张功员
- 作品数：60 被引量：230H指数：8
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省医学科技攻关计划项目郑州市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 核干细胞因子基因siRNA表达载体的构建及鉴定被引量：7
- 2008年
- 目的构建针对核干细胞因子(NS)基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法根据GenBank提供的NS基因AY825265mRNA序列及siRNA设计原则设计siRNA,筛选得到126-144nt,199-217nt和487-505nt3个19bp片段为靶序列;合成带有BamHI、XhoI酶切位点的发夹结构寡核苷酸序列,经过退火,将此序列克隆至载体pRNAT-U6.1中构建重组表达载体;转化DH5α,提取质粒,应用PCR技术和测序方法鉴定重组克隆。转染入食管癌EC9706细胞,检测NS基因沉默情况。结果PCR筛选得到3个目的片段的阳性重组克隆,测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR和Westernblot检测显示构建的siRNA表达载体可显著降低EC9706细胞中NSmRNA和蛋白水平的表达。结论成功构建出一组针对NS基因的siRNA表达载体,为下一步NS基因的RNA干扰研究鉴定了基础。
- 张功员赵国强尹磊张钦宪
- 关键词：核干细胞因子RNA干扰基因克隆EC9706
- 食管鳞状细胞癌TE-13细胞线粒体DNA及细胞凋亡检测被引量：1
- 2012年
- 目的:检测人食管鳞状细胞癌TE-13细胞中线粒体DNA(mtDNA)与细胞凋亡的发生情况及可能的关系。方法:TE-13细胞分为2组:溴化乙啶(EB)处理组在细胞培养液中加入50mg/LEB,未处理组常规培养;在培养第4、8和12天分别利用半定量RT-PCR检测2组细胞mtDNA的表达,利用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。结果:EB处理组的第4天和第8天mtDNA的表达量分别为(0.467±0.031)和(0.197±0.015),到第12天mtDNA已完全丢失,未处理组分别为(0.660±0.046)、(0.673±0.031)和(0.653±0.021),差异有统计学意义(F组间=1133.878,F时间=109.058,F交互=104.597;P<0.001)。流式细胞术检测结果显示,EB处理组凋亡细胞百分比高于未处理组(F组间=2773.035,F时间=407.652,F交互=406.641;P<0.001)。结论:抑制TE-13细胞中mtDNA的复制可能会促进细胞凋亡。
- 刘宗文冯付明王亚莉杨建萍庞霞王峰郭凤玲郑国香闫俊宇张功员陈奎生
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌线粒体DNA凋亡
- 医学论文中量名称和符号使用时存在的问题
- 2002年
- 张功员
- 关键词：量符号量名称
- 橡胶作业工人T淋巴细胞酯酶活性观察
- 1993年
- 平原地区次降雨径流相关曲线的，赖以小面积站之资料积累。但近十几年来，华北地区干旱少雨，小面积站的投入与产出，受到客观的主观条件制约。因此，以１１处封闭洼地历史上机排水量资料，分析、编制了Ｐ＋Ｐａ－ｈ－Ｒ相关英线。该曲线对一个区域讲，既有针对笥强的特点，又有一定的实用价值。
- 胡巧云赵一波吴逸明张功员孙丙坤姚根洲吴长青王艳玲
- 关键词：橡胶T细胞
- 二氧化硅对人呼吸道上皮细胞及巨噬细胞内IL-8和TNFα的诱导作用被引量：6
- 2009年
- [目的]探讨二氧化硅对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)、II型肺泡上皮细胞(A549)及巨噬细胞(THP-1)内白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNFα)基因表达的诱导作用。[方法]将100μg/mL二氧化硅悬液与上述3种细胞分别温育4h,提取总RNA,用定量PCR技术测定生理盐水(对照组)与二氧化硅染毒组细胞内IL-8及TNFαmRNA表达水平。[结果]与对照组相比,在同一实验剂量及刺激时间(100μg/mL,4h)下,二氧化硅刺激可致THP-1内IL-8及TNFαmRNA表达水平分别升高至76.79倍及4.49倍;BEAS-2B内IL-8及TNFαmRNA表达水平分别升高至3.46倍及2.33倍;A549内IL-8及TNFαmRNA表达水平分别升高至1.64倍及1.52倍。[结论]二氧化硅可提高矽肺发病相关细胞因子IL-8及TNFα基因的表达水平。二氧化硅的上述作用,以对THP-1内IL-8mRNA的诱导作用为最强。
- 张巧徐磊任文杰刘林洪耿明学张功员吴逸明吴卫东
- 关键词：矽肺二氧化硅白细胞介素8
- 橡胶作业对女工脂质过氧化和免疫功能的影响被引量：1
- 1994年
