齐兵
- 作品数：15 被引量：25H指数：2
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- 两种新的凋亡诱发蛋白的聚合作用及其对细胞凋亡的调控被引量：1
- 2003年
- Asy(apoptosis/saibousi Yutsudo)是日本Yutsudo小组于1999年发现的一个新的人类细胞凋亡诱发基因。2000年齐兵等人通过酵母双杂交系统从人肺细胞系(W1-38)cDNA文库中克隆出一个能与ASY蛋白相互作用的蛋白的新基因haP(homologue ofasy protein)、已经证明ASY能在酵母细胞和哺乳动物细胞中形成同源二聚体,ASY与HAP能在酵母细胞中形成异源二聚体,ASY和HAP均能诱发肿瘤细胞Saos2和CGL4凋亡。通过酵母双杂交系统证明HAP能在酵母细胞中形成同源二聚体;通过交叉免疫沉淀证明HAP与ASY能在人类细胞中形成异源二聚体。通过AnnexinV,TUNEL,DNALadder和流式细胞计数等检测凋亡的技术,对asy,hap单独转染或共转染的人类正常细胞或肿瘤细胞的凋亡进行定性或定量检测,证明ASY和HAP不仅诱发人类肿瘤细胞凋亡,而且能诱发人类正常细胞凋亡,并且证明由ASY与HAP形成的异源二聚体可降低由ASY和HAP各自形成的同源二聚体诱发细胞凋亡的活性,揭示ASY与HAP形成同源或异源二聚体是调控人类细胞凋亡的重要机制。
- 刘青珍甘淼齐义鹏李凌云齐兵
- 关键词：细胞凋亡调控
- 腺病毒载体与肿瘤基因治疗被引量：1
- 1999年
- 基因导入系统是恶性肿瘤基因治疗中急需解决的问题．由于腺病毒作为载体介导外源效应基因在肿瘤细胞中的高效表达，使其应用日趋增多．用于肿瘤基因治疗的腺病毒可分为复制缺陷型和复制型．常用的效应基因包括：抑癌基因，前药转换酶基因。
- 齐兵齐义鹏苏霏
- 关键词：肿瘤基因治疗腺病毒载体
- 缺失调亡抑制基因病毒的构建及在肿瘤基因治疗中的应用
- 本发明公开了一种缺失凋亡抑制基因病毒的构建及其应用。它是以腺病毒或单纯疱疹病毒为材料,经过PCR扩增基因片段,插入质粒DNA中,进一步用GFP等标记基因和TNF等效应基因,构建出转移载体,插入失活与复制有关的凋亡抑制基因...
- 齐义鹏肖庚富齐兵苏霏王业富刘德立朱应李晓锋刘子夜
- 文献传递
- HAP蛋白疏水区的聚合功能及其与细胞凋亡的关系
- 2004年
- asy和hap是一对新的细胞凋亡诱发基因 .二者单独转染细胞均能诱发细胞凋亡 ,能在酵母和哺乳动物细胞中形成同源二聚体 ,二者共转染酵母和哺乳动物细胞能形成异源二聚体 .同源二聚体诱发细胞凋亡 ,异源二聚体降低同源二聚体诱发细胞凋亡的活性 .氨基酸序列表明 ,HAP(homologousofASYprotein)含有内质网挽回模体 (KKKAE)、第一疏水区和第二疏水区 .对 3个功能区的缺失突变体研究显示 ,缺失内质网定位信号的HAPΔERS蛋白保留着同源聚合和与ASY异源聚合的能力 ,而分别缺失第一、第二疏水区的突变体HAPΔ4 8 139、HAPΔ15 7 2 18则丧失以上功能 ;通过流式计数法计算 3个缺失突变体诱发细胞凋亡比率 ,用生物统计学方法说明不同的比率与HAP诱发细胞凋亡的比率相比都有显著差异 .说明内质网定位信号、疏水区在HAP蛋白的诱发细胞凋亡过程中起重要作用 ,进一步揭示了HAP诱发细胞凋亡的机制 .
