刘琍
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：东南大学医学院遗传学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗果蝇Dxl6蛋白抗体的制备及特异性分析
- 2004年
- 为了研究果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6的功能,通过RT PCR得到Dxl6的全长cDNA,并根据Dxl6基因产物的功能区,分别将Dxl6中间区域(Dxl6middlepart,Dxl6MP)、Dxl6C末端RS结构域(Dxl6RSdomain,Dxl6RSD)序列亚克隆至pGEX 4T 1(His)6C及pET32a表达载体中,表达和纯化获得融合蛋白。用纯化的融合蛋白GST Dxl6RSD His和GST Dxl6MP His免疫家兔,分别得到抗Dxl6RSD和抗Dxl6MP两种抗体。WESTERNBLOT结果显示两种抗体能特异地识别在原核表达系统内表达的抗原,抗Dxl6RSD的抗体对果蝇组织中的Dxl6具有较高的特异性。
- 王善治袁榴娣万永奇刘琍谢维
- 关键词：SR蛋白果蝇原核表达抗体制备
- 抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6～8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定.结果: 获得1株杂交瘤细胞株, 命名为8G9.Ig亚类(型)鉴定表明, 此株mAb为IgG1(κ型).腹水mAb的效价为 1∶ 1×105.Western blot分析表明, 该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合, 可特异性的识别ECP抗原的231～300aa区段.结论: 获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株, 为进一步研究ECP的功能奠定了基础.
- 刘加彬汪道涌孙明宽徐敏刘琍谢维
- 关键词：黑腹果蝇ECP单克隆抗体抗原表位
- 小鼠醛糖还原酶相似基因同源蛋白表达研究被引量：1
- 2004年
- 目的 检测小鼠ARL-1同源蛋白的表达情况,分析人醛糖还原酶相似基因(ARL-1)与小鼠ARL-1同源蛋白的同源性和遗传距离,从进化的角度讨论小鼠ARL-1同源蛋白与人ARL-1的亲缘关系。方法 利用OenBank和Swiss-Prot数据库,采用Clustal X 1.8软件分析人ARL-1与小鼠ARL-1同源蛋白的同源性,利用Mega 2.0软件分析人ARL-1与小鼠ARL-1同源蛋白的遗传距离,推测其进化关系;采用westernblot方法,运用抗ARL-1多克隆抗体分析小鼠多种组织ARL-1同源蛋白的表达情况。 结果 人ARL-1分别与小鼠中国仓鼠卵巢还原酶(CHO-Red)、成纤维细胞生长因子调节蛋白(FR-1)、鼠醛糖还原酶相似蛋白(rARLP)、小鼠输精管蛋白(MVDP)、鼠晶状体醛糖还原酶(LeAR)、δ4-3-5β酮甾类还原酶(5β-Red)、鼠醛酮还原酶蛋白C(RaK-c)、3α-18-羟甾类脱氢酶(3α-HSD)有83％、82％、81％、79％70％、51％、50％、45％的同源性。人ARL-1与小鼠CHO-Red的遗传距离最短(18.0％,P=0.023),其次是FR-1(19.1％,P=0.023)和rARLP(19.9％,P=0.025)。从进化树来看,人ARL-1与小鼠FR-1、rARLP、CHO-Red亲缘关系较近,其次是MVDP与LeAR。采用western blot在小鼠输精管,睾丸、膀胱、子宫检测到ARL-1同源蛋白。 结论 人ARL-1与小鼠CHO-Red、FR-1、rARLP、MVDP有较高的同源性、较?
- 金俊飞易力刘琍袁榴娣施燕峰谢维
- 关键词：小鼠同源蛋白基因表达
