高欢欢
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
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- 稀有血型基因分型的新方法基于多重PCR的多标本混合检测
- 2012年
- 目的建立可同时检测低频血型抗原等位基因Fyb和S,并且可进行多个标本混合检测的多重PCR基因分型方法。方法针对血型抗原Fyb和S等位基因的单核苷酸多态性(SNP)位点分别设计序列特异性引物,建立稳定的多重PCR体系。通过优化引物设计及PCR反应条件,提高多重PCR反应的灵敏度,使其可同时检测5份DNA标本。应用多重PCR体系,以每5份标本混和检测的方式,对4490份随机献血者标本进行Fyb和S血型抗原基因分型。通过单独的PCR-SSP验证方法,分别检测多重PCR中阳性标本的高频等位基因Fya或s,从而获得稀有血型表型Fy(a-b+)或S+s-。
- 贺云蕾高欢欢叶璐夷郭忠慧朱自严
- 关键词：稀有血型基因分型血型抗原序列特异性引物血型系统引物设计
- 血液核酸扩增检测实验室室内质量控制方法探讨被引量：4
- 2012年
- 目的探讨血站检验科核酸检测实验室建立室内质量控制方法。方法第1种方法为目前实验室常规使用,即以已知浓度的HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA弱阳性室内质控品,及核酸阴性室内质控品,经实时荧光PCR扩增,以其Ct值直接判断实验结果的有效性。第2种方法为基于日常检测结果阳性率统计的监测假阳性发生的室内质量控制方法。结果对于第1种方法运用:即选用已知浓度的HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA弱阳性室内质控品,及核酸阴性室内质控品,当室内质控品混样模式检测结果Ct值达到预期结果时,其质控范围内的献血者标本若符合实验有效性判断标准可正常发放报告。
- 郑岚周国平陈凌燕蔡茵李广波俞士飞陈绮高智俊陈轶珏高欢欢杨军谢云峥
- 关键词：核酸扩增检测室内质控品假阳性实时荧光检验科RNA
- 中国人中6例弱D表型的分子机制研究
- 叶璐夷贺云蕾高欢欢朱自严
- 中国人中6例弱D表型的分子机制研究被引量：1
- 2012年
- 目的Rh血型系统是最复杂的血型系统之一,其中的RhD抗原也是最具有临床意义的血型抗原之一。弱D表型属于RhD抗原变异型,目前已发现弱D型等位基因80多种。本文的目的在于阐明在中国人群中发现的几种新的弱D表型其分子机制和血清学表现。方法血样均来自上海市血液中心无偿献血者。采用常规血清学方法检测Rh血型系统D、C、c、E、e抗原表型。RhD抗原采用不同的IgG型抗-D试剂和人源血清,通过间接抗球蛋白试验检测是否为D变异型,采用Diagast
- 叶璐夷贺云蕾高欢欢朱自严
- 关键词：血型系统血清学方法血型抗原抗原变异分子机制研究变异型
- 血液核酸扩增检测实验室室内质量控制方法探讨
- 郑岚高欢欢杨军谢云峥周国平陈凌燕蔡茵李广波俞士飞陈绮高智俊陈轶珏
- 上海地区汉族人群中性粒细胞抗原的基因频率与其分子特征研究被引量：5
- 2012年
- 目的:了解上海地区汉族人群人类中性粒细胞抗原(Human neutrophil antigens,HNA)的基因频率分布与其分子特征。方法:使用序列特异性引物聚合酶链反应(Polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP)对上海地区326名随机健康献血者的HNA-1(-a,-b,-c),HNA-3(-a,-b),HNA-4a(+,-)和HNA-5a(+,-)进行基因分型,测序和PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)验证其分子特征;并使用流式细胞术分析另外91份随机健康样本HNA-2a抗原表达。结果:本研究成功分析HNA-1、3-5各系统基因型。发现3例FCGR3B的变异体,其中2例为FCGR3B*01等位基因发生227 A→G和349 G→A的突变,另1例为一条染色体上的FCGR3B*02等位基因发生277 A→G的突变。HNA-1a、1b、1c、3a、3b基因频率分别为0.620、0.380、0、0.653和0.347,HNA-4a(+)、4a(-)、5a(+)、5a(-)基因频率分别为1、0、0.896和0.104,流式结果证实HNA-2a抗原频率为1,所测个体均具有HNA-2a阳性粒细胞,但不同个体具有不同比例的阳性粒细胞。这些分布与高加索人群相比有非常显著的差异,而与广东人群相比,主要是HNA-3系统分布有差异。结论:中国上海人群HNA具有独特的多态性,需要引起输血实践的注意。
- 朱傲雪杨颖张嘉敏杨启修高欢欢朱自严
- 关键词：基因频率抗原频率序列特异性引物聚合酶链反应流式细胞术
- 稀有血型基因分型的新方法基于多重PCR的多标本混合检测
- 贺云蕾高欢欢叶璐夷郭忠慧朱自严
- 人类红细胞血型抗原基因分型多重PCR体系的构建及应用被引量：5
- 2012年
- 目的建立可同时检测血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019的一套稳定的基因分型方法，通过筛选获得所检测人群的稀有血型数据，可扩大中国稀有血型资料库。方法应用基于PCR的基因定点诱变技术制备Dib、k、Jsbl910、Jsb2019血型等位基因检测对照品。分别针对血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019等位基因的单核苷酸多态性位点设计序列特异性引物，通过优化PCR条件建立多重PCR体系，并对4190份随机献血者样本进行Dib、k、Jsbl910、Jsb2019血型抗原基因分型。结果成功制备出Dib、k、Jsbl910、Jsb2019基因检测对照品，并成功构建检测血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019的多重PCR体系，所建立的多重PCR体系具有良好的重复性和稳定性，4190份随机献血者样本中共检出2例Di（b-）样本，未检出k-和Js（b-）样本。结论多重PCR具有快捷、高通量且成本低的优点，可用于筛选稀有血型。获得的稀有血型可存入稀有血型数据库，为稀有血型患者及长期输血患者提供相配合的血液，减少输血不良反应的发生。
- 高欢欢贺云蕾叶璐夷王攀郭忠慧朱自严朱永明
- 关键词：血型抗原基因分型定点诱变多重聚合酶链反应
