钱超
- 作品数：23 被引量：38H指数：4
- 供职机构：解放军第454医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京医科大学校科研和教改项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TT病毒的研究进展被引量：1
- 2004年
- 1997年 1 2月 ,日本学者Nishizwa等用代表性差异分析法 (representationaldifferenceanalysis ,RDA) ,从原因不明的输血后肝炎患者血清中发现了TTV。此后 ,许多学者开展了对TTV的研究 ,其生物学特性、流行病学、检测方法、及临床致病性等方面的研究取得了一定的进展。本文结合国内外文献。对以上问题简要综述如下。
- 卢瑗瑗钱超卢春
- 关键词：TT病毒生物学肝炎
- SARS病毒M蛋白编码基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：4
- 2004年
- 目的:克隆SARS冠状病毒膜蛋白M胞外区编码序列,并将其置于大肠杆菌作融合表达。方法:从GenBank获得SARS病毒BJ01株膜蛋白M编码基因序列,人工合成其氨基端129-base-pair(bp)双向单链DNA序列,在5′和3′端分别引入BamH I、Xho I酶切位点,退火后形成双链DNA,常规法将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建含M蛋白编码基因的重组原核表达质粒。重组质粒经酶切鉴定,核酸序列测定和分析后转化大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果:核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的129 bp基因序列与基因数据库中所登记的BJ01毒株序列呈现100％同源性。IPTG诱导后的菌体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),显示有一个大小为30.1 ku的融合表达蛋白产生。结论:M蛋白氨基端胞外区129 bp编码基因在E.coli中获得正确表达。
- 钱超姚堃卢春贾雪梅曾怡黄丽姜平
- 关键词：SARS冠状病毒M蛋白原核表达
- 开放读码框架50基因介导HIV-1感染相关的肝细胞生长因子诱导人类疱疹病毒8型复制被引量：3
- 2004年
- 目的 研究人类疱疹病毒 8型 (HHV 8)开放读码框架 (ORF) 5 0基因启动子在HIV 1感染相关细胞因子肝细胞生长因子 /驱散因子 (HGF/SF)诱导原发性渗出性淋巴瘤 (PEL)BC 3中潜伏感染的HHV 8复制过程中的作用。方法 将HGF/SF连续加入到体外培养的BC 3中 ,分别于培养第 3天和第 7天收集刺激细胞 ,电子显微镜观察成熟HHV 8病毒的形成 ;提取细胞总RNA ,North ernblot和定量聚合酶链反应 (PCR)法检查HHV 8次要衣壳蛋白ORF2 6mRNA转录。同时 ,将已构建的HHV 8ORF5 0启动子 +虫荧光素酶报告基因重组质粒和含HIV 1Tat基因重组表达质粒分别共转染BC 3和人脐静脉血管内皮细胞 (HUVECs) ,转染后 2 4h加入HGF/SF和 /或重组HIV 1gp12 0刺激 ,刺激后 2 4h收集细胞 ,进行虫荧光素酶活性检测。试验同时以佛波酯 (TPA)刺激为阳性对照。结果 HGF/SF可以上调HHV 8ORF2 6mRNA表达 ,且于刺激的第 7天 ,ORF2 6mRNA表达上升了 4 .1倍 ,BC 3细胞中同时可观察到成熟的HHV 8病毒粒子 ;HGF/SF能够诱导ORF5 0启动子活性 ,但HIV 1Tat和 gp12 0蛋白与HGF/SF协同上调ORF5 0启动子活性的能力较弱。 结论 HIV 1感染相关细胞因子HGF/SF诱导HHV 8复制的过程至少有部分由ORF5 0启动子介导。
- 卢春曾怡钱超唐桂霞
- 关键词：肝细胞生长因子启动区
- HIV-1相关炎性细胞因子诱导人血管内皮细胞中潜伏感染KSHV的溶解性周期复制被引量：4
- 2005年
- 目的研究HIV21感染相关炎症细胞因子是否能够激活人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)中潜伏感染的卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV);探讨该激活作用是否由KSHVRta基因所介导。方法采用体外模拟系统,研究了与HIV-1感染T细胞诱生的细胞因子相似的重组人细胞因子对HUVEC中潜伏感染的KSHV复制的影响。通过Northernblot和定量PCR检测ORF26(该基因编码的病毒次要衣壳蛋白仅在KSHV被激活时表达)mRNA表达来分析KSHV的激活。运用KSHVRta基因启动子(KSHV复制时最先被激活的启动子)驱动的虫荧光素酶报告基因进一步证实并扩展研究结果。结果包括干扰素-γ(IFN2γ)、肝细胞生长因子P扩散因子(HGFPSF)及制瘤蛋白M(oncostatinM,OSM)在内的重组细胞因子不仅可诱导HUVEC中潜伏感染的KSHV发生溶解性周期复制,而且能增强Rta启动子活性。结论HIV-1感染相关的炎性细胞因子是诱导HUVEC中KSHV溶解性周期复制的因素,而且该过程至少有部分由KSHV的Rta启动子介导。
