公共文化服务平台

高丽华: 作品数：94 被引量：156H指数：9; 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>

合作作者

一种用于判断靶向单克隆抗体治疗肿瘤疗效的预测分子: 本发明公开了一种用于判断靶向单克隆抗体治疗肿瘤疗效的预测分子。本发明提供了检测PRSS1表达量的物质在制备检测待测肿瘤细胞是否对靶向EGFR单克隆抗体耐药产品中的应用；或检测PRSS1表达量的物质在制备检测待测肿瘤患者是...; 王友亮谭招丽高丽华邵勇胡显文; 文献传递

聚乙二醇修饰对尿激酶原性质的影响被引量：6: 1996年; 为了延长尿激酶原的半衰期，采用聚乙二醇５０００（ＰＥＧ５０００）对该酶进行了修饰。结果表明，尿激酶原经ＰＥＧ修饰后，在兔体内的半衰期延长了９～１３倍，同时酶活性也有损失，溶酰胺活性保持６２％，溶纤活性保持３．８％～１０％。; 叶建新肖成祖张正光高丽华于芳; 关键词：聚乙二醇修饰尿激酶原半衰期药代动力学

抗VEGF/VEGFR靶向肿瘤血管药物的研究进展被引量：10: 2014年; 研究表明,肿瘤的生长转移和新血管的生成有密切关系,其中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其信号途径在肿瘤血管生成中起关键作用。阻断该途径的任何环节均可有效抑制肿瘤血管的生成,进而抑制肿瘤的生长和转移。近年来,已有多种以VEGF/VEGFR为靶点的抗肿瘤血管生成药物投入临床应用,其中bevacizumab为第一个获批上市的抗肿瘤血管生成药物。继bevacizumab后,一种以基因工程手段获得的人Fc融合蛋白Zaltrap也成功在美国上市,这种杂交分子的药代动力学明显优于单克隆抗体,能更好的遏制肿瘤血管的发生并消退已形成的肿瘤血管。在肿瘤的临床治疗中,Zaltrap比bevacizumab显示出更大的优势。此外,VEGFC/D Trap及小分子酪氨酸激酶抑制剂也能有效抑制肿瘤血管的生成。在此对以VEGF/VEGFR为靶点的抗肿瘤血管生成药物进行综述。; 李伊培郗永义张连成高丽华邵勇刘羽潘芸高招刚胡显文陈惠鹏张嵘; 关键词：VEGF/VEGFR 肿瘤血管生成抗肿瘤药物 AFLIBERCEPT

重组人尿激酶原在CHO细胞中的高效表达及其纯化: 2012年; 用鸡β-globin的MAR序列和人看家基因延伸因子1α(hEF-1α)的调控序列以及旱獭RNA稳定与输出序列,构建了重组人尿激酶原(recombinant human pro-urokinase,rhPro-UK)的高效表达载体,在CHO细胞中获得了rhPro-UK的高效稳定表达,rhPro-UK的表达水平达到1 299 IU(以百万细胞1 d的表达量计)。采用阳离子交换层析、疏水层析和凝胶排阻层析的三步工艺纯化表达rhPro-UK的CHO细胞培养上清液,rhPro-UK的纯度达到98%、回收率为60%～70%。; 李世崇叶玲玲刘红张正光高丽华胡显文陈昭烈; 关键词：CHO细胞重组人尿激酶原纯化

preS1-preS2-HBsAg真核表达载体的构建及在293细胞中的表达: 2012年; 目的研究含有前S1抗原、前S2抗原的乙肝病毒外膜蛋白(前S1蛋白+前S2蛋白+S蛋白)的跨膜特性。方法依据乙肝病毒大外膜蛋白的计算机模拟图将其分为分别命名为HBsAg1(1-174),HBsAg2(1-245),HBsAg3(1-294),HBsAg4(1-341),HBsAg5(1-373),HBsAg6(1-400),最终累加成一条连续的长链状态,贯穿在细胞内外形成四次跨膜区,并以此6个片段为模板设计6对引物。从含有乙肝病毒外膜蛋白基因的质粒pcDNA3.1-preS1-preS2-HBsAg中扩增出前S1,S2基因,采用重叠延伸PCR方法连接人尿激酶原信号肽+6×组氨酸(His)+前S1蛋白、前S2蛋白+HBsAg(1～6)+血细胞凝集素(HA);PCR产物经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入经同样处理的真核表达载体pIRES2-EGFP,构建含有Pro-UK,6×His,preS1,preS2,HBsAg跨膜序列及HA的表达载体pIRES2-EGFP/Pro-UK-6×His-preS1-preS2-HBsAg(1～6)-HA,该表达载体应能够共表达乙肝病毒外膜蛋白和绿色荧光蛋白。采用阳离子脂质体法将构建好的表达载体转染293细胞,经G418加压筛选阳性克隆,并进一步通过荧光观察、蛋白质免疫印迹、免疫双标等方法检测目的蛋白在293细胞的表达。结果 PCR结果显示,电泳片段大小符合HBsAg1～HBsAg6片段的600,810,957,1098,1194和1275 bp理论值。酶切鉴定正确的重组质粒测序结果与预期序列完全一致。转染和单克隆筛选后得到转染成功的HBsAg1～HBsAg6的293细胞,呈亮绿色,细胞形态良好,荧光表达强度高;Western印迹结果显示,在相对分子质量31 000,34 000,44 000,47000,54 000和60 000处有明显的阶梯状蛋白信号,条带清晰并与理论值相一致。结论成功构建了含有前S1、前S2蛋白的乙肝外膜蛋白基因的真核表达载体,并获得了能共表达乙肝外膜蛋白跨膜序列和绿色荧光蛋白的293细胞系。; 牛明福吉萍武汉良邵勇高丽华胡显文; 关键词：293细胞

