石炳兴
- 作品数：11 被引量：35H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 新型水蛭素嵌合抗栓剂的构建表达与功能研究被引量：2
- 2006年
- 水蛭素(hirudin,HV)作为新一代抗凝剂,是目前已知最强的天然凝血酶抑制剂,并有望在临床上完全取代肝素。虽然水蛭素有许多优点,但出血倾向是其在临床应用上的主要副作用,尚没有好的解决办法。针对水蛭素在临床应用中所出现的这个问题,依据血栓形成的生理生化机制,构建出了含FXa识别序列水蛭素嵌合抗栓剂,来降低水蛭素在非血栓部位的活性从而减小出血的危险。小鼠尾部血栓模型实验表明,此新型嵌合抗栓剂在不减少水蛭素抗凝血活性的同时, 又大幅度地降低出血副作用,具有非常重要的临床意义。
- 牛晋阳董春娜靳继德石炳兴吴祖泽
- 关键词：水蛭素
- 溶栓抗凝双功能融合蛋白的构建表达及在血栓疾病治疗中的应用研究
- 心脑血管血栓性疾病是人类的近年面临的头号杀手。溶栓和抗凝药物组合应用是临床治疗血栓疾病主要给药方案，出血倾向是血栓治疗的主要副作用。为提高葡激酶的选择性、降低葡激酶的临床用药量，同时，降低水蛭素在非血栓部位的浓度或活性从...
- 石炳兴
- 关键词：溶栓药物抗凝血药血栓治疗水蛭素葡激酶
- 文献传递
- 溶栓和抗凝双功能葡激酶-水蛭素融合蛋白的表达及功能研究
- ＜正＞背景溶栓和抗凝药物联合应用是目前临床治疗心脑血管血栓性疾病的普遍方案,所以具有溶栓-抗凝双功能药物的研发成为研究热点。天然的葡激酶（staphylokinase,SAK）是由某些金黄色葡萄球菌产生的一种外分泌蛋白,...
- 于爱萍靳继德石炳兴董春娜钟根深王立生吴祖泽
- 重组大肠杆菌高密度培养被引量：21
- 2005年
- 重组大肠杆菌的高密度培养是增加单位时间/体积重组蛋白产率的最有效途径之一。如 何在获得高密度的同时取得较高的单位时间／体积目的蛋白产率,是高密度培养(过程中亟待解 决的问题,这与所选用的菌体、构建的表达系统、发酵时pH、溶氧、培养基成分及培养温度、质粒 稳定性、代谢副产物的限制及对比生长速率的控制等因素有关。试从这些方面加以综述,分析这 些条件对重组蛋白生产的影响,介绍大肠杆菌高密度培养领域的一些研究进展。
- 钟根深石炳兴吴祖泽
- 关键词：大肠杆菌比生长速率质粒稳定性
- 肝刺激物促肝细胞增殖信号转导途径的初步研究
- 2005年
- 目的:探讨新生牛肝肝刺激物(hepaticstimulatorsubstance,HSS)促进SMMC7721肝癌细胞增殖的信号转导途径。方法:对新生牛肝进行多步分离,采用3H TdRDNA掺入法检测分离物的促增殖活性,从而获得具增殖刺激活性的HSS;Western印迹方法检测其对肝癌细胞MAPKThr202/Tyr204的磷酸化作用并检测其对SPK的激活作用。结果:经多步分离纯化,获得了活性较高的HSS粗提物,Western印迹法结果显示HSS粗提物能明显提高MAPK的磷酸化水平,并能激活细胞内的SPK活性。结论:HSS对细胞的增殖刺激可能是通过SPK和MAPK途径发挥作用。
- 崔春萍石炳兴刘铖段海峰王立生王清明吴祖泽
- 关键词：肝细胞增殖信号转导
- 溶栓和抗凝双功能融合蛋白及应用
- 本发明涉及溶栓和抗凝蛋白的融合蛋白及其连接肽，更具体地说，本发明涉及抗凝蛋白与具有纤溶酶原激活作用的蛋白质分子通过能被凝血因子识别并裂解的氨基酸序列作为连接肽连接而成的融合蛋白，该融合蛋白的医药学用途，能被凝血因子识别序...
