付彦超
- 作品数：15 被引量：19H指数：3
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LY294002抑制PI3K/AKT信号通路对胃腺癌SGC-7901细胞的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:观察应用P13K抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-l-苯并吡喃-4酮(LY294002)对胃腺癌细胞株SGC-790l中磷脂酰肌酸3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路的变化以及由此产生的细胞生长、侵袭及凋亡等方面的影响。方法:应用LY294002作用于胃腺癌细胞株SGC-7901,通过Western blot检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质P-AKT、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、细胞周期素(CyclinD1)的表达情况。噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞法及Transwell等实验评价胃腺癌细胞增殖、侵袭、凋亡等变化。结果:与空白对照组和DMSO组相比,LY294002组能有效抑制P-AKT、MMP-2、MMP-9、Bcl-2及CyclinDl蛋白的表达。LY294002组自第2天起生存率明显下降(P<0.05)。Transwell穿过细胞数结果分别为空白对照组(81.0±2.65)、DMSO组(81.3±1.52)、LY294002组(44.6+2.52),3组相比较差异具有统计学意义(F=255.1,P=0.000)。LY294002组细胞周期被阻滞在Go/G_1期,S期减少(P<0.05),早期凋亡的细胞数明显增多(F=149.66,P=0.000).结论:LY294002是一种对PI3K/AKT信号传导通路具有抑制作用的抑制剂,靶向PI3K的LY294002可以有效抑制胃腺癌SGC-7901细胞的PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质的表达,在体外显著抑制细胞的增殖、侵袭,并促进细胞的凋亡,因此为临床肿瘤防治提供了新思路。
- 韩静张庆瑜康春生谢甲贝付彦超张靖马菲菲王涛
- 关键词：LY294002SGC-7901PI3K/AKT信号通路
- RNA干扰技术靶向P13K／AKT信号通路抑制胃腺癌SGC7901细胞侵袭转移的研究被引量：5
- 2009年
- 目的观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低PIK3R1、AKT1表达后在体外对胃腺癌SGC7901细胞侵袭的抑制作用。方法将重组腺病毒质粒表达载体rAd5-A—P转染至SGC7901细胞。RealtimePCR和Westernblot分别检测转染前后目的基因mRNA和蛋白的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞外基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的浓度变化。划痕、Transwell、3-D Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果rAd5-A-P可以有效抑制PIK3R1、AKTI的表达，MMP-2、MMP-9表达下调，基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-2表达上调，ELISA证实细胞外MM9-2、MMP-9浓度在治疗组明显减低。划痕实验显示rAd5-A—P转染组细胞转移运动能力明显减弱，Transwell穿过细胞数结果：对照组（105．0．4-4．0）和无义序列组（102．5±6．4），rAd5-A．P转染组（67．0±3．9），3-D的Matrigel基质生长实验显示与对照组和无义序列组比较，rAd5-A—P转染组细胞形成的细胞团块较小。结论靶向AKT1、PIK3R1的RNAi技术可以序列特异性地抑制PIK3R1、AKT1表达，在体外明显抑制SGC7901细胞的侵袭能力。
- 付彦超张靖张凯茹张庆瑜康春生王涛
- 关键词：胃腺癌RNA干扰基因治疗
- LY294002抑制PI3K/AKT信号通路对胃腺癌SGC-7901细胞的影响