用国产微孔玻璃珠初步纯化人u-PA: 1999年; 用国产微孔玻璃珠从ＣＤ－１工程细胞株培养上清中纯化ｕ－ＰＡ，摸索了微孔玻璃珠结合ｕ－ＰＡ的条件和洗脱方法，比较了硫酸铵线性梯度洗脱或２５％乙二醇洗脱ｕ－ＰＡ活性的结果，最后确定洗脱的条件为０．２５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ、１～２ｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４、ｐＨ９．３。经此一步纯化，ｕ－ＰＡ比活性达到１５３２９ＩＵ／ｍｇ，回收率７８％，还原条件下ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分子量为５２×１０３的单链ｕ－ＰＡ占７４％。; 郭志霞叶建新张正光高丽华黄子才肖成祖; 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂纯化

抗CD20嵌合抗体的表达与活性检测被引量：4: 2005年; 表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定。设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列。运用重叠延伸PCR,连接可变区与恒定区,将轻、重链基因连接至pIRES双表达载体。将质粒以阳离子脂质体转染CHO细胞,ELISA挑选阳性克隆,共获得7株表达较高的克隆,表达量约为2mg/L。扩大培养阳性克隆anti-CD20-1B3,收获上清,以蛋白A进行亲和层析纯化表达蛋白。SDS-PAGE检测表明纯化纯度达到95%,蛋白相对分子量与理论值吻合。以CD20+细胞Raji、Daudi、Ramous检测,表明该抗体能与CD20抗原特异性结合,体外杀伤试验说明抗体能够杀伤CD20+淋巴瘤细胞。; 师明磊胡显文陈惠鹏高丽华李世崇; 关键词：嵌合抗体活性检测脂质体转染 IGG1 层析纯化

钙、磷、镁和钾对雪莲细胞悬浮培养的影响被引量：11: 2003年; 考察了钙、磷、镁和钾等大量营养元素对雪莲细胞TUIP-8悬浮培养的影响,确定了培养雪莲细胞的钙、磷、镁、钾的最佳浓度范围。低于以上4种大量营养元素的最适浓度范围,TUIP-8细胞的生长和黄酮合成都将明显受到抑制。该细胞对Ca2+和Mg2+具有较好的浓度耐受性,而对PO43-和K+的耐受性较差。; 高丽华胡显文刘波李世崇胥照平赵德修; 关键词：水母雪莲植物细胞培养钙磷镁钾

雪莲培养物高效液相色谱指纹图谱研究被引量：2: 2015年; 目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立雪莲培养物指纹图谱。方法:以紫丁香苷为参照物,采用梯度洗脱HPLC法建立雪莲培养物指纹图谱,并进行相似度评价和聚类分析。色谱柱为CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相A为0.1%TFA/水,流动相B为0.1%TFA/乙腈,梯度洗脱,检测波长260 nm。结果:建立了雪莲培养物指纹图谱,方法的精密度、稳定性、重现性较好,共标示出9个共有峰。结论:该法为雪莲培养物的鉴定提供了依据,其指纹图谱可用于雪莲培养物的质量控制。; 贾康杰马昆鹏高丽华邵勇方均建董芳霆胡显文; 关键词：指纹图谱紫丁香苷高效液相色谱法

抗单链尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备被引量：3: 1999年; 高丽华肖承祖; 关键词：纤溶酶原激活剂单克隆抗体

高丽华

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

高丽华

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