- 甘淼刘青珍齐义鹏齐兵
- 关键词：HAP细胞凋亡缺失突变体
- 杆状病毒基因前导小顺反子的序列特征及其翻译衰减调控模型
- 1997年
- 在杆状病毒许多基因的ｍＲＮＡ前导序列中存在一类小顺反子（Ｍｉｎｉｃｉｓｔｒｏｎ）结构．发现某些昆虫基因和苜蓿尺蠖核型多角体病毒的基因在密码子的使用偏向上各不相同．而小顺反子一般偏向于使用少数密码子，具有重复密码子．小顺反子与大顺反子同框；多数小顺反子的ＡＴＧ上下游符合Ｋｏｚａｋ序列；有的小顺反子起始密码子后紧跟着就是终止密码子．这些特征暗示小顺反子可能是一类独特的有别于其它杆状病毒基因而具有特殊功能的“基因”．小顺反子的作用可能与原核生物氨基酸衰减调控子Ａｔｅｎｕａｔｏｒ有相似之处，但它不是在转录水平，而在翻译水平上减弱其后大顺反子的表达．
- 齐兵王家旺齐义鹏
- 关键词：杆状病毒
- 用酵母双杂交系统分离一个新的人类细胞凋亡诱发基因被引量：15
- 2000年
- ａｓｙ基因是最近发现的一个新的凋亡诱发基因，但其诱发凋亡的机制仍不清楚． 采用酵母双杂交系统，从人肺细胞系（ＷＩ－３８）ｃＤＮＡ文库中克隆了一个ａｓｘ相互作用蛋白 基因ａｓｙｉｐ（ａｓｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ）． ａｓｙｉｐ在人的各种组织内均能组成型转录合成 １．８和 ２．７ ｋｂ两种 ｍＲＮＡ转录本，但转录水平有明显差异，在脑组织中转录水平最高．而且， 脑组织中 ２．７ ｋｂ ｍＲＮＡ转录水平大大高于 １．８ ｋｂ的转录本．序列分析表明两种转录本起 始于一个共同的 ５’端，但 ３’端加 ｐｏｌｙ（Ａ）位点不同．两者共享一个大的可读框，编码 ２６ ｋｕ的蛋白ＡＳＹＩＰ．推论的氨基酸一级结构表明，ＡＳＹＩＰ含有两个大的强疏水区、两个蛋 白激酶Ｃ磷酸化位点和两个酪蛋白激酶磷酸化位点．Ｃ端具有一个内质网捕获信号 （Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ）．免疫沉淀试验进一步验证ＡＳＹＩＰ和ＡＳＹ在哺乳动物细胞中可 以相互结合．与ａｓｙ基因一样，ａｓｙｉｐ基因的大量表达能抑制肿瘤细胞Ｓａｏｓ－２的生长，诱 发细胞凋亡，但效率比ａｓｙ低．
- 齐兵齐义鹏M.Yutsudo刘青珍
- 关键词：酵母双杂交系统
- 一种新的重组腺病毒的构建及其对人肿瘤细胞的影响被引量：1
- 1999年
- 腺病毒E1A基因诱导细胞凋亡．E1B19K基因及E1B55K基因抑制细胞凋亡，前者被克隆到腺病毒转移载体pCA13的HCMVIE启动子下游．构建成转移载体pCAE1A。采用lipofectin法将PCAE1A和含腺病毒基因组（E1、E3区缺失）的质粒pBHG11共转染293细胞，7～10d后得到重组病毒v5Ad4。用v5Ad4感染人肺腺癌细胞系A549，结果表明v5Ad4有明显杀伤和裂解肿瘤细胞功能。在人胚肺正常二倍体细胞中，v5Ad4没有表现出可见的细胞毒效应。
- 苏霏齐兵齐义鹏
- 关键词：肿瘤基因治疗腺病毒E1A基因
- 粘虫核型多角体病毒919bp片段的PCR双链直接序列测定
- 1998年
- 本文发展了ＰＣＲ克隆和亚克隆技术制备ＤＮＡ测序模板。首先，我们用ｐＵＣ／Ｍ１３系列质粒的通用正反向引物ＰＣＲ扩增出质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳＤＮＡ的多克隆位点及其侧翼序列，用ＥｃｏＲＶ和ＸｈｏＩ消化成为左右两个引物多克隆臂，与粘虫核型多角体病毒（ＬｓＮＰＶ）的ＥｃｏＲＶ和ＸｈｏＩ约４００ｂｐ和５００ｂｐ片段分别连接，经ＰＣＲ扩增，得到两端具有上述正反向引物结合位点的测序模板，用ｄｄＮＴＰ链终止法／ＰＣＲ扩增／银染色，从片段两端测定了全部９１９ｂｐ序列，这种ｄｄＮＴＰ／ＰＣＲ／银染测序法简化了操作，大大缩短了测序模板的制备时间，易于实现自动化操作。
- 齐兵王家旺修建文黄永秀齐义鹏
- 关键词：PCR克隆粘虫核型多角体病毒
- 一个人细胞凋亡诱发新基因的鉴定和功能研究
- 该论文以探索细胞凋亡诱发工因asy的凋亡机制为目的,采用酵母双杂交系统成功地从人肺细胞系(WI-38)cDNA文库中筛选、克降了一个ASY相互作用蛋白基因,与GenBank序列比较没有发现同源性,是一个新的基因,命名为a...
- 齐兵
- 关键词：信号转导通路酵母双杂交系统蛋白质定位蛋白质相互作用
- asy与asyip:一类新的细胞凋亡诱发基因被引量：6
- 2000年
- 齐义鹏齐兵刘青珍
- 关键词：细胞凋亡
