张洋龙
- 作品数:7 被引量:27H指数:3
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学食品学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省农垦总局科技攻关项目中国博士后科学基金黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 黑龙江地区牛源大肠杆菌毒力和耐药基因检测分析被引量:10
- 2015年
- 为了了解黑龙江地区牛源大肠杆菌毒力基因及主要治疗药物耐药基因的分布,试验采用KB(Kirby-Bauer)法和PCR方法检测了2011—2013年从黑龙江地区各规模化养牛场分离的66株大肠杆菌的毒力和耐药基因。结果表明:66株大肠杆菌中有33株带有毒力基因,检出率达到50.0%,携带1种及其以上的毒力基因分别为30株和3株,占阳性菌株总数的91.0%和9.1%;耐药基因检出率分别为磺胺类耐药基因Sul1/Sul2(32.1%)、Sul3(9.4%),氯霉素类耐药基因Cat1(15.1%)、Cml A(13.2%)、Flor(15.1%),氨基糖苷类耐药基因aph A3(1.9%)、aad A(22.6%)、aac C2(22.6%)、aac C4(20.8%)。
- 张洋龙郎秀艳蒋惠婷刘娇毕莹张建军常春龙倪宏波
- 关键词:大肠杆菌毒力基因耐药基因药物
- 牛源ETEC基因组差异基因的筛选与分析
- 牛源产肠毒素大肠杆菌是一类能够大规模引起犊牛腹泻甚至死亡的细菌,具有较高的发病率和死亡率,一直以来都是养牛业的一个巨大威胁。对于它的致病以及耐药机理的研究工作一直在持续的进行着。 本试验先应用多重PCR技术对本实验...
- 张洋龙
- 关键词:耐药基因抑制性消减杂交基因文库
- 文献传递
- K99-987P-F41重组蛋白及其应用
- 本发明涉及一种K99-987P-F41重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了该重组蛋白的编码基因、制备方法以及在制备产肠毒素大肠杆菌疫苗中的应用。本发明将ETEC黏附素K99、987P、F41...
- 倪宏波郎秀艳张洋龙邢思疑蒋慧婷刘娇
- 文献传递
- 猪蓝耳病和传染性胸膜肺炎混合感染的病例报告被引量:7
- 2012年
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征是由繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种猪接触性传染病,又称"蓝耳病";而猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种接触性传染病,他们都是猪的重要呼吸道疾病,在许多养猪国家流行,且经常混合感染,给养殖业造成重大的经济损失。本试验通过对山东某猪场送检病料进行细菌的分离纯化、PCR鉴定等实验室诊断,结果发现其为蓝耳病和传染性胸膜肺炎混合感染。
- 靳明武张洋龙孙晓雨邵光喜倪宏波
- 关键词:蓝耳病毒放线杆菌PCR
- 产肠毒素大肠埃希菌K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内免疫效果的评价
- 2016年
- 目的评价产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内的免疫效果。方法制备ETEC融合蛋白K99-987P-F41亚单位疫苗、ETEC全菌体灭活疫苗、ETEC天然菌毛K99-987P-F41混合蛋白亚单位疫苗及ETEC重组菌毛K99-987P-F41混合蛋白亚单位疫苗,分别免疫小鼠,同时以免疫PBS的小鼠作为对照。ELISA法检测小鼠血清中IgG、IL-4和IFNγ的水平及小鼠粪便和小肠冲洗液中分泌型免疫球蛋白A(secreted immunogobulin A,sIgA)的含量;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况,并进行攻毒试验。结果 ETEC融合蛋白K99-987P-F41重组亚单位疫苗组小鼠血清中的抗ETEC的特异性IgG抗体、IL-4、IFNγ、粪便和小肠冲洗液中的sIgA、小鼠脾脏B和T淋巴细胞增殖能力均显著高于PBS对照组(P<0.05);ETEC融合蛋白K99-987PF41重组亚单位疫苗对小鼠的保护率为80%,与其他3种疫苗的小鼠保护率相近,而PBS对照组为0。结论 ETEC融合蛋白K99-987P-F41可有效诱导小鼠产生较高滴度的特异性抗体,可作为ETEC重组亚单位疫苗候选蛋白。
- 王欣郎秀艳张洋龙倪宏波
- 关键词:免疫效果亚单位疫苗
- 产肠毒素性大肠埃希菌K99-987P-F41原核表达载体的构建、表达及其纯化被引量:3
- 2016年
- 目的构建产肠毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99-987P-F41原核表达载体,诱导表达后进行纯化。方法利用PCR技术,从ETEC基因组DNA中扩增出K99、987P、F41部分基因片段,将3段目的基因融合亚克隆至大肠埃希菌原核表达载体p ET30a(+),构建重组质粒p ET30a(+)-K99-987P-F41,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经镍离子亲和层析纯化。结果重组表达质粒p ET30a(+)-K99-987P-F41经PCR、酶切及测序鉴定证明构建正确。表达的重组蛋白相对分子质量约60 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的63.8%,纯度为81.2%,浓度为8.953 mg/ml,可同时被天然和重组抗原多抗识别,具有良好的反应原性。结论 ETEC重组质粒p ET30a(+)-K99-987P-F41可在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,利用镍离子亲和层析柱纯化可获得融合蛋白。
- 王欣王琦郎秀艳张洋龙倪宏波
- 关键词:原核表达纯化
- 猪轮状病毒性腹泻及继发感染的诊断被引量:5
- 2012年
- 猪轮状病毒感染是由猪轮状病毒引起的主要以仔猪厌食、呕吐、腹泻、脱水和酸碱平衡紊乱为特征性症状的疾病,当卫生条件不良,轮状病毒会出现与致病性大肠杆菌等混合感染,可使病情加剧,病死率增高。这篇文章针对北京某一猪场仔猪病死病例情况,根据该病的临床症状、病理变化以及实验室诊断,发现有轮状病毒、大肠杆菌、巴氏杆菌和放线杆菌等的混合感染。
- 靳明武张洋龙涂飞邵光喜周玉龙倪宏波
- 关键词:轮状病毒大肠杆菌巴氏杆菌放线杆菌