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EGS体外抑制人巨细胞病毒临床病毒株UL148基因表达的研究: 背景由于临床低传代病毒株分离率低,传代次数受到限制,在大量HCMV的基础研究中,多选取实验室病毒株为研究对象.但实验室病毒株在体外反复传代的过程中随着部分基因的丢失,使其生物学特性发生改变,与致病的临床病毒株存在较大的...; 胡兢晶苏海浩丁俊彩郭媛媛谢斌华伍苑宾密英鸽王波; 关键词：人巨细胞病毒

人巨细胞病毒临床分离株的鉴定及UL148基因分析被引量：1: 2012年; 目的:研究广州地区先天性感染患儿体内人巨细胞病毒(HCMV)临床低传代分离株的鉴定及其UL148基因的序列特征分析。方法:收集广州地区感染HCMV的新生儿尿液标本,从中分离低传代临床病毒株,应用多重PCR方法鉴定,对其进行UL148基因全序列扩增,扩增产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析。结果:成功分离出3株HCMV低传代病毒株(D2、D3、D52),经鉴定后的UL148基因序列被GenBank收录,序列号为:DQ180380,DQ180363和DQ180354。序列分析显示,3株临床分离株中UL148序列高度保守;在UL148全基因序列951个核苷酸中,所有变异均为碱基替换,无插入及缺失突变;编码蛋白由316个氨基酸残基组成,氨基酸序列也比较保守,各分离株中变异率为0.3%～1.9%;编码蛋白翻译后修饰位点包括细胞黏附相关的特征序列、PKC磷酸化位点、酪氨酸激酶II磷酸化位点、cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点等;其编码蛋白等电点为9.17～9.37。结论:广州地区HCMV UL148基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列极为保守,但仍具有一定的多态性,提示UL148 ORF可能是一个重要的功能基因。; 郭媛媛王波胡兢晶苏海浩丁俊彩谢斌华伍苑宾; 关键词：人巨细胞病毒

应用外部引导序列切割人巨细胞病毒UL148 RNA的研究: 2017年; 目的研究人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）临床病毒株UL/b＆#39;区域UL148基因功能及抗HCMV治疗新策略,应用DNA性质外部引导序列（External guide sequences,EGS）在体外抑制UL148 RNA的表达.方法应用RNA structure生物软件模拟UL148 RNA二级结构,选择二级结构相对简单的区域设计EGS,并合成EGS核苷酸序列.应用PCR方法分别扩增UL148及M1RNA基因,克隆至T7启动子下游,在T7 RNA聚合酶的作用下,体外转录UL148 RNA及M1RNA,其中UL148以32p标记并进行体外转录.混合EGS、M1RNA及UL148 RNA于切割反应液中,反应1h后,进行尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,Typhoon扫描仪观察结果.结果根据UL148 RNA二级结构选取第58 ～72位碱基作为EGS结合区域,其切割位点位于57位,针对此区域设计EGS57,并在体外进行EGS57与UL148 RNA结合的二级结构的模拟,可形成M1RNA天然作用底物类似的茎环结构.在T7 RNA聚合酶的作用下,分别在体外转录M1RNA及UL148 RNA,其大小均与预期相符.经切割反应,可获得与预期切割位点相符的切割条带.结论 EGS57可切割UL148RNA,其切割位点准确,与预期相符.该研究为进一步探讨UL148基因功能提供有效基因沉默工具.; 胡兢晶王波苏海浩丁俊彩郭媛媛谢斌华伍苑宾蔡丽君郭梦杰; 关键词：人巨细胞病毒

应用EGS引导核酶P高效抑制HCMV临床病毒株UL148基因表达: 背景目前,婴幼儿HCMV感染的发病率逐年升高,婴儿先天性感染往往导致先天畸形、耳聋、智力障碍等严重后遗症,甚至死亡.有效防治或阻断HCMV先天感染对提高儿童健康水平、生活质量方面具有重大意义.随着病毒部分分子机制的明确...; 胡兢晶苏海浩丁俊彩郭媛媛谢斌华伍苑宾密英鸽王波; 关键词：人巨细胞病毒

人巨细胞病毒临床病毒株UL148基因B细胞表位的预测及其免疫原性分析: 目的：预测与分析人巨细胞病毒临床病毒株UL148基因B细胞表位并制备人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株UL148基因的抗体对其进行免疫原性分析. 方法：应用生物信息学方法,以HCMV UL148基因氨基酸序列为基础,采用...; 伍苑宾胡兢晶王波六苏海浩郭媛媛谢斌华密英鸽; 关键词：人巨细胞病毒 B细胞表位

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谢斌华