- 韩静谢甲贝康春生付彦超张靖张庆瑜
- 腺病毒介导的靶向蛋白激酶B1和环氧合酶2短发夹RNA抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移
- 2009年
- 目的构建靶向性蛋白激酶B1（Aktl）和环氧合酶2（COX-2）短发夹RNA（shRNA）腺病毒载体，研究其对SGC-7901人胃腺癌细胞侵袭和转移的抑制效果。方法构建腺病毒载体pGSadeno-Akt1＋COX-2（tad5-A＋C）并体外转染SGC-7901人胃癌细胞株后，用实时定量PCR和蛋白印迹分别检测对照组SGC-7901、空载组tAd5-HK和治疗组tAd5-A＋C中Akt1、COX-2 mRNA和蛋白质的表达，其中以对照组SGC-7901、空载组rAd5-HK作为阴性对照。用ELISA法分别检测它们的MMP-2和MMP-9含量；用Transwell法分析它们的侵袭和转移能力。结果构建的rAd5-A＋C重组腺病毒载体在转染SGC-7901细胞48h后呵显著抑制kktl和COX-2mRNA的表达，而治疗组rAd5-A＋C的Aktl和COX-2蛋白表达量与对照组和空载组相比分别下调68．4％和60．2％（均P〈0．01）；tad5-A＋C组中MMP-2和MMP-9含量分别为（39．7±1．7）ng／ml、（31．3±3．6）ng／ml，明显低于对照组SGC-7901（278．4±15．5）ng／ml、（225．4±15．1）ng／ml和空载组rAd5-HK（275．5±2．1）ng／ml、（226．0±23．3）ng／ml（P=0．01、P=0．021）。结论腺病毒介导的靶向性Aktl和COX-2shRNA可抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移。
- 张靖付彦超康春生张庆瑜王涛张洁
- 关键词：肿瘤转移蛋白激酶类环氧合酶2
- 靶向COX-2、AKT1和PI3Kp85基因的RNAi抑制胃腺癌SGC7901细胞侵袭迁移的体外实验研究
- 目的构建针对肿瘤相关基因AKT1、COX-2和PI3Kp85基因的shRNA重组腺病毒质粒表达载体,检测其在胃腺癌细胞株SGC-7901中对AKT1、COX-2和PI3Kp85基因表达的抑制作用,以及敲低靶基因的表达后,...
- 付彦超
- 关键词：胃腺癌
- 文献传递
- LY294002抑制PI3K/AKT信号通路对胃腺癌SGC-7901细胞的影响
- ＜正＞目的观察应用磷脂酰肌酸3-激酶（PI3K）抑制剂2-（4-吗啉基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮（LY294002）对胃腺癌细胞株SGC-7901中PI3K/丝氨酸苏氨酸激酶（AKT）信号通路、细胞生长、侵袭...
- 韩静谢甲贝康春生付彦超张靖张庆瑜
- 文献传递
- 靶向性蛋白激酶B1和环氧合酶-2shRNA腺病毒载体的构建和在人胃癌细胞的表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建靶向性蛋白激酶B1（PKB1／Akt1）和环氧合酶-2（COX-2）的短发夹RNA（shRNA）腺病毒载体，观察其在人胃癌细胞株SGC-7901中的表达。方法利用同源重组技术构建重组腺病毒载体pGSadeno—Akt1＋COX-2（pGSadeno—A＋C），经酶切及测序鉴定后转染人胚肾细胞HEK293包装成为重组rAd5-A＋C腺病毒，并测定病毒的滴度。体外转染人胃癌细胞株SGC-7901后，Real—timePCR和蛋白印迹分别检测Akt1和COX-2mRNA和蛋白质的表达。结果成功构建rAd5．A＋C重组腺病毒，测定包装的病毒滴度为1．0×10^10pfu／ml。转染组Akt1和COX-2mRNA表达明显下调，其ACt值分别是（12．26±0．05）和（5．41±0．09），比rAd5-HK空载组（10．63±0．02）、（3．75±0．08）和对照组（10．57-1-0．02）、（3．73±0．08）增高（P〈0．01），而空载组和对照组比较ACt值无明显变化（P〉0．05）。同样转染组Akt1和COX-2蛋白表达量与空载组和对照组比较分别下调70．5％和63．7％（P〈0．01），空载组和对照组比较Akt1和COX-2蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向性Akt1和COX-2的shRNA腺病毒载体可以特异性抑制Akt1和COX-2的表达，可能成为胃癌靶向性Akt1和COX-2基因治疗的新策略。