- 石炳兴吴祖泽于爱平董春娜
- 文献传递
- 靶向溶栓抗凝双功能融合蛋白的构建表达及在血栓疾病治疗中的应用研究
- 心脑血管血栓性疾病是人类的近年面临的头号杀手。溶栓和抗凝药物组合应用是临床治疗血栓疾病主要给药方案,出血倾向是血栓治疗的主要副作用。为提高葡激酶的选择性、降低葡激酶的临床用药量,同时,降低水蛭素在非血栓部位的浓度或活性从...
- 石炳兴
- 关键词：溶栓抗凝血栓葡激酶
- 文献传递
- 表达重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的大肠杆菌工程菌的高密度培养被引量：6
- 2006年
- 采用溶氧反馈的分批培养流加补料的方法高密度培养重组大肠杆菌BL21（DE3）生产重组葡激酶．水蛭素融合蛋白。通过摇瓶培养对菌种和培养条件的初步筛选，采用溶氧反馈的流加补料策略，进行了5L发酵罐的合成培养基和复合培养基的发酵工艺研究。通过对培养条件的不断优化，重组葡激酶．水蛭素融合蛋白在大肠杆菌BL21（DE3）里得到了高效表达，菌体密度最终达到115g／L（WCW）以上，可溶性重组融合蛋白占菌体总蛋白的30％以上，含量约为1．1～1．2g／L。5L发酵罐的发酵工艺参数在40L发酵罐中进行了放大培养，结果表明该工艺能有效地放大，可适用于工业生产。
- 钟根深石炳兴王海东蒋中华吴祖泽
- 关键词：重组大肠杆菌葡激酶水蛭素
- 人组织型纤溶酶原激活剂-水蛭素融合基因的构建及其在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2005年
- 构建并表达兼有溶栓和抗凝活性、减少出血副作用的人组织型纤溶酶原激活剂(t_PA)和水蛭素(HV2)的融合蛋白。通过提取总RNA和RT_PCR获得t_PA基因,与HV2基因通过活化凝血因子X(FXa)识别序列(IEGR)的对应碱基序列连接构成融合蛋白基因,融合蛋白基因经pGEM_T、pIC9克隆至表达载体pIC9K上,电转导入毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115。转化子摇瓶内甲醇诱导表达。纤维蛋白平板溶圈法和纤维蛋白凝块法分别检测溶栓和抗凝活性。琼脂糖凝胶电泳结果显示克隆的t_PA基因片段大小为1700bp,序列测定结果表明其35位氨基酸由文献报道的精氨酸突变为色氨酸。限制性酶切和PCR鉴定结果均表明融合蛋白基因已克隆入表达载体和宿主菌。甲醇利用实验、G418抗性筛选获得多拷贝甲醇利用快型克隆。甲醇诱导表达产物具有纤溶活性并可被抗t_PA抗体抑制。完整融合蛋白无抗凝活性,但以FXa裂解后可释放抗凝活性。同时,融合蛋白以单链和双链两种形式存在。融合蛋白在血栓部位特有的FXa作用下靶向释放抗凝活性,具有溶栓抗凝双功能,有望降低临床出血副作用。
- 于爱平石炳兴董春娜蒋中华吴祖泽
- 关键词：人组织型纤溶酶原激活剂水蛭素溶栓抗凝
- 一类溶栓抗凝双功能融合蛋白及应用
- 本发明涉及一种治疗血栓的重组融合蛋白的融合方法和所得到的融合蛋白，具体而言是抗凝血酶活性蛋白水蛭素与具有纤溶酶原激活作用的蛋白质分子通过凝血因子Xa(FXa)识别的氨基酸序列作为连接肽的连接方法和所得到的融合蛋白，特别涉...
- 石炳兴吴祖泽于爱平董春娜
- 文献传递
