钱利生
- 作品数：46 被引量：130H指数：6
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科技发展基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 肺炎衣原体特异性单克隆抗体的研制及应用
- 2008年
- 采用肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)TW-183的纯化原体免疫BALB/C雄性小鼠,将小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合,杂交细胞通过有限稀释法克隆,获得1株稳定分泌Cpn-单克隆抗体(Cpn-McAb)的细胞株,单抗属IgG2b亚型及抗Cpn-MOMP抗体。自制Cpn-McAb与鹦鹉热衣原体原体有较弱的交叉反应;与沙眼衣原体原体无交叉反应,特性与进口Cpn-McAb一致。为了评估Cpn-McAb,用自制和进口Cpn-McAb同时检测外周血单核细胞标本454例,Cpn-Ag阳性率分别为53·3%和52·6%,Kappa值0·714,两者有较高的一致性。结果提示,自制Cpn-McAb几乎和进口Cpn-McAb一样有较高的特异性和敏感性,可替代进口单抗用于临床Cpn感染的检测,有助于相关疾病的诊治。
- 王卫群钱利生史益军李雪萍白永怿徐坚余竹元
- 关键词：微量免疫荧光外周血单核细胞
- 医学微生物学实验课考试探讨被引量：2
- 2006年
- 为提高微生物实验教学效果,对复旦大学上海医学院2003级基础医学班实验考核进行调整,采用实验综合成绩评定学生实验技能。实验综合成绩包括实验报告35%,实验考试45%,平时实验操作20%。考试内容为“细菌人工培养”,平均成绩5.5分,相当于百分制78.5分,表明难度适中。采用实验综合成绩评定方式,有利于调动学生主观能动性,客观真实反映学生的实验技能。
- 张俊琪钱利生
- 关键词：医学微生物学实验
- 抗HBs-单克隆抗体的制备及其结合力的研究
- 钱利生
- 茶树对水分的生理响应被引量：17
- 1999年
- 本文研究了茶树对不同供水水平及干旱胁迫的生理响应。结果表明：Ｐｎ 中湿＞ 高湿＞ 低湿，Ｔｒ高湿＞ 中湿＞ 低湿，Ｇｓ高湿＞ 低湿＞ 中湿，Ｃｉ低湿＞ 高湿＞ 中湿；Ｐｎ、Ｔｒ、Ｇｓ 随干旱胁迫的持续而逐渐下降，Ｃｉ随Ｐｎ 下降而上升；在干旱胁迫过程中，叶片Ｐｒｏ 含量大幅度上升，轻度胁迫下，Ｐｒｏ 累积速率与茶树耐旱性有一定相关；干旱胁迫引起内源ＡＢＡ 迅速累积，降低Ｇｓ 和Ｔｒ，从而减轻胁迫伤害。
- 潘根生骆耀平钱利生
- 关键词：茶树水分干旱胁迫生理响应
- 肺炎衣原体主要外膜蛋白重组抗原制备与应用的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:为了研究肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae,Cpn)抗原作为特异性诊断试剂,本文应用重组技术研制Cpn主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)重组抗原,用于血清IgG抗体的检测。方法:通过构建和表达CpnMOMP重组抗原,应用包涵体纯化法纯化重组抗原后建立ELISA试验,并检测了82份正常人血清及临床标本207份,其中心血管疾病血清118份,呼吸系统疾病血清59份,其他疾病30份。结果:应用克隆技术,获得纯化的Cpn MOMP重组抗原。用重组抗原检测血清IgG,正常人血清阳性检出率仅为3.7%;而207份病人血清,116份为阳性,总阳性率56.0%。其中心血管疾病血清118份,阳性69份,阳性率58.5%;呼吸系统疾病血清59份,阳性38份,阳性率64.4%;其他疾病患者30份,阳性9份,阳性率仅30.0%。结论:与进口ELISA试剂盒相比阳性率基本相符,统计分析无显著意义,但重组MOMP蛋白的抗原特异性较高,且具有抗原制备较为方便和价廉等特点。由于临床标本数量有限,尚需进一步探索MOMP重组抗原作为Cpn感染疾病的辅助诊断。
- 陈学勤陈圆圆李雪萍钱利生
- 关键词：肺炎衣原体ELISA
- 制备肺炎衣原体抗原片检测血清抗体被引量：2
- 2006年