- 张靖付彦超康春生张庆瑜
- 关键词：胃癌环氧合酶2短发夹RNA腺病毒载体
- 靶向蛋白激酶B1、环氧合酶2和磷月旨酰肌醇-3-激酶调节亚基1 shRNA腺病毒表达载体的构建及其抗胃腺癌增殖作用的研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建针对肿瘤相关基因蛋白激酶B1（protein kinase B1，AKT1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）、磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1（phosphatidylinositol kinase 3 regulatory subunit1，PIK3R1）的小发卡RNA（small hairpin，shRNA）重组腺病毒表达载体，体内外研究其对人胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响，为胃腺癌的联合基因治疗提供参考。方法构建一个编码COX2，AKT1及PIK3R1三条shRNA的重组腺病毒质粒表达载体，包装扩增并鉴定其病毒滴度。在体内外转染SGC7901细胞，检测肿瘤细胞生长情况，蛋白表达和细胞周期变化。结果经酶切分析，测序鉴定表明成功构建并扩增rAd5-C—A—P腺病毒表达载体。转染SGC7901后COX2，AKT1及PIK3R1的mRNA和蛋白的表达水平均明显降低，甲基氮唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium，MTT）法显示转染后第6d细胞存活率为27．6％，流式细胞周期显示G0／G1期阻滞，2-D的Matrigel基质生长实验显示rAd5-C—A-P转染组细胞贴壁生长能力明显减低，体内实验中肿瘤生长也明显减慢（P％0．01）。结论靶向COX-2，AKT1和PIK3R1的shRNA技术可以序列特异性地抑制SGC7901细胞的COX-2，AKT1和PIK3R1表达，在体内外对SGC7901细胞增殖产生明显抑制作用。
- 付彦超张靖张凯茹张庆瑜康春生王涛
- 关键词：联合基因治疗胃腺癌
- 腺病毒介导的靶向P85和Akt1短发夹RNA对人胃腺癌细胞生长抑制作用的研究
- 2009年
- 目的构建靶向P85和蛋白激酶B1（PKB1／Akt1）的短发夹RNA（shRNA）腺病毒载体，研究其对人胃腺癌细胞SGC-7901生长的抑制效果。方法构建腺病毒载体rAd5-P＋A，体外转染SGC-7901细胞后，以实时定量PCR和Westernblot分别检测P85和Akt1的mRNA和蛋白质的表达。以噻唑蓝比色分析法（MTT法）和流式细胞法评价转染后胃癌细胞的增殖活性。构建裸鼠皮下荷瘤模型进-步观察rAd5-P＋A对SGC-7901细胞生长的抑制效果，并应用原位末端标记技术（TUNEL法）检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果成功构建的rAd5-P＋A重组腺病毒载体转染SGC-7901细胞后可显著抑制p85和Aktl的mRNA表达，而P85和Aktl蛋白表达量在转染48h、72h后分别下调57．5％、63．7％和67．8％、75．6％，与空白对照组和通用腺病毒对照（rAd5-HK）组相比，差异具有统计学意义（P=0．005，P=0．003）。与空白对照组和rAd5-HK组相比，SGC-7901细胞的增殖活性在rAd5-P＋A转染后第2天明显下降（P〈0．001），且tAd5-P＋A转染组进入S期的细胞数减少了5．9％-7．1％，而进人G0／G1期的细胞增加了12．1％～13．7％。裸鼠皮下荷瘤模型治疗实验也显示，rAd5-P＋A可抑制胃癌细胞的生长，诱导细胞的凋亡。结论腺病毒介导的靶向P85和Aktl的shRNA可抑制人胃腺癌细胞的生长，这可能为胃腺癌靶向性联合基因治疗提供新的策略。
- 张靖付彦超康春生张庆瑜王涛张洁
- 关键词：胃腺癌腺病毒载体P85短发夹RNA
- 胃癌血管生成及抗血管生成治疗的研究进展被引量：4
- 2008年
- 作为肿瘤间质组成的一部分,肿瘤内血管生成不仅为原发肿瘤生长所必需,也是肿瘤细胞向远处播散的必备条件之一.超微结构和免疫组化的观察发现,不同人类肿瘤组织中的血管密度和数量与肿瘤的侵袭转移潜能密切相关.最近许多研究证实了血管生成与胃癌侵袭性之间的联系,同时也有许多研究证实抑制血管生成能显著抑制肿瘤的生长及转移,在胃癌的治疗实验中已初步显示出良好的应用前景.
- 付彦超张庆瑜
- 关键词：胃癌血管生成血管生成抑制
