付劲蓉
- 作品数：45 被引量：161H指数：8
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 哮喘患儿IL-4近侧启动子区克隆和多态性分析
- 2002年
- 目的 对哮喘症患儿白细胞介素 4 (IL 4 )近侧启动子区进行克隆并分析其DNA序列的多态性。方法 对 4 0名有明显家族及过敏史的哮喘患儿和 10名正常儿童 ,以多聚酶链式反应(PCR)结合单链构象多态性 (SSCP )扩增、筛选IL 4近侧启动子片段 ,进一步构建正常对照和异常条带PCR产物的重组质粒pIL 4 Jx2 ,并用双脱氧链终止法对重组质粒进行序列测定。结果 在对 4 0名患儿SSCP分析中发现了 7组异常条带。DNA测序结果显示有 4处变异位点位于已知的调控元件之内或毗邻位点 ,1名病人 2 2 9位C被A所替代 ,该变异恰好位于IL 4正性调节元件 Ⅰ (PRE Ⅰ )之内 ;2名病人负性调节元件 Ⅱ (NRE Ⅱ )毗邻C被T所替代 ,TATA框前增加 1个G ;1名病人STAT 6元件附近缺少了ATTTT五碱基核苷酸。结论 过敏性哮喘患儿IL 4近侧启动子区DNA序列存在多态性 ,这可能与IL
- 周玉峰李成荣付劲蓉吴健民林伟基
- 关键词：白细胞介素4分子克隆
- 急性髓系白血病细胞多药耐药相关基因的筛选被引量：3
- 2005年
- 目的筛选急性髓系白血病细胞多药耐药相关基因。方法在建立HL-60/DNR多药耐药(MDR)细胞系的基础上,采用抑制消减杂交的方法结合基因芯片技术建立HL-60/DNR抑制消减杂交文库,并挑选其中部分克隆进行序列测定和同源性分析。结果HL-60/DNR对多种化疗药物均产生了不同程度的耐受。在所构建的HL-60/DNR抑制消减杂交文库中,经过基因芯片筛选出明显差异表达克隆共有14个;进一步分析发现这些基因在白血病细胞多药耐药中的作用大多未见报道。结论多种基因(已知的或未知的)均参与了急性髓系白血病细胞多药耐药的调节,大规模筛选与克隆这些基因为进一步研究急性髓系白血病细胞多药耐药产生的机制奠定了必要的理论基础。
- 付劲蓉刘文励周剑锋孙汉英罗莉冉丹张恒
- 关键词：白血病急性髓性多药耐药抑制消减杂交基因芯片
- Notch信号在放射损伤小鼠骨髓基质细胞中的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨小鼠骨髓基质细胞放射损伤后Notch信号的表达。方法应用小鼠骨髓基质细胞体外放射损伤模型，采用RT-PCR检测了小鼠骨髓基质细胞Notch1、Jagged1、Hes1基因的表达。结果正常小鼠骨髓基质细胞中未见Notch1受体、Notch1配体Jagged1、Notch通路活化的下游基因Hes1mRNA的表达，给予^60Coγ射线照射后2h即可见上述基因的表达，照射后4h达高峰，8～12h恢复正常。各组间比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论γ射线作用于小鼠骨髓基质细胞后有Notch通路的活化。Notch通路参与了小鼠骨髓基质细胞的放射损伤过程。
- 张可杰刘文励付劲蓉朱艳黄丽芳孙汉英周剑峰
- 关键词：骨髓基质细胞NOTCH信号
- 维甲酸导致多药耐药的机制初探被引量：7
- 2001年
- 目的 探讨全反式维甲酸 (ATRA)导致瘤细胞多药耐药 (MDR)的可能机制。方法 以ATRA和IL 4分别处理肝母细胞瘤系HepG2 细胞 ,观察瘤细胞增殖活性、甲胎蛋白分泌及细胞周期分布等生长特性改变 ;通过流式细胞仪检查p5 3、bcl 2及P 糖蛋白 (P gp)表达 ,用原位杂交观察c jun及c mycmRNA表达 ;以四氮甲基唑蓝 (MTT)生物活性检查药物敏感性。结果 ATRA及IL 4均能诱导HepG2 细胞分化 :ATRA处理可导致HepG2 细胞对多种化疗药物耐受 (耐药倍数 1.6～ 3.1倍 ) ,IL 4处理则增加瘤细胞对化疗药物的敏感性 (逆转倍数 4～ 17倍 )。ATRA处理使瘤细胞P gp表达从 (5 4.2±8.6 ) %增加到 (98.5± 1.4) % ,P <0 .0 1;IL 4降低P gp表达 (2 5 .4± 7.3) % ,P <0 .0 1。IL 4和ATRA处理均能降低瘤细胞c jun及c mycmRNA表达。IL 4处理增加瘤细胞p5 3表达 ,降低bcl 2表达 ,而ATRA处理对二者的表达无影响。结论 IL 4和ATRA诱导HepG2 细胞分化过程中 ,药物敏感性变化与分化程度、原癌基因c jun、c myc表达无关 ;ATRA所致的P gp表达增加可能为MDR的直接作用因素 ;p5 3(或bcl 2 )可以参与调节分化过程中药物敏感性变化。
- 李成荣付劲蓉
- 关键词：维甲酸多药耐药P-糖蛋白P53基因BCL-2基因肿瘤
