朱艳飞
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- CALB脂肪酶在毕赤酵母中的组成型表达及纯化被引量：4
- 2009年
- 根据南极假丝酵母脂肪酶calb的成熟多肽序列,人工合成了由毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子组成的calb基因序列(仅成熟肽)。将该基因克隆至穿梭质粒pGAPZαΑ中,获得的重组质粒pGAPZαA-calb经线性化后转入毕赤氏酵母GS115菌株,构建成组成型表达CALB的酵母工程菌株。酵母转化子在YPD培养基上传代10次后,其外源基因未丢失。经摇瓶发酵4天后,CALB水解活力为14.5U/ml。经脱盐和阴离子交换两步纯化后,其纯度达到了95%以上,目的蛋白的含量达到了220mg/L。
- 朱艳飞杨博
- 关键词：LIPASECANDIDA毕赤酵母组成型表达
- 人血小板衍生生长因子-BB在酿酒酵母中的表达及纯化工艺的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立重组人血小板衍生生长因子-BB(hPDGF-BB)在酿酒酵母中的表达及纯化工艺。方法在5L发酵罐中,探讨接种量、溶氧、诱导温度和诱导pH值对菌体密度及目的蛋白表达量的影响,并通过离子交换层析和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化。结果重组hPDGF-BB工程菌在5L发酵罐分批补料培养中,经84h发酵,细胞A600值可达65.1,目的蛋白表达量占26%。纯化后的蛋白纯度可达95%,产量为15.4mg/L,收率为21.9%。结论已建立了周期短、产率高的hPDGF-BB发酵及纯化工艺,为其大规模生产奠定了基础。
- 薛亮朱艳飞彭端王永华杨博杨汝德
- 关键词：酿酒酵母发酵纯化
- CALB脂肪酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究
- 本研究利用基因工程技术将CALB脂肪酶基因分别与穿梭载体pGAPZαA和pPIC9K连接并在大肠杆菌DH5α中扩增,然后分别在毕赤酵母中进行了组成型表达和诱导型表达,并优化了表达过程。其中,组成型表达经发酵优化后确定其最...
- 朱艳飞
- 关键词：毕赤酵母组成型表达发酵优化
- 文献传递
