柳纪省
- 作品数：176 被引量：568H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 绵羊朊蛋白等位基因多态性的研究
- 2006年
- 绵羊痒病的发生和易感性可受绵羊朊蛋白等位基因密码子136,154和171多态性的影响。利用SSCP电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶结合的方法对10只健康绵羊的朊蛋白等位基因154,171两个多态性位点进行检测,发现8只纯合子羊基因型为154RR171QQ,2只杂合子羊基因型为154RR171HR。表明该方法可以应用于此等位基因多态性的研究中。
- 张建辉赵兴绪吴润柳纪省
- 关键词：痒病
- 动物重大疫病可持续控制的大分子基础研究
- 柳纪省杨彬殷相平兰喜李宝玉
- 1、该项目完成了5种重大动物传染病病原8个病毒株的全基因组序列测定和分子结构特征分析，是中国动物病原流行株的第一手珍贵资料。该课题已将大多数病毒株的全基因组序列登陆Genbank，为国内外广大学者和疾控中心人员对重大动物...
- 关键词：
- 关键词：动物疫病动物疫苗
- 冠状病毒的分子生物学研究进展被引量：1
- 2005年
- 冠状病毒是所有RNA病毒中基因组最大的病毒,具有胃肠道、呼吸道或神经系统嗜性,常引起人普通感冒或动物胃肠道、呼吸系统疾病,而SARS-CoV则引起人的严重急性呼吸道综合征。研究冠状病毒分子生物学特征对阐明其病毒粒子的发生、感染和致病机制有重要意义。本文就冠状病毒的分子生物学特征包括冠状病毒基因组特征,编码蛋白的结构及功能等方面的研究进展作一综述。
- 兰喜柳纪省
- 关键词：冠状病毒分子生物学特征基因组分子生物学
- 狂犬病病毒核蛋白的原核表达及纯化被引量：2
- 2009年
- 采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因,并将目的基因亚克隆入原表达载体pET-28a(+)中,经PCR、双酶切以及序列分析,结果表明:已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化至大肠埃希氏菌Rossetta(DE3),在37℃,1 mmol/LIPTG条件下进行诱导表达。诱导产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为54 KD附近出现较粗的目的带,与预期的目的蛋白分子量相符合。经表达条件优化,用1 mmol/LIPTG在37℃诱导表达5h,表达量达到最高,Western-Blotting鉴定目的蛋白有较强的免疫原性。为狂犬病毒的N蛋白的新型疫苗的制备奠定了基础。
- 焦文强胡永浩殷相平李志勇柳纪省
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白原核表达
- 狂犬病病毒分子生物学研究进展被引量：10
- 2012年
- 狂犬病是一种感染中枢神经系统的烈性人兽共患传染病,所有温血动物均可感染,一旦发病目前无有效方法治疗,病死率几乎100%。狂犬病病毒基因组编码的5种结构蛋白在病毒转录和复制中发挥重要作用,其抗原性及基因序列可作为病毒分型的重要依据,文章对其特点作一综述。
- 鞠美芳殷相平焦文强柳纪省
- 关键词：狂犬病狂犬病病毒结构蛋白
- 禽流感病毒H5N2亚型A/Chicken/Gansu/2003株HA+NA基因重组腺病毒的构建
- 2008年
- 目的基于腺病毒可感染禽类呼吸道和肠道上皮黏膜的特性,本文构建了包含有禽流感病毒H5N2亚型HA和NA基因的重组腺病毒,为进一步研制口服禽流感活载体疫苗奠定基础。方法通过RT-PCR方法分别扩增出AIV的HA和NA全基因片段,利用拼接接头将HA和NA定向串联并插入到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV之中,然后在大肠杆菌中实现腺病毒骨架载体pAdEasy-1和重组腺病毒穿梭载体的同源重组,获得插有外源基因的重组腺病毒质粒,进而通过转染HEK293细胞,得到含有目的基因HA和NA的重组腺病毒。结果在pAdTrack-CMV载体中成功克隆了HA+NA双基因,并与腺病毒骨架载体在大肠杆菌中实现了同源重组;线性化后的重组腺病毒质粒转染HEK293细胞后可观察到典型的细胞病变和绿色荧光蛋白的表达。结论成功获得了含有HA+NA双基因重的组腺病毒,为口服活载体疫苗的研制提供了依据。
- 李宝玉殷相平李学瑞兰喜杨斌方玉萍柳纪省
- 关键词：禽流感病毒重组腺病毒
- A型口蹄疫病毒VP0基因的克隆及原核表达
- 2012年
- 从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FMDV全基因组序列设计了一对针对VP0基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP0并亚克隆入pMD18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体pET32a用BamHⅠ和HindⅢ双酶切回收后连接获得阳性重组质粒pET32-VP0。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP0并用SDS-PAGE进行检测。表达产物用镍亲和树脂进行了纯化。结果证明,口蹄疫病毒VP0蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步的研究提供了重要的材料。
- 刘明刘航柳纪省
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达
- 禽流感诊断技术研究进展被引量：2
- 2010年
- 禽流感是由A型流感病毒引起的一种人兽共患病,不仅给养禽业带来重大经济损失,并且已经严重威胁到人类健康。由于流感病毒具有亚型多、抗原变异性较强、宿主范围广等特点。因此,建立一种快速、有效的流感病毒检测方法就显得非常重要。就目前流感病毒的检测技术,包括诊断做一综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供强有力的技术支撑.
- 焦文强殷相平柳纪省
- 关键词：禽流感病毒
- OMⅢ株口蹄疫病毒P1-2A-3C腺病毒载体的构建
- 2010年
- 选取O型口蹄疫病毒(FMDV)OMⅢ株的P1-2A和3C作为目的基因,分别扩增出目的片断后,定向亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,得到重组载体pAdTrack-P12A3C,重组穿梭质粒和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后得到重组腺病毒质粒(pAd-P12A3C)。将重组腺病毒质粒线性化后转染至HEK293细胞中可观察到典型的绿色荧光,从重组腺病毒的基因组中可扩增到P12A3C基因,证实获得了含有P12A3C的重组腺病毒。
- 李杨柳纪省
- 关键词：口蹄疫病毒重组腺病毒
- 狂犬病病毒致病机制的研究进展
- 2012年
- 在介绍细胞因子在抵抗狂犬病病毒感染的基础上,从狂犬病病毒入侵宿主细胞的机制,狂犬病病毒的5个结构蛋白N、P、M、G、L在狂犬病病毒致病性中的作用以及细胞凋亡在该病毒致病性中的作用等方面综述了狂犬病病毒与宿主的相互作用,旨在为狂犬病的防制和疫苗研制提供新的思路。
- 焦文强鞠美芳殷相平柳纪省
- 关键词：狂犬病病毒致病机制细胞凋亡反向遗传学
