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HBs-shRNA重组腺病毒构建及鉴定: 目的构建表达HBV S区短发卡RNA(shRNA)的重组腺病毒,并在体外验证其干扰效果方法(1)从真核表达载体pGenesil-HBs-shRNA中酶切得到U6启动子及S区shRNA片段。构建穿梭质粒pAdTrack-C...; 张靖南邹程程曹漪伊盛艳蕊王森张云栋汤华

HBx-shRNA重组腺病毒的构建及功能鉴定: 2013年; 目的:构建携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标签的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)特异性shRNA重组腺病毒,并对其干扰效果进行鉴定。方法:将前期构建的真核表达载体pGenesil-1-HBx-shRNA和pGenesil-1-Scramble sequence的表达启动子U6连同shRNA亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,构建pAdTrack-CMV-U6-HBxshRNA和对照pAdTrack-CMV-U6-Scramble sequence穿梭质粒;酶切及DNA测序鉴定后,经PmeⅠ线性化后转化入感受态AdEasier细菌,获得重组腺病毒质粒pAd-U6-HBx-shRNA和pAd-U6-Scramble sequence,PacⅠ酶切后转染AD293细胞获得重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA和Ad-U6-Scramble sequence;扩增病毒,测定滴度;以RT-PCR和real-time PCR鉴定重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA对HBx的干扰效果。结果:酶切鉴定得到阳性pAd-U6-HBx-shRNA和pAd-U6-Scramble sequence重组质粒;转染到AD293细胞并包装成功;RT-PCR以及real-time PCR表明,重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA携带的干扰片段能够明显干扰HBx表达(P=0.01)。结论:成功构建了HBx特异性shRNA重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA,它能抑制HepG2.2.15细胞中的HBx的表达,为研究HBx作为肝癌基因治疗作用的一个靶点以及机制奠定基础。; 刘正淑李凯邹程程王森盛艳蕊汤华; 关键词：重组腺病毒乙型肝炎病毒X蛋白 SHRNA 肝细胞肝癌

“脉通方”对于提高糖尿病足病人生活质量的临床研究: 目的：糖尿病足是糖尿病一种严重的并发症，因其治疗时间长，治疗费用高，肢体症状明显而使患者的生活质量受到很大的影响。本研究的目的是通过临床观察，客观评价“脉通方”对于糖尿病足病人生活质量的改善情况。　　方法：采用随机、对照...; 王森; 关键词：糖尿病足中医证候临床疗效生活质量

增溶辅料对黄芩苷的增溶研究: 目的：研究中药提取物黄芩苷的适宜增溶方法；方法：采用HPLC法对黄芩苷溶解性能及其影响因素进行研究，以增溶效应为评价方法；结果：潜溶剂PEG400的增溶效果较好；随着助溶剂葡甲胺浓度的增加，黄芩苷溶解度依次增大；增溶剂配...; 马鸿雁欧水平王森杨明; 关键词：黄芩苷助溶剂包合物

中药复方良肤油水分散经皮给药制剂的设计与评价: 中药复方良肤治疗皮肤瘙痒效果确切,常规乳膏制剂稳定性差,影响临床使用。本文为改善良肤乳膏制剂的稳定性,探索溶度参数理论用于指导中药复方油水分散制剂的设计与评价,对良肤油水分散经皮给药制剂进行研究,并进行了体内外相关评价。...; 王森; 关键词：皮肤瘙痒优化设计疗效评价

HBV通过对MicroRNA499a的上调下调其靶基因MAPK6影响肝细胞肝癌发生: 目的本文主要探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B Virus,HBV)HBV对MicroRNA-499a(miRNA-499a)表达及其对miRNA-499a的相关靶基因有丝分裂原活化蛋白激酶6(mitogen-ac...; 王森盛艳蕊邹程程曹漪伊张靖南万雪梅汤华

HBx及HBs调节RhoC启动子机制的研究: 2012年; 目的探讨HBx（hepatitis B virus X protein）及HBs（hepatitis B virus S protein）对RhoC启动子的作用机制，分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆，双荧光素酶报告分析系统（the dual-luciferase reporter assay system）检测RhoC启动子相对荧光素酶活性，通过分析启动子相对活性变化进而筛寻到起调控作用的启动子区段。过表达Ets-1转录因子，检测RhoC启动子相对荧光素酶活性。结果①成功构建了5个RhoC启动子截短变异克隆。②分别在HepG2细胞和HepG2.2．15细胞中验证了RhoC截短变异启动子活性，确定了起关键作用的启动子区段（-491bp～-320bp、-124bp～-58bp）。③HepG2细胞中分别过表达HBx及HBs，发现启动子区段-491bp～-320bp及-187bp～-124bp可以被HBx及HBs调控。④文献检索结合软件分析这些启动子区段序列，找到了高度相关的转录因子Ets-1、NF-κB、Sp1等。⑤荧光素酶检测和Real-time PCR初步验证了转录因子Ets-1对RhoC的调控作用。结论HBx及HBs可能通过Ets-1等转录因子调控RhoC启动子进而上调RhoC启动子活性。; 秦栋栋李凯曲嘉琳王森邹程程盛艳蕊汤华; 关键词：HBX HBS RHOC 启动子

柔性脂质体在中药经皮给药制剂中的应用: 介绍两种能增加药物透皮吸收的柔性脂质体:传递体和醇质体。对它们的特点、机制及在中药经皮给药制剂中的应用实例进行了介绍。这两种新型脂质体能增加药物的透皮吸收,有良好的应用价值。; 王森欧水平许润春杨明方建合; 关键词：柔性脂质体中药经皮给药传递体醇质体; 文献传递

均匀设计法优选牛蒡子中牛蒡苷提取工艺的研究: 目的:研究乙醇回流提取牛蒡子的提取工艺.方法:通过均匀设计的方法,以牛蒡苷的含量为指标,考察乙醇浓度,回流时间、回流次数、乙醇用量对牛蒡苷提取率的影响.结果:优选出最佳工艺为:5倍量90﹪乙醇回流提取3次,每次1小时,通...; 王森肖丹葛强; 关键词：牛蒡苷牛蒡子均匀设计法; 文献传递

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王森