F蛋白,western blot和ELISA分析表明重组F蛋白具有良好的抗原性。
- 曲连东蒋良丰刘家森司昌德郭东春姜骞林欢韩凌霞刘娣
- 关键词:仙台病毒F基因
- 多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达被引量:1
- 2014年
- 为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理,采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因,并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中,将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示,这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95.6%~100%,在氨基酸水平上的同源性为98.9%~100%。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45.6ku,与预期的大小一致,以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应,具有良好的反应原性。
- 李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东
- 关键词:多杀性巴氏杆菌原核表达
- 多杀性巴氏杆菌△purF突变株的构建及其生物学特性的研究
- 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,P.multocida)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染的人兽共患细菌传染病,其毒力因子主要有荚膜、脂多糖、鞭毛和粘附素、毒素、铁调蛋白、...
- 郭东春张爱芹王淑亚刘培欣刘家森姜骞李影曲连东
- 关键词:动物医学多杀性巴氏杆菌生物学特性
- 文献传递