韩艳玲
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：包头医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酵母双杂交筛选肺癌组织中MT1H相互作用蛋白
- 目的：
金属硫蛋白家族(metallothieonein,MT)富含巯基的低分子量(6kD)蛋白质,MT由61～62个氨基酸组成。MT家族可分为MT1、MT2、MT3和MT4四种异构体。MT1(包括MT1A、MT1...
- 韩艳玲
- 关键词：肺癌酵母双杂交
- 文献传递
- 金属硫蛋白1h与常染色质组蛋白甲基转移酶1结合调节组蛋白H3K9甲基化并抑制肺癌细胞周期及运动被引量：1
- 2011年
- 目的:观察常染色质组蛋白甲基转移酶1(euchromatic histone methyltransferase1,EHMT1)与金属硫蛋白1h(metallothionein1h,MT1h)的相互作用及定位,探讨其对组蛋白H3K9甲基化和肺癌细胞生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:将pGBKT7-MT1h质粒与pGADT7-EHMT1质粒共同转化至酵母菌株AH109,进行酵母双杂交实验。将pcDNA4/TO/myc-hisA/MT1h与pcDNA6/TR质粒共转染肺癌细胞株A549和A2,并用四环素诱导MT1h表达后,采用免疫共沉淀和激光共聚焦法检测MT1h、标签蛋白c-myc和EHMT1蛋白的表达及定位;运用组蛋白H3K9甲基转移酶试剂盒检测甲基化转移酶活性,Western印迹法检测三甲基化的组蛋白H3K9表达;FCM和克隆形成实验检测MT1h表达对细胞增殖的影响;划痕实验和Borden小室法检测MT1h对细胞迁移的影响。结果:实验证实MT1h与EHMT1存在直接作用,且二者共定位于细胞核。诱导MT1h表达后,组蛋白甲基化转移酶活性升高,并且MT1h与组蛋白赖氨酸H3K9三甲基化密切相关。功能分析显示,MT1h稳定转染的肺癌细胞多处于G0期,细胞运动和迁移能力降低。结论:MT1h与EHMT1在细胞核内直接作用,可能通过调节组蛋白H3K9甲基化来发挥抑癌基因的作用。
- 韩昱晨王佐周韩艳玲刘俊李墨吴非
- 关键词：金属硫蛋白甲基化细胞周期细胞运动
- MT1h与EHMT1结合调节组蛋白H3K9甲基化抑制细胞周期及运动
- 本文利用前期工作筛选出EHMT1为MT1h的结合蛋白,应用酵母双杂交技术证实二者直接作用,并通过免疫共沉淀技术和GST pull-down assay方法,以及细胞免疫荧光确定MT1h与EHMT1共定位细胞核,证实了MT...
- 韩昱晨李墨韩艳玲刘俊吴非
- 文献传递
- RACK1通过影响MCM7磷酸化促进肺癌细胞的增殖被引量：8
- 2012年
- 目的:研究蛋白激酶C受体1(receptor for activated Ckinase1,RACK1)基因沉默或过表达对大细胞肺癌细胞系H460及肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将针对RACK1基因的RACK1siRNA和重组质粒pCMV-sport6-RACK1转入H460和A549细胞中。采用MTT法和集落形成实验分析RACK1基因对细胞增殖的影响,FCM检测其对细胞周期的影响;采用酵母双杂交法、免疫共沉淀法、激光共聚焦显微术及磷酸化蛋白免疫共沉淀法检测RACK1表达与肺癌细胞增殖之间的关系。结果:转染RACK1siRNA后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显下调,细胞的增殖能力和集落生成数明显降低,S期细胞所占比例明显下降(P<0.01);转染pCMV-sport6-RACK1后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显上调,细胞的增殖能力增强,倍增时间增加,集落生成数明显增多,S期细胞所占比例明显升高(P<0.01)。采用酵母双杂交法和免疫共沉淀法检测发现,RACK1与MCM7存在直接作用。RACK1进入细胞核内,与微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein7,MCM7)特异性结合,促进MCM7蛋白磷酸化。结论:RACK1通过直接与MCM7结合促进MCM7蛋白磷酸化途径,继而促进肺癌细胞增殖。
- 李墨吴非张恒韩艳玲刘俊陈小龙韩昱晨
- 关键词：肺肿瘤蛋白激酶C磷酸化
- 胃癌组织中CAP2表达及与病理组织学、远期预后的关系研究
- 2021年
- 目的探讨胃癌组织中腺苷酸环化酶相关蛋白2(CAP2)表达及与病理组织学、远期预后的关系。方法方便选取2014年1月—2015年9月期间于该院接受治疗的85例胃癌患者,通过免疫自制化学法评估CAP2在胃癌组织中表达;以CAP2相对表达量中位数(3.5)为界,将患者分为CAP2高表达组与CAP2低表达组,分析胃癌组织中CAP2表达与病理组织学、远期预后的关系。结果胃癌组织中CAP2高表达45例(52.94%),IOD值为(3.87±1.06);CAP2低表达40例(47.06%),IOD值为(1.65±0.71);经单因素分析显示,胃癌组织中CAP2表达与性别、病灶大小无关(P>0.05);胃癌组织中CAP2表达与CA19-9≥5μg/L、CEA≥37 kU/L、淋巴结分期2~3期有关(P<0.05)。经Logistic回归分析显示,CA19-9≥5μg/L、CEA≥37 kU/L、淋巴结分期2~3期是CAP2高表达的影响因素(OR>1,P<0.05);CAP2高表达组5年生存率(46.67%)低于CAP2低表达组(75.00%),差异有统计学意义(P<0.05);经Logistics回归分析,CAP2高表达是导致胃癌患者5年内死亡的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论胃癌组织中CAP2表达与肿瘤病理组织学参数密切相关,CAP2高表达可促进肿瘤的发生与发展,是影响胃癌患者远期预后的独立危险因素。
- 韩艳玲
- 关键词：胃癌病理组织学远期预后
- 酵母双杂交技术筛选肺癌组织中MCM7蛋白结合蛋白被引量：3
- 2008年
- 背景与目的微小染色体维持蛋白(mini-chromosome maintenance proteins,MCM)MCM7为MCM复合体成员之一,在启动DNA复制、合成中起关键作用,但对能够与其结合的蛋白所知甚少。本研究应用酵母双杂交方法筛选肺癌组织中MCM7蛋白的结合蛋白。方法构建MCM7全长cDNA-pGBKT7质粒,与含肺癌组织cDNA文库-pACT2质粒转化酵母AH109,在涂有X-a-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长,挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序,进行生物信息学分析。结果筛选出11种与MCM7蛋白特异性相互作用的蛋白,其中细胞骨架蛋白5种,各种酶、激酶以及相关受体6种。结论克隆到的基因对进一步研究MCM7蛋白的功能有一定提示作用。
- 韩昱晨官忠燕段红梅唐娜刘俊韩艳玲
- 关键词：酵母双杂交肺肿瘤MCM7
- RACK1直接与MCM7结合,促进细胞增殖、运动
- 目的证实RACK1与MCM7直接作用,进一步了解MCM7与RACK1对肺癌细胞增殖、运动的影响。方法本文利用前期工作筛选出RACK1为MCM7的结合蛋白,应用酵母双杂交技术证实二者直接作用,并通过免疫共沉淀技术方法,以及...
- 李墨韩艳玲刘俊吴非韩昱晨
- 文献传递