- 目的:探索肺炎衣原体抗原片检测血清抗体法在诊断Cpn感染中的实际应用前景。方法:应用进口肺炎衣原体(Cpn)毒株感染Hep-2细胞,分别以瑞氏-姬母萨染色、吖啶橙染色和直接免疫荧光染色等3种方法鉴定Cpn感染细胞。纯化获取大量Cpn抗原,用于制备斑点抗原片。建立微量免疫荧光染色法(MIF)检测血清抗体,诊断Cpn感染。结果:Cpn感染Hep-2细胞的最适条件是用含1μg/mL放线菌酮的维持液,在35℃、5%CO2孵箱中培养7d,并在培养的第0、3、4、5天以2600r/min离心1h,感染成功率极高。染色反应显示,瑞氏-姬母萨染色可将Cpn包涵体染成蓝紫色或红紫色;吖啶橙染色则使Cpn感染的Hep-2细胞呈现鲜明的橘红色;免疫荧光抗体染色后,在Cpn感染细胞内可见亮苹果绿色包涵体。通过斑点抗原荧光抗体染色的方法抽样检测了100份病人血清中的Cpn抗体,其中抗Cpn-IgG抗体的阳性血清共61份,阳性率为61%。与Cpn-外周血单核细胞(Cpn-PBMC)抗原片比较,阳性检出率无明显差别。结论:用Cpn感染细胞制作的Cpn斑点抗原片可用于临床检测血清Cpn-IgG抗体,且具有特异性、敏感性高的特点,但要求检测人员有一定的经验。
- 陈学勤陈园园李雪萍王卫群余竹元钱利生
- 关键词：肺炎衣原体微量免疫荧光法
- 医学微生物学实验教学改革初探被引量：1
- 2007年
- 对医学微生物学（细菌学部分）实验教学进行了改革,以正常粪便细菌学检查为综合实验,替代以往的验证性和示教性实验;通过“肠道优势细菌分离与鉴定”的系统过程,达到举一反三、触类旁通的目的,增加了学生的动手机会,增强了独立分析和解决问题的能力,同时达到了生物安全管理的要求。
- 张俊琪王晖钱利生
- 关键词：医学微生物学教学改革生物安全
- 福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞的毒力被引量：9
- 2004年
- 目的 研究福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞后细菌致病能力的差异 ,探讨痢疾的防治。方法 选用 2 8株福氏志贺菌感染豚鼠眼角膜 ,观察角膜结膜病变反应 ,并进行细胞学、细菌学、病理组织切片检查。然后再选出12株福氏志贺菌强毒株和两株弱毒株 ,通过噬斑形成实验 ,观察对HeLa细胞的侵袭能力。结果 2 8株福氏志贺菌均在 3d之内引起豚鼠发病 ,但症状表现有差异 ,除 2株福氏志贺菌感染豚鼠后发病时间延长、症状轻微外 ,其余菌株则引起较为严重的角膜结膜炎 ,尤其在感染第 3天 ,出现最为典型的临床表现。噬斑形成试验结果与豚鼠感染试验基本相符。结论 检测福氏志贺菌的毒力可用HeLa细胞噬斑形成试验替代Sereny试验。利用Sereny试验和HeLa细胞噬斑形成试验鉴定出 2 6株福氏志贺菌的强毒株和 2株弱毒株 。
- 钱雪琴李雪萍王重振钱利生
- 关键词：HELA细胞毒力角膜结膜炎
- 肺炎嗜衣原体菌体抗原的制备及应用
- 2009年
- 目的制备肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)菌体抗原,纯化后建立ELISA方法,用于血清Cpn抗体的检测。方法应用进口Cpn毒株感染Hep-2细胞,利用吖啶橙染色和直接免疫荧光染色判断Cpn感染细胞,制备Cpn抗原。用初步纯化的Cpn抗原建立ELISA方法检测人血清特异性抗体。结果吖啶橙染色和直接免疫荧光检测显示,Cpn成功感染Hep-2细胞。提取Cpn抗原,用ELISA检测84份病人血清特异抗体,阳性率为52.4%,ELISA试剂盒法的阳性率为51.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。用Cpn菌体抗原ELISA检测209份病人血清,阳性率59.3%(其中心血管疾病患者血清138份,阳性率58.0%;呼吸系统疾病患者血清71份,阳性率62.0%);检测84份健康者血清,阳性率2.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Cpn菌体抗原ELISA检测血清抗Cpn抗体可用于判断Cpn感染;病人血清Cpn抗体阳性表明,某些心血管和呼吸系统疾病患者的致病原因可能与肺炎嗜衣原体感染有关。
- 李雪萍陈学勤钱利生
- 关键词：肺炎嗜衣原体吖啶橙染色
- 志贺菌GyrA基因突变与耐药相关性研究被引量：4
- 2004年
- 收集 1 1 4株志贺菌流行株 ,分别作血清分型和检查对喹诺酮类药物的敏感性 ;PCR扩增耐药相关的GyrA基因片段 ,作单链构象多态性 (single strandconformationpolymorphism ,SSCP)分析和序列测定 ;最终研究突变与喹诺酮类耐药的相关性。结果发现我国志贺菌流行株仍以福氏志贺菌为主 ,约占 98 2 % ;大多数福氏志贺菌株对环丙沙星、诺氟沙星高度敏感 ,敏感率分别为81 2 5 %和 74 1 % ;流行株GyrA基因耐药相关片段与野生菌株相比 ,部分菌株出现C( 2 4 8) T单位点突变或C( 2 4 8) T和A( 2 60 ) G双位点突变 ;卡方检验显示 ,C( 2 4 8) T单位点突变基础上增加A( 2 60 ) G点突变与环丙沙星、诺氟沙星耐药相关 ,故A( 2 60 ) G可作为耐药监测位点 ;另外 ,可用SSCP分析PCR扩增的GyrA基因耐药相关片断 。
- 王重振李雪萍钱雪琴钱利生
- 关键词：志贺菌喹诺酮类药SSCP耐药性
