李俊华
- 作品数：11 被引量：25H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 弓形虫疫苗及其保护性研究现状被引量：4
- 2006年
- 本文对近年来研制的弓形虫疫苗的种类、方法及其免疫保护性进行了综述,以期为弓形虫疫苗的进一步研究提供参考。
- 李俊华吴少庭翁亚彪
- 关键词：免疫保护性
- 弓形虫GRA4和SAG2基因重组BCG疫苗的构建及其免疫保护性研究
- 目的利用分子生物学技术，体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因构建大肠杆菌-分支杆菌穿梭质粒，经电转化方法，将两个基因片断的穿梭质粒转化到耻垢分支杆菌(Mycobacteriums...
- 李俊华
- 关键词：弓形虫克隆表达免疫保护
- 文献传递
- 弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达被引量：11
- 2006年
- 目的体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,重组耻垢分枝杆菌,鉴定重组蛋白的抗原性。方法用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因,克隆入pGEM-T载体,然后亚克隆法构建ps3000-GRA4大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将GRA4基因片断的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatismc2155)中,用重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠,Western blot方法检测免疫小鼠血清中的弓形虫抗体。结果成功扩增了弓形虫的GRA4基因并构建克隆质粒pGEMT-GRA4、穿梭质粒ps3000-GRA4,Western blot分析显示,GRA4重组蛋白能被重组质粒免疫小鼠血清识别,分子质量单位约为40.0 ku。结论重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内表达出了重组蛋白GRA4,具有抗原性,刺激小鼠机体产生了抗弓形虫的抗体,为弓形虫重组BCG(Bacillus Calmette-Guerin)疫苗的研究奠定了基础。
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂铃张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫耻垢分枝杆菌BCG
- 弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达
- 目的利用分子生物学技术,体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(Dense granule protein 4,GRA4)基因,并构建大肠杆菌-分支杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,进行体外表达,研究GRA4基因体外表达产...
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂铃张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫BCG
- 文献传递
- 弓形虫表面抗原SAG2基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达
- 目的体外扩增弓形虫RH株表面抗原2(surface antigen2,SAG2)基因,并构建大肠杆菌-分支杆菌穿梭质粒ps3000-SAG2,研究耻垢分支杆菌体外表达的重组蛋白SAG2的抗原性。方法采用聚合酶链式反应(p...
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂铃张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫BCG
- 文献传递
- 弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG疫苗对小鼠免疫效果的比较研究
- 目的利用弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG(bacille Calmette-Guerin BCG)疫苗分别免疫BALB/c小鼠,比较研究其诱导的免疫应答和对小鼠的免疫保护性效果及其安全性。方法用弓形虫GRA4...
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂铃张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫重组疫苗BCG免疫效果
- 文献传递
- 抗SARS病毒重组BCG-M疫苗的构建及其免疫学研究
- 目的 寻求有效的抗SARS病毒的重组BCG疫苗并观察其诱导的免疫效应及评价其可能的病理损害。方法 以大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒构建表达SARS病毒膜蛋白(M蛋白)的重组BCG疫苗,转化BCG后免疫BALB/c小鼠...
- 甘燕李俊华刘洪波刘茂玲张仁利高世同黄达娜耿艺介吴少庭
- 关键词：SARS冠状病毒M蛋白BCG疫苗
- 文献传递
- 弓形虫SAG2基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性研究被引量：6
- 2008年
- 目的在毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中表达弓形虫SAG2基因,探索一种新的有效活化机体抗弓形虫免疫反应的疫苗。方法以重组质粒pET23a-SAG2为模板,亚克隆目的片段SAG2至酵母菌分泌表达载体pPICZαA,重组质粒经线性化后电转化转染至毕赤酵母菌GS115菌株,经抗生素Zeocin筛选得到高拷贝转化子。经甲醇诱导表达,取细胞裂解上清进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)分析。以整体重组酵母菌作为疫苗腹腔免疫BALB/c小鼠,检测小鼠的免疫反应。结果成功构建了pPICZαA-SAG2毕赤酵母表达重组质粒。经甲醇诱导,在酵母细胞内表达分子质量单位为22 ku的蛋白。Western blot显示,22 ku蛋白可被抗-His标签抗体识别。结论在毕赤酵母菌中成功表达了SAG2基因。整体重组酵母活菌具有免疫原性。
- 王芳吴少庭黄汉菊李俊华付小强甘燕雷蕾
- 关键词：弓形虫毕赤酵母菌基因表达免疫原性
- 弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG疫苗对小鼠免疫效果的比较研究
- 目的利用弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG(bacille Calmette-Guerin BCG)疫苗分别免疫BALB/c小鼠,比较研究其诱导的免疫应答和对小鼠的免疫保护性效果及其安全性。方法用弓形虫GRA4...
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂铃张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫重组疫苗BCG免疫效果
- 文献传递
- 弓形虫GRA4和SAG2基因重组BCG疫苗免疫保护性的比较研究被引量：9
- 2007年
- 目的比较弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)基因和表面抗原2(SAG2)基因的重组卡介苗(BCG)对小鼠的免疫保护效果。方法108只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成6组:PBS组、BCG空白菌组、BCG-空白载体组、BCG-SAG2组、BCG-GRA4组和BCG-SAG2+GRA4组,每组18只。每鼠分别注射对应液体/疫苗100μl,共2次,间隔2周。接种前尾静脉采血,接种后4、6、8周每组分别剖杀3只,取脾和眼眶血检测细胞因子、IgG与IgM抗体,T淋巴细胞亚群计数,淋巴细胞转化率等。末次免疫后3周,每组剩余小鼠分别腹腔接种RH株弓形虫速殖子50个进行攻击感染,观察各组小鼠存活时间。结果弓形虫SAG2和GRA4重组BCG疫苗均能诱导小鼠产生免疫应答。第4周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值最高,为14.06%±1.17%。第6周时,BCG-GRA4+SAG2免疫组小鼠的IgG抗体水平最高,为0.18±0.02。第8周时,BCG-SAG2免疫组小鼠的IgM抗体水平最高,为0.82±0.05;弓形虫速殖子攻击后,BCG-SAG2组平均存活8.61d,PBS对照组平均存活7.33d,3个免疫组小鼠比其他3组的平均存活时间长1d。结论弓形虫重组BCG疫苗具有一定的免疫保护性。
- 李俊华吴少庭翁亚彪甘燕刘洪波刘茂玲张仁利高世同黄达娜耿艺介
- 关键词：弓形虫重组疫苗
