母连志
- 作品数：69 被引量：155H指数：7
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技攻关计划吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鹅副粘病毒与鹅细小病毒主要免疫原性基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的共表达及其免疫被引量：10
- 2008年
- 根据测得的鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株F基因序列,设计1对特异性引物,用作者构建的含F基因的质粒pGF为模板,PCR扩增F基因片段(去除终止密码子),与转座载体pFastBac连接,构建重组质粒pFastBac-F,并进行测序鉴定;根据测得的鹅细小病毒(GPV)GD-01株VP3基因序列,设计1对特异性引物,用作者构建的重组质粒pGVP3为模板,PCR扩增出有Linker的VP3基因(命名为LVP3)。再将重组质粒pFastBac-F与LVP3片段连接,构建重组转座载体pFF-LVP3,转化到DH10Bac宿主菌,将目的基因定向插入到Bacmid质粒中,经筛选获得重组Bacmid F-L-VP3转染Sf9昆虫细胞,所表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测,特异蛋白分子质量约123 000。将表达蛋白免疫雏鹅,经抗体测定证明,表达的F-VP3重组蛋白能诱导机体产生特异性免疫应答。
- 毕玉海曹璐李志杰母连志徐明丁壮
- 关键词：鹅副粘病毒鹅细小病毒F基因VP3基因杆状病毒
- 小鼠体外受精、胚胎培养及胚胎快速冷冻的研究被引量：1
- 2001年
- 本文系统研究了小鼠受精卵的体内发育与运行规律 ,卵母细胞的体外成熟与受精、单细胞胚胎培养及胚胎快速冷冻 ,结果如下 :①注射hCG后 1 2～ 2 0h受精卵发育至原核期 ,42～ 48h为 2 -细胞期 ,48～ 6 0h为 4-细胞期 ,6 0～ 6 8h为 8-细胞期 ,以上各期受精卵均处于输卵管中 ;75～ 78h为桑椹胚 ,78～ 80h为致密桑椹胚 ,90～92h为早期囊胚 ,92～ 96h为囊胚 ,以上各期均处于子宫角中 ;②培养液中添加激素 ,能显著提高卵母细胞的体外受精率 ,添加FCS和激素组的体外受精率又显著高于单独添加激素组 ,FCS还能显著提高胚胎发育率 ;③在培养液中添加EDTA ,能有效克服小鼠胚胎的 2 -细胞阻断 ,其 2 -细胞胚的发育率达 1 0 0 % ,8-细胞胚的发育率达55%以上 ;牛、羊上皮细胞培养上清也能有效克服 2 -细胞阻断。添加乳酸钠和丙酮酸钠可使 2细胞与 8细胞的发育率显著提高 ;④以D -PBS +甘油 +蔗糖为冷冻液 ,以D -PBS +蔗糖为稀释液 ,对小鼠胚胎进行快速冷冻 ,桑椹胚的存活率为 6 9.3% ,早期囊胚的存活率为 6 0 .4%。
- 张嘉保任文陟宋德光徐勇母连志高晓伟
- 关键词：小鼠体外受精胚胎发育胚胎培养
- 靶向新城疫病毒P基因利用RNAi技术抑制其在鸡胚成纤维细胞上的复制
- 构建了针对新城疫病毒NDVNA-1株P基因的RNAi质粒;转染质粒36h后接种NDV，通过对病毒滴度测定、实时荧光定量PCR和细胞病变结果分析，表明其能抑制NDV在CEF中的复制和增殖。本试验为进一步研究NDV复制机理和...
- 母连志丁壮丛彦龙尹仁福刘美王昌庆李少丽邱蜜蜜
- 关键词：新城疫病毒P基因RNAI技术病毒复制
- 文献传递
- 鉴别经典PRRS和HPRRS的胶体金快速诊断试纸条
- 本发明涉及一种鉴别经典PRRS和HPRRS的胶体金快速诊断试纸条，其特征在于：试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘附在不吸水的支撑薄片上；其中结合垫上包被有胶体金标记的经典PRRSV特有抗原；硝酸纤维素膜上...
- 丁壮刘慧母连志韩明明姜翠翠李想朱利塞黄志强
- 吉林省实验动物真菌感染状况调查被引量：3
- 1995年
- 吉林省实验动物真菌感染状况调查陈振文，陈秀芬，姜永和，任文陟，母连志，宋德光，崔宗虎（农牧大学实验动物中心，长春１３００６２）真菌病多为人畜共患病。实验动物如感染有皮肤真菌，不仅影响科学实验的准确性，而且对饲养和实验人员的健康也可造成危害。为了了解吉...
