宋德武 作品数:18 被引量:34 H指数:3 供职机构: 吉林大学 更多>> 发文基金: 广东省科技攻关计划 吉林大学研究生创新基金资助 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 文化科学 经济管理 更多>>
鹅副黏病毒病NP、L基因RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选 目的:为探讨脱氧核酶在抑制GPMV复制研究,利用体外转录方法制备鹅副黏病毒病NP、L基因RNA并用该RNA对其所设计靶脱氧核酶进行初步筛选。方法:通过RT-PCR方法获得目的基因NP、L,同时针对NP、L基因保守区上游设... 母连志 宋德武 丁壮 刘慧 张晓东关键词:鹅副黏病毒 体外转录 基因筛选 PRRSV ORF6及IL-18基因重组真核质粒试验免疫研究 被引量:4 2011年 将本实验室构建的重组质粒接种PRRSV的自然宿主断奶仔猪,分析其诱发细胞免疫和体液免疫应答的能力。结果表明:重组质粒pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6免疫组在首免后14d开始产生特异性抗体,且其产生抗体水平随时间呈上升趋势,但pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6两组之间产生抗体差异不显著(P>0.05)。中和抗体检测结果显示只有pEGFP-ORF6在首免后42d有低水平的中和抗体产生。细胞免疫检测结果表明,pEGFP-IL18-ORF6诱导T淋巴细胞增殖和促进IFN-γ和IL-2的分泌的能力显著高于pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18(P<0.05),表明IL-18有效地发挥了分子其佐剂的效用,能增强细胞免疫应答并介导较好的Th1类免疫反应。 牛伟 王中华 王晓莉 宋德武 母连志 丁壮关键词:ORF6基因 IL-18 靶向GP5基因脱氧核酶抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制 被引量:3 2011年 针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JL/07/SW株GP5基因设计了4个脱氧核酶,经体外切割试验筛选得到具有体外切割活性的脱氧核酶,并通过RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光(IFA)检测具有切割活性的脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对GP5基因的Dz-GP5-10抑制效率最高可达到82.4%,Dz-GP5-12也表现良好的抑制效果,表明GP5基因的这2个位点可能是PRRSV复制所必需的。本研究为PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和转基因动物研究奠定了基础。 宋德武 袁洁 李鑫 郭育培 杨建新 宣华 王贵平 丁壮关键词:PRRSV 脱氧核酶 GP5基因 RNAi靶向GP5基因抑制PPRRSV在MARC-145细胞中的复制 本研究将通过构建靶向PRRSV GP5基因的shRNA表达质粒,转染MARC.145细胞后接种病毒,观察siRNA的对PRRSV复制的干扰效果,以探讨靶向GP5基因shRNA能否抑制PRRSV在细胞中复制及其机理,以期获... 宋德武 丁壮 李志杰 王晓莉 宣华 王贵平关键词:基因复制 宠物鸟·疫病·公共卫生 鸟种类多,来源地广,检验检疫预防措施缺乏,致使宠物鸟疫病不断传播,并造成人类的感染,已经威胁到公共卫生.宠物鸟疫病中以新城疫、禽流感、鹦鹉热最为常见,而且与人类关系密切,具有重要的公共卫生学意义.本文从宠物鸟在疫病流行传... 丁壮 丛彦龙 母连志 宋德武关键词:新城疫 禽流感 鹦鹉热 公共卫生 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析 被引量:2 2010年 从临床"高热综合征"病例分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syn-drome,PRRSV),经分离培养、血清学鉴定和分子病毒学鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒,并命名为DZ0908。设计了针对病毒Nsp2基因和GP5基因的引物,扩增出目的基因。通过序列比对进行遗传变异分析,该分离株Nsp2基因序列中第483位和第535~563位氨基酸存在缺失,GP5相对保守,该毒株属于PRRSV变异株,为该病毒的进一步研究奠定了基础。 沈宪文 李月红 王晓莉 宋德武 宣华 王贵平 母连志 丁壮关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 遗传变异分析 鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定 被引量:1 2010年 提取鸡胚成纤维细胞膜蛋白,利用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA)鉴定禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞膜上的受体。结果显示,所提取的细胞膜蛋白中含有8条疑似病毒受体条带。本实验初步鉴定了禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞上的受体蛋白,为揭示流感病毒感染鸡的机制提供了初步证据。 姜秋杰 王广美 丁壮 丛彦龙 樊娇 宋德武 李鑫关键词:禽流感病毒 细胞受体 实时荧光定量PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒 被引量:14 2011年 根据GenBank发表的猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的保守区域的序列分别设计了2对特异性引物。建立了一种快速检测CSFV和PRRSV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并用该方法检测采集的临床疑似病料。结果表明,建立的CSFV、PRRSV-SYBR GreenⅠPCR有较好的特异性,敏感性和重复性,可以用于CSFV和PRRSV的检测。 牛伟 丁壮 王晓莉 宋德武 宣华 母连志 李国江关键词:猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 实时荧光定量PCR RNAi靶向GP5基因抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒在MARC-145细胞中的复制 被引量:7 2010年 针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JL/07/SW株GP5基因设计了3个RNA干扰靶位,构建shRNA表达质粒;将转染干扰质粒6 h后的MARC-145细胞接种病毒,并通过Real-time RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光检测(IFA)对所设计的shRNA表达质粒的干扰效果进行评价;结果表明,构建的干扰质粒可以高效抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制,说明GP5基因的这3个干扰靶位可能是PRRSV复制所必需的。本试验为PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和转基因动物研究奠定了基础。 宋德武 李志杰 王晓莉 宣华 王贵军 丁壮关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 鉴别经典PRRS与HPRRS的液相阻断ELISA试剂盒 本发明涉及一种能够鉴别经典PRRS与HPRRS的液相阻断ELISA试剂盒,其特征在于:将待检血清用样品稀释液2倍稀释后100ul加入ELISA板中37℃孵育1h,用洗涤液清洗5次,每次2min;然后加入结合单抗每孔100... 丁壮 刘慧 母连志 黄志强 吕字华 宋德武 杨闽楠 赛度文献传递