吴非
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RACK1直接与MCM7结合,促进细胞增殖、运动
- 目的证实RACK1与MCM7直接作用,进一步了解MCM7与RACK1对肺癌细胞增殖、运动的影响。方法本文利用前期工作筛选出RACK1为MCM7的结合蛋白,应用酵母双杂交技术证实二者直接作用,并通过免疫共沉淀技术方法,以及...
- 李墨韩艳玲刘俊吴非韩昱晨
- 文献传递
- 金属硫蛋白1h与常染色质组蛋白甲基转移酶1结合调节组蛋白H3K9甲基化并抑制肺癌细胞周期及运动被引量：1
- 2011年
- 目的:观察常染色质组蛋白甲基转移酶1(euchromatic histone methyltransferase1,EHMT1)与金属硫蛋白1h(metallothionein1h,MT1h)的相互作用及定位,探讨其对组蛋白H3K9甲基化和肺癌细胞生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:将pGBKT7-MT1h质粒与pGADT7-EHMT1质粒共同转化至酵母菌株AH109,进行酵母双杂交实验。将pcDNA4/TO/myc-hisA/MT1h与pcDNA6/TR质粒共转染肺癌细胞株A549和A2,并用四环素诱导MT1h表达后,采用免疫共沉淀和激光共聚焦法检测MT1h、标签蛋白c-myc和EHMT1蛋白的表达及定位;运用组蛋白H3K9甲基转移酶试剂盒检测甲基化转移酶活性,Western印迹法检测三甲基化的组蛋白H3K9表达;FCM和克隆形成实验检测MT1h表达对细胞增殖的影响;划痕实验和Borden小室法检测MT1h对细胞迁移的影响。结果:实验证实MT1h与EHMT1存在直接作用,且二者共定位于细胞核。诱导MT1h表达后,组蛋白甲基化转移酶活性升高,并且MT1h与组蛋白赖氨酸H3K9三甲基化密切相关。功能分析显示,MT1h稳定转染的肺癌细胞多处于G0期,细胞运动和迁移能力降低。结论:MT1h与EHMT1在细胞核内直接作用,可能通过调节组蛋白H3K9甲基化来发挥抑癌基因的作用。
- 韩昱晨王佐周韩艳玲刘俊李墨吴非
- 关键词：金属硫蛋白甲基化细胞周期细胞运动
- MT1h与EHMT1结合调节组蛋白H3K9甲基化抑制细胞周期及运动
- 本文利用前期工作筛选出EHMT1为MT1h的结合蛋白,应用酵母双杂交技术证实二者直接作用,并通过免疫共沉淀技术和GST pull-down assay方法,以及细胞免疫荧光确定MT1h与EHMT1共定位细胞核,证实了MT...
- 韩昱晨李墨韩艳玲刘俊吴非
- 文献传递
- MCM7与RACK1在肺癌中表达与临床病理因素间关系
- 目的：
RACK1(receptorfor activated Ckinase 1)为有活性的蛋白激酶C受体。蛋白激酶C的激活依赖于RACK1蛋白。RACK1的功能并不局限于PKC通路,作为支架蛋白及适应蛋白,通过...
- 吴非
- 关键词：蛋白复合体肺癌细胞增殖临床病理因素
- RACK1通过影响MCM7磷酸化促进肺癌细胞的增殖被引量：8
- 2012年
- 目的:研究蛋白激酶C受体1(receptor for activated Ckinase1,RACK1)基因沉默或过表达对大细胞肺癌细胞系H460及肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将针对RACK1基因的RACK1siRNA和重组质粒pCMV-sport6-RACK1转入H460和A549细胞中。采用MTT法和集落形成实验分析RACK1基因对细胞增殖的影响,FCM检测其对细胞周期的影响;采用酵母双杂交法、免疫共沉淀法、激光共聚焦显微术及磷酸化蛋白免疫共沉淀法检测RACK1表达与肺癌细胞增殖之间的关系。结果:转染RACK1siRNA后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显下调,细胞的增殖能力和集落生成数明显降低,S期细胞所占比例明显下降(P<0.01);转染pCMV-sport6-RACK1后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显上调,细胞的增殖能力增强,倍增时间增加,集落生成数明显增多,S期细胞所占比例明显升高(P<0.01)。采用酵母双杂交法和免疫共沉淀法检测发现,RACK1与MCM7存在直接作用。RACK1进入细胞核内,与微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein7,MCM7)特异性结合,促进MCM7蛋白磷酸化。结论:RACK1通过直接与MCM7结合促进MCM7蛋白磷酸化途径,继而促进肺癌细胞增殖。
- 李墨吴非张恒韩艳玲刘俊陈小龙韩昱晨
- 关键词：肺肿瘤蛋白激酶C磷酸化
- MCM7与RACK1在肺癌中的表达及其临床意义被引量：7
- 2019年
- 目的探讨MCM7与RACK1在各类型肺癌中的表达及其相关性。方法收集肺腺癌150例、鳞癌150例、大细胞癌20例和小细胞癌50例及其癌旁正常肺组织石蜡标本,采用免疫组织化学S-P法检测各类型肺癌组织和癌旁正常肺组织中MCM7与RACK1的表达,并分析二者与肺癌临床病理因素的关系。结果 MCM7与RACK1在癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织;χ~2检验结果显示肺癌中MCM7与RACK1的表达均与肺癌的病理分级、淋巴结转移、组织学分类和临床TNM分期相关;Pearson相关性分析结果显示,肺癌中MCM7与RACK1的表达呈正相关;Kaplan-Meier法分析显示MCM7与RACK1高表达患者生存时间缩短。结论肺癌中MCM7与RACK1的表达呈正相关,二者表达在肺癌中起促进作用,可作为检测肺癌细胞的增殖状态、新的判断预后的重要因子,以其为靶向进行临床治疗的重要指标。
- 吴非吴非孙虓栾岚李响
- 关键词：肺癌MCM7RACK1增殖