- 卢春唐桂霞曾怡钱超秦娣
- 关键词：细胞因子卡波济肉瘤相关疱疹病毒
- 人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4
- 2005年
- 目的:制备人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导含重组质粒pGEX-6p-1+K8.1的大肠杆菌BL21表达谷胱甘肽-S-转移酶GST/K8.1融合蛋白,将以包涵体形式存在的融合蛋白进行变性、复性、复性后的GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化。以纯化的GST/K8.1融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选分泌K8.1单抗的杂交瘤细胞株。免疫组化染色(IHC)和Westernblot法鉴定单抗的特异性。结果:建立了一株稳定分泌抗K8.1单抗的杂交瘤细胞株,命名为3G10;IHC和Westernblot法显示,3G10株单抗能特异地识别HHV-8K8.1蛋白。结论:成功制备出抗HHV-8包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体。
- 张玲卢春曾怡钱超唐桂霞秦娣
- 关键词：人类疱疹病毒8型包涵体单克隆抗体
- 卡波济肉瘤相关疱疹病毒包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体的鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:对已制备并经初筛的卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体进行特异性鉴定。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA),经3次克隆选择,筛选出能稳定分泌针对K8.1蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株共9株。采用Westernblot法评价9株杂交瘤细胞培养上清识别原核表达重组K8.1蛋白和原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1中KSHVK8.1包膜糖蛋白的能力。结果:筛选了9株能够稳定分泌抗K8.1单克隆抗体的杂交瘤细胞株;Westernblot法显示,9株单抗均能特异性识别原核表达K8.1/GST融合蛋白和BCBL-1中KSHVK8.1包膜糖蛋白。结论:成功制备了KSHV包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体。
- 姚水洪卢春张玲汤巧曾怡唐桂霞秦娣钱超
- 关键词：卡波济肉瘤相关疱疹病毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验WESTERNBLOT
- 26例恶性血液病长期生存回顾
- 2002年
- 我院1982年2月～1996年2月共收治资料完整的恶性血液病136例.其中26例获5年以上无病长期生存(LFS),报告如下.
- 江志生孙顺平王学之廖辉何春娜李桂芳杨岳琴钱超温宏升胡炳杰陈波生郑谆冯晓闽
- 关键词：恶性血液病病例报告
- SARS冠状病毒M蛋白基因片段的克隆表达与表达产物单克隆抗体的制备和鉴定
- 本研究的目的是原核表达SARS-CoV S蛋白片段、M蛋白片段，分析其杭原性、免疫原性，并制备M蛋白片段特异性单克隆杭体(mAb )，为研制SARS的酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断方法莫定基石出。本研究克隆了SARS...
- 钱超
- 关键词：SARS冠状病毒S蛋白M蛋白B细胞抗原表位单克隆抗体
- 文献传递
- 自体骨髓和/或外周血干细胞移植治疗14例恶性血液病
- 2000年
- 江志生王学之江千里廖辉钱超王银河王维静陈洁
- 关键词：恶性血液病自体骨髓移植外周血干细胞移植
- HIV-1感染相关细胞因子IFN-γ通过Rta基因启动子激活人类疱疹病毒8型被引量：9
- 2004年
- 目的 研究HIV 1感染中相关细胞因子IFN γ对人类疱疹病毒 8型 (HHV 8)Rta基因启动子活性影响 ;评价Rta基因启动子在多种细胞中的启动活性。方法 将已构建的HHV 8Rta启动子 +虫荧光素酶报告基因重组质粒和含HIV 1Tat基因重组表达质粒转染多种细胞 ,转染后 2 4h加入IFN γ和 或重组HIV 1gp12 0刺激 ,刺激后 2 4h收集细胞 ,进行虫荧光素酶活性检测。试验同时以佛波酯类化合物TPA刺激为阳性对照 ,进行最佳刺激时间点的选择和不同转染方法转染效率的比较。结果 ①HHV 8Rta启动子启动活性在TPA刺激后的 2 4h达到最高峰 ;②HHV 8Rta启动子启动活性的发挥不依赖于HHV 8和 或EBV基因组的存在 ,且在血管内皮细胞 (HUVECs)中启动活性最佳 ;③IFN γ可以诱导Rta启动子活性 ;但HIV 1Tat和gp12 0蛋白与IFN γ协同上调Rta启动子活性的能力较弱。结论 HIV 1感染中相关细胞因子IFN γ至少部分通过Rta基因启动子激活HHV
- 卢春曾怡黄丽钱超唐桂霞
- 关键词：IFN-Γ基因启动子人类疱疹病毒8型基因重组质粒