- AGM区基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化的实验研究
- 2006年
- 目的探讨主动脉-性腺-中肾(AGM)区来源的基质细胞诱导胚胎干细胞(ESC)向成血-血管干细胞分化的促进作用。方法从孕11 d的小鼠胚胎AGM区分离、培养基质细胞,鉴定后用作支持细胞,与小鼠胚胎干细胞共同培养,通过原始细胞集落(BL-CFC)的形成情况及流式细胞仪检测CD34+/Flt-1+细胞比例,评价AGM区基质细胞对小鼠ESC-D3细胞系向成血-血管干细胞的定向诱导作用。结果在AGM区基质细胞的支持下,由ESC来源的CD34+细胞由(12.71±1.76)%增加到(39.71±3.76)%,并且CD34+/Flt-1+细胞比例明显提高,达到(26.59±1.77)%;同时由ESC来源的代表成血-血管干细胞的BL-CFC集落增加了3倍。结论AGM区基质细胞可促进胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化,探明其机制对研究造血及血管发育机制有积极意义。
- 付劲蓉刘文励周剑锋孙汉英冉丹郑邈
- 关键词：胚胎干细胞造血发育血管发育
- 人IL-4基因修饰增强瘤细胞特异性CTL杀伤活性机制初探被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨IL 4基因修饰瘤苗增强细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)杀伤活性的机制。方法通过逆转录病毒载体pL IL 4 SN将人IL 4基因导入肝癌细胞系HepG2细胞 ,以IL 4基因修饰瘤苗和野生型瘤细胞作刺激细胞诱导CTL反应 ,通过流式细胞仪检查肿瘤细胞表面分子表达。结果 IL 4基因修饰诱导瘤细胞表达MHCⅡ类抗原、B7 1及ICAM 1等细胞表面分子 ,对MHCⅠ类抗原表达无影响 ,其瘤苗诱导的CTL杀伤活性为野生型瘤细胞的 7倍 (P <0 .0 1) ,加入抗IL 4单克隆抗体 (McAb)可完全阻断IL 4诱导的细胞表面分子表达 ,IL 4基因修饰瘤苗诱导CTL反应时培养上清可测及大量IL 2产生。抗IL 4或抗细胞表面分子的McAb可降低IL 2产生及抑制CTL反应。结论 IL 4基因修饰可能是通过诱导MHCⅡ类抗原等表面分子表达 ,促进IL 2产生而增强CTL杀伤活性。
- 李成荣付劲蓉
- 关键词：白细胞介素4基因修饰CTL杀伤活性细胞表面分子
- 粘附分子在川崎病血管炎性损伤中的作用机制探讨被引量：19
- 2002年
- 付劲蓉李成荣周玉峰袁雄伟刘霞周雅德
- 关键词：川畸病粘附分子发病机制
- 重组人白细胞介素4对白血病细胞HL-60/VCR的多药耐药逆转研究被引量：10
- 2000年
- 付劲蓉李成荣杨锡强王莉佳
- 关键词：白血病HL-60多药耐药
- 辐射导致小鼠骨髓基质细胞衰老的机制研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨辐射导致骨髓基质细胞损伤的机制。方法应用BALB/c小鼠骨髓基质细胞体外放射损伤模型,分别于照射后24h、72h、1周、2周用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖率;用Giemsa染色法观察细胞形态;用流式细胞仪检测细胞周期;用细胞化学法检测衰老相关β半乳糖苷(SA-β-gal)阳性细胞百分率;用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测周期蛋白激酶抑制因子p21Cip1/Waf1和p53的基因表达。结果8Gy60Co-γ射线照射后骨髓基质细胞增殖降低;流式细胞仪结果显示照射后骨髓基质细胞发生G0/G1期阻滞,照射后1周G0/G1期细胞百分率由正常的66·95%±0·36%增加至89·83%±0·05%(P<0·01);细胞体积增大变平;照射后24h、72h、1周、2周SA-β-gal染色阳性细胞百分率照射组(20·33%±0·03%,34·33%±0·03%,86·33%±0·02%,95·67%±0·02%)显著高于正常组(P<0·01);p53、p21Cip1/Waf1基因表达水平分别于照射后24h或72h即见升高,一直持续至照射后两周,与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0·01)。结论γ射线作用于小鼠骨髓基质细胞后,导致小鼠骨髓基质细胞早期衰老,p53-p21Cip1/Waf1通路在其中可能发挥重要的作用。
- 张可杰朱艳孙汉英黄丽芳付劲蓉刘文励
- 关键词：骨髓细胞细胞衰老
- NF-κB在川崎病血管内皮损伤中的作用机理初探被引量：1
- 2001年
- 付劲蓉李成荣周玉峰周雅德
- 关键词：川崎病血管内皮损伤NF-ΚB