- 陈振文陈秀芬姜永和任文陟母连志宋德光崔宗虎
- 关键词：实验动物真菌病真菌感染
- 水貂出血性肺炎二价灭活疫苗的候选株评价及疫苗制备被引量：1
- 2014年
- 为了获得针对水貂出血性肺炎的特异性疫苗,试验从分离自2012年水貂出血性肺炎病例的24株绿脓杆菌中筛选出血清G型(D4株)与血清C型(C1株)各1株;同时研制血清G型、血清C型及血清G-C型二价灭活疫苗,分别免疫小鼠与水貂,攻病原菌,测定疫苗的保护率、血清抗体消长规律。结果表明:分离株D4与C1在30代内菌体含量稳定,D4株在24代内毒力稳定,C1株在21代内毒力稳定;血清G型与C型单价疫苗都可对50倍LD50本型病原菌产生完全保护,二价灭活疫苗可对50倍LD50血清G型与C型病原菌完全保护。一免后第21天小鼠血清抗体水平达到峰值,抗G型与C型菌中和抗体效价为1∶3 200,1∶6 400,在35 d后抗体水平下降;二免后,水貂55 d内血清中和抗体维持在较高水平。说明D4株与C1株可以作为良好的水貂出血性肺炎疫苗的候选株,制备的二价灭活疫苗能对水貂产生良好保护力,为水貂出血性肺炎防治奠定坚实基础。
- 韩明明母连志范永鑫刘旭平赵静刘晓飞刘慧陈建国
- 关键词：水貂出血性肺炎绿脓杆菌候选株
- 鹅源副黏病毒NA-1株反向遗传操作体系的建立被引量：5
- 2010年
- 应用cRACE等方法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA5′末端和3′末端,分6段扩增得到病毒的结构基因序列,而后连接本室构建的TLH-T转录载体,构建其cDNA全长克隆。在引入分子标签和验证辅助质粒的功能后,4质粒系统共转染VT7细胞系,成功拯救出了具有感染性的鹅副黏病毒。鹅源副黏病毒NA-1株反向遗传操作体系的建立为进一步深入研究该病毒基因组的功能以及新型疫苗的研发奠定了基础。
- 孙玉章丁壮孟柯音丛彦龙母连志王昌庆李少丽
- 关键词：鹅副黏病毒病毒拯救
- GPMV NA-1株F基因真核质粒的构建及实验免疫研究
- 鹅副粘病毒病是1997年开始在我国江苏、广东、吉林等许多地区流行，并造成严重损失的一种新的烈性传染病。该病以消化道病变为特征，具有很高的发病率和死亡率。鉴于此，本文根据Genebank登录的鹅副粘病毒NA-1株F基因序列...
- 刘举芳王昌庆丁壮母连志丛彦龙
- 关键词：鹅副粘病毒病F基因疫苗免疫
- 文献传递
- 犬瘟热琼脂扩散试验方法的建立及初步应用被引量：27
- 1994年
- 采用犬瘟热鸡胚成纤维细胞弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体，应用犬瘟热病貉肝脏（电镜检查“＋＋”以上）制备琼脂扩散抗原，建立了琼脂扩散试验方法，用于犬瘟热病死动物肝、脾脏器中病毒抗原成分的检出。检测送检病料１０份，与电镜检查结果比较，阳性符合率为８５．７％（６／７），阴性符合率为７５％（３／４），总体符合率为９０％（９／１０）。本方法特异、敏感，操作简便，易于推广应用。
- 任文陟陈秀芬母连志陈振文姜永和宋德光崔宗虎
- 关键词：犬瘟热琼脂扩散试验病毒抗原
- 水貂绿脓杆菌分离株的血清型分析和Eric-PCR指纹图谱多样性研究被引量：3
- 2014年
- 为了掌握山东地区水貂出血性肺炎流行情况,从2012年山东省内多个养貂社区进行水貂出血性肺炎流行病学调查。从病貂中分离获得48株绿脓杆菌,分别测定了分离株的生化特性、血清型以及部分菌株对小鼠与水貂的半数致死量(LD50),同时运用Eric-PCR方法对分离进行了进行分型。结果显示,48株分离菌株与标准菌株生化特性基本一致,血清型G型为36株,血清型Ⅰ型为7株,血清型C型为4株;48株分离株大多数对恩诺沙星最敏感;动物试验显示,48株分离株对小鼠与水貂均能致病,所选4株分离株对小鼠与水貂的LD50有差异,且水貂对所选菌株显著敏感于小鼠;分子分型分为13个基因型。结果表明,该地区水貂出血性肺炎病原呈现遗传多样性。本试验为水貂出血性肺炎的防治提供了理论依据。
- 韩明明刘旭平赵静母连志李芹刘晓飞刘慧范永鑫陈建国周丽光
- 关键词：水貂绿脓杆菌生物学特性血清分型