- 本文对某市橡胶厂１３６名作业女工及３３名对照组女工脂质过氧化和免疫功能进行了测定。结果表明，接触组ＳＡ、ＬＰＯ、ＩｇＡ、ＩｇＧ与对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５或＜０．０１）。接触组的ＧＳＨ－Ｐｘ、ＷＢＣ、淋巴细胞相对数和绝对数、ＴＣ绝对数与对照组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＷＢＣ及ＴＣ减少与生物膜损伤有关。橡胶作业有害因素可导致作业女工生物膜损伤及免疫功能改变，这可能与橡胶作业工人肿瘤高发有关，但其内在联系尚需进一步探讨。
- 吴逸明赵一波胡巧云张功员孙丙坤姚根州卢静王艳玲
- 关键词：橡胶免疫功能过氧化脂质
- 元代疫灾述论被引量：5
- 2008年
- 元代疫灾严重程度难以想象,为害甚重。据史实考察可以发现:元代疫灾虽是由自然界的破坏力及人与人之间社会关系失调共同作用而引发的,但作用主体是有变化的,且时段划分比较明显。疫灾的时间分布密集,空间分布也较为平衡。元政府在防疫方面也有许多积极举措。
- 郭珂张功员
- 关键词：元代疫灾预防措施
- 核干细胞因子特异性短发夹状RNA对HL-60细胞分化抗原和生物学性质的影响被引量：8
- 2006年
- 目的研究核干细胞因子(nuc leostem in,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性。方法特异性转染试剂和合成的NS短发夹状RNA(NS-shRNA)体外直接转染HL-60细胞,采用RT-PCR判断基因阻断效果,MTT法测定转染后细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM)测定细胞分化抗原,形态学观察细胞形状和生长状态,血细胞分析仪测定细胞大小、粒度。结果合成的2条NS-shRNA均能明显阻断NS基因表达,抑制率分别为37.82%和71.88%;NS-shRNA能显著抑制HL-60细胞的增殖并存在时间和浓度依赖性,以48 h和10 nmol/L浓度最佳。转染后:分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化趋势;细胞聚团性减弱,碎片增多,一部分细胞形态变成梭形和长尾形,染色后细胞核紧密,凹陷,髓过氧化物酶(MPO)和α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)活性增强;大小和粒度分析小体积细胞和核碎裂细胞增多。结论NS-shRNA通过阻断NS基因表达,对HL-60细胞有抑制增殖和促分化作用,改变了细胞的生物学性质,使细胞恶性程度有所减弱,并有可能诱发凋亡,在白血病的基因中具有潜在的临床价值。
- 岳保红朱晓燕张功员孙玲赵小强王清霞刘帅张秋堂张钦宪
- 关键词：核干细胞因子短发夹状RNA分化抗原生物学性质分化
- 医学期刊外文参考文献著录准确性现状调查与分析被引量：12
- 2011年
- 选择10种中华系列医学杂志和10所医学重点高校学报,每刊抽取2010年某期的外文参考文献100条,共计2000条,应用MEDLINE数据库,对其著录准确性进行核查。结果发现中华医学系列杂志外文参考文献平均著录差错率为11.6%,医学重点高校学报系列外文参考文献平均著录差错率为21.1%。其著者项中著者著录差错所占比例最高,著者项的著录差错近半数是由中外文化差异而引起,期刊刊名的著录也存在诸多不规范现象,而文题项的著录较为准确。
- 谢锡增张功员
- 关键词：著录
- RNA干扰人永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子对PI3K/AKT表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究抑制人永生化食管上皮恶变细胞(SHEEC)中核干细胞因子(NS)对PI3K/AKT信号转导通路中相关分子表达的影响。方法:将干扰试剂(NS-RNAi)转染至SHEEC中以抑制NS的表达,以SHEEC组、阴性对照组(NC组)和MOCK组为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测干扰后PI3K/AKT通路中相关因子mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:NS-RNAi成功转染至SHEEC中。抑制SHEEC中NS的表达后PI3K和AKT mRNA的相对表达量为(0.460±0.207)和(0.492±0.233),与SHEEC组、NC组和MOCK组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);干扰NS表达后PI3K和AKT蛋白的相对表达量为(0.353±0.361)和(0.312±0.068),与SHEEC组、NC组和MOCK组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:抑制SHEEC中NS表达后PI3K/AKT信号通路中相关因子的表达均明显下降,PI3K/AKT信号通路可能是NS发挥作用的一种非依赖P53作用的信号途径。
- 胡梦竹王娟王盼盼张洪磊张霞张巧高社干张功员
- 关键词：核干细胞因子RNA干扰PI3K/AKT信号转导通路
