邓柳红
- 作品数：20 被引量：101H指数：6
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中国热带农业科学研究院科技基金华南热带农业大学科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学化学工程更多>>
- 巴西橡胶树顺式异戊烯基转移酶基因cDNA克隆及其序列特征分析被引量：5
- 2009年
- 以巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳的RNA为Tester;叶片RNA为Driver,利用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库。通过反式Northern点杂交(reverse Northern dot blots)筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因(橡胶生物合成的关键酶基因)高度同源的阳性克隆R363。采用RACE方法获得该克隆的全长cDNA(GenBank登陆号:AY461414)。序列分析表明,该基因长1156 bp,含有873 bp的阅读框,编码290个氨基酸,分子量约为32.9 kD,等电点为7.2,含有N-端跨膜螺旋区。同源性分析表明R363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征,含有cis-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区,推测R363可能是一种新的顺式-异戊烯基转移酶基因。Northern blot分析显示,R363在胶乳中高度表达,在叶中不表达。乙烯处理前后表达强度一致,表明该基因表达不为乙烯所诱导。
- 罗明武邓柳红易小平曾会才肖苏生
- 关键词：巴西橡胶树胶乳
- 巴西橡胶树的脂酰辅酶A还原酶cDNA克隆及其序列分析被引量：1
- 2010年
- 从巴西橡胶树差减cDNA文库中筛选到一个与脂酰辅酶A还原酶同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,采用RACE进行差异片段的5'和3'端的扩增,获得长度为1365bp的cDNA克隆R28(GenBank登陆号:AY461413)。序列分析表明,该基因包含1149bp的开放阅读框,5'-UTR为96bp,3'-UTR为128bp,编码382个氨基酸,推测其蛋白质的分子量为43.5kDa,等电点为8.97,有一个跨膜螺旋区(187至215位氨基酸)和1个由17个氨基酸组成的信号肽(1至17位氨基酸)。R28含有脂酰辅酶A还原酶的保守区(NADP结合蛋白保守区),推测该基因是一个脂酰辅酶A还原酶基因。
- 罗明武邓柳红
- 关键词：巴西橡胶树胶乳
- 巴西橡胶树离体茎段培养研究被引量：3
- 2009年
- [目的]诱导橡胶树茎段腋芽分化增殖,为橡胶树栽培提供大量优良的新型无性系种植材料。[方法]以橡胶树优良单株带芽茎段作外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比的培养基对橡胶树腋芽分化增殖的影响。[结果]以多菌灵2.0g/L+青霉素400.0mg/L预处理+0.1%HgCl2表面消毒,污染率降至29%;以MS+6-BA2.0mg/L为启动培养基,腋芽萌动率达85%。以MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L为生长增殖培养基,萌动腋芽生长发育正常。[结论]多菌灵和抗生素预处理,可以明显降低外植体污染率和死亡率。6-BA对腋芽的萌动和生长起重要作用,而添加2,4-D则抑制腋芽萌发及生长。
- 邓柳红罗明武
- 关键词：巴西橡胶树茎段
- 橡胶树hbYKt基因植物表达载体构建及亚细胞定位
- 2014年
- SNAREs(soluble-N-ethyl-maleimide-sensitive factor attachment protein receptor,可溶性N-乙基马来亚酰胺敏感因子附着蛋白受体)参与囊泡运输,在植物中具有非常广泛和重要的生物学功能。我们从橡胶树胶乳消减cDNA文库中筛选获得橡胶树的SNARE基因,命名为hbYKt。为进一步研究该基因功能,构建了以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为报告基因的融合植物表达栽体pCAMBIAl304h-bYKt,通过农杆菌介导法分别转化洋葱表皮细胞和烟草表皮细胞。荧光显微镜检测结果表明hbYKt定位在洋葱表皮细胞和烟草表皮细胞的细胞质膜中。
- 李博易小平罗明武邓柳红
- 关键词：植物表达载体亚细胞定位
- 昆虫杆状病毒杀虫剂研究与应用综述被引量：6
- 2008年
- 综述了对野生型昆虫杆状病毒和重组昆虫杆状病毒杀虫剂的研究进展,以及我国昆虫杆状病毒杀虫剂的应用研究现状。
- 高博邓柳红易小平肖苏生张春发
- 关键词：昆虫杆状病毒
- 分光光度法测定蛹虫草子实体中硒的含量被引量：1
- 2012年
- 建立了氯酸钾-盐酸苯肼-变色酸分光光度法测定蛹虫草子实体中硒含量的方法,并对其精密度、准确度进行研究。在测定范围内,该方法的线性相关系数R2=0.9991,加标回收率为92%～96%,硒含量相对标准偏差是1.8%,该方法用于蛹虫草子实体中硒含量的测定,结果良好,操作方便,成本低,为富硒蛹虫草菌株筛选和生产上的应用提供了简便易行的硒含量检测方法。
- 邓柳红唐权罗明武黄超张春发
- 关键词：蛹虫草催化光度法硒
- 巴西橡胶树SNARE蛋白全长cDNA克隆及其序列特征分析被引量：3
- 2007年
- 从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)差减cDNA文库中筛选到一个与SNARE蛋白同源性较高的基因片段,根据其序列信息设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)进行差异片段的5′和3′端的扩增,获得了长度为1 070 bp的全长cDNA克隆R295。序列分析表明该基因包含600 bp的开放阅读框,5′-UTR为93 bp,3′-UTR为377 bp,编码199个氨基酸。该基因编码的蛋白具有一个SNARE coiled-coil保守区、一个典型的VAMP基元及一个羧基端的CAAX基元。同源分析表明该蛋白属于一类特殊的longins蛋白。RT-PCR检测表明它在胶乳中特异表达,在叶中没有表达。
- 邓柳红罗明武张春发
- 关键词：巴西橡胶树胶乳
- 巴西橡胶树产胶与排胶机制研究进展被引量：10
- 2006年
- 从产胶形态结构及生理学研究、分子生物学研究、排胶机制研究、割胶及乙烯刺激对产胶排胶的影响等方面对巴西橡胶树的产胶与排胶机制进行综述。
- 罗明武邓柳红
- 关键词：巴西橡胶树乙烯割胶
- 原核表达Cry3Aa蛋白对椰心叶甲的杀虫活性被引量：4
- 2009年
- 椰心叶甲是近年来传入我国的危险性有害生物,严重危害了我国海南省、广东省、台湾省和香港地区的椰子、槟榔等棕榈科植物,并有蔓延趋势,。BtCry3Aa毒蛋白对鞘翅目害虫有较强的杀虫活性。本研究首次发现大肠杆菌原核表达的Cry3Aa重组蛋白对椰心叶甲成虫具有快速杀灭作用,工程菌表达的包涵体重组蛋白处理叶片,饲喂椰心叶甲成虫,浓度为2.0mg/mL时,24h內死亡率为100%。一次性饲喂处理24h、48h和72h的LC50分别为0.7516mg/mL、0.4755mg/mL和0.3714mg/mL,连续性饲喂即使低浓度也达到较高死亡率。本试验结果为cry3Aa基因在转基因技术方面的应用或研发生物农药防治椰心叶甲害虫提供了重要的理论与技术支撑。
- 苏震邓柳红易小平肖苏生张春发
- 关键词：椰心叶甲包涵体
- hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原基因的克隆表达及纯化研究被引量：1
- 2009年
- 旨在提高基因重组人胰岛素在大肠杆菌中表达的稳定性及表达包涵体蛋白的复性水平。在人胰岛素原N端前融合人生长素N端的一段序列来充当前导肽,同时将C肽设计为两个精氨酸,分10段合成长链寡核苷酸链,利用重叠延伸PCR技术(SOE PCR)扩增得到该基因片段。与表达载体PET-30a连接,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白采用Ni-NTA亲和层析纯化,纯化后的蛋白经复性、冻干等步骤后用胰蛋白酶,羧肽酶B双酶切再过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换柱,收集洗脱峰。对制备所得的胰岛素用SDS-PAGE,Western blot进行性质鉴定,及皮下注射小鼠测定生物活性。结果显示,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,表达产物以不溶性包涵体形式纯在,约占大肠杆菌总蛋白的30%。经Ni-NTA亲和层析得到的重组蛋白纯度为85%,DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换纯化得到单组分胰岛素。Western Blot显示制备所得的胰岛素具有胰岛素免疫原性,皮下给药注射小鼠活性测定表明具有明显的降血糖活性。获得了一种高效生产基因重组人胰岛素的方法,为研究胰岛素类似物奠定了前期基础同时也为今后探索胰岛素的非注射给药途径提供了原料。
- 胡兵黄超李文静邓柳红肖苏生张春发
- 关键词：重叠延伸PCR融合蛋白表达纯化活性测定
