吕富双
- 作品数：32 被引量：142H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划国家科技部专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测被引量：1
- 2003年
- 为进一步提高RT PCR检测西部马脑炎病毒 (WEE)病毒基因组方法的敏感性 ,采用半套式PCR扩增病毒基因组特异序列。首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA ,然后以此cDNA为模板 ,进行扩增。对扩增后电泳检查无可见DNA条带的产物进行半套式PCR ;与此同时对扩增的循环数、Mg++浓度和退火温度等条件进行了优化 ,以进一步提高扩增的特异性。结果第一轮PCR未扩出特异性片段的WEE病毒稀释度 ,其半套式扩增出特定大小的DNA产物 ;同时优化的条件提高了扩增产物的特异性。扩增产物约为 190bp的单一DNA片段 ,其大小与预期的相一致。结果表明采用半套式RT PCR方法检测WEE病毒的基因组序列的敏感性可提高 10
- 赵月峨于曼邓永强杨保安吕富双祝庆余秦鄂德
- 关键词：基因组序列
- 固液电蚊香的研制与应用
- 1992年
- 固液电蚊香是利用固液态转化技术,将液态杀虫剂SR—生物丙烯菊脂在固控剂作用下,转化为固态储存,在电加热器上加热后又迅速由固念转为液态,并挥发至空间,发挥驱杀蚊虫之效,断电冷却后又转为固态。本文介绍该电蚊香对库蚊、伊蚊和按蚊等6种蚊虫的击倒作用和致死效果以及对现场人群的保护效果,并且和4种电驱蚊片和4种液体蚊香击倒活性进行了比较。
- 缪武阳舒国欣吕富双崔旺才
- 关键词：蚊虫
- 4株SARS冠状病毒基因组5’端序列的分析与比较被引量：1
- 2003年
- 利用5′RACE试剂盒对从中国不同地区、不同SARS患者体中分离的SARS-CoV基因组5′端序列进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆至T easy vector。扩增片段的序列测定结果表明:所分离的4株SARS-CoV基因组5′端非编码区的核苷酸序列和其他国家和地区报道的序列基本一致,而且所形成二级结构也完全相同,但与已知普通冠状病毒的差别较大。同时发现在依赖于RNA的RNA聚合酶起始密码子上游-197 nt处有冠状病毒典型的转录调控核心保守序列5′-CUAAAC-3′。
- 常国辉彭文明刘伯华范宝昌刘洪邓永强吕富双杨保安秦鄂德祝庆余
- 关键词：SARS冠状病毒基因组
- 复方萘酚喹对比格犬的长期毒性
- 2003年
- 目的 :观察犬连续口服复方萘酚喹的毒性剂量、损伤的靶器官、可逆性及安全剂量范围。方法 :给比格犬口服复方萘酚喹 1 7.5 ,87.5或 1 4 0mg/(kg·d) ,每天 1次 ,连服 1 4d。给药结束后 ,各组活杀 2 /3,留 1 /3继续观察2 8d。观测了临床症状和生理指标 ,血液学 8项、血生化 1 3项、尿 8项、心电图、眼底、骨髓和组织病理学。结果 :主要毒性反应见于 1 4 0mg/(kg·d)组 ,给药后 5 /6只犬出现恶心、呕吐等消化系统症状 ,部分动物出现阵发性抽搐 ,几分钟后自行缓解。该组给药后GOT ,GPT明显升高 ,心电图Q_T间期延长 ,骨髓红系受到抑制 ,组织学检查可见肝细胞损伤明显。 87.5mg/(kg·d)组各种毒性反应均较大剂量组轻 ,所有毒性反应于停药后自行恢复。 1 7.5mg/(kg·d)组未见明显毒副作用。结论 :1 4 0mg/(kg·d)为重度中毒剂量 ,87.5mg/(kg·d)为中度中毒剂量 ,1 7.5mg/(kg·d)为安全剂量。毒性靶器官是肝脏和骨髓 。
- 王京燕邬伯安徐在海孙国章张敏王翠娥刘超吕富双孙志伟洪松芳乌增炎叶洪金
- 关键词：抗疟药萘酚喹青蒿素毒性
- 汉坦病毒G2膜蛋白基因在毕赤酵母中克隆表达的研究
- 侯佩强艾宪准楚贻康石长胜刘玮红祝庆余吴劲松吕富双苏波贺利华
- 该课题设计能扩增出目的的基因G2的引物、经PCR扩增目的基因，G2基因和pGEM-T Easy Vector连接，转化E.coli DH5a株；克隆、提取质粒T-G2，分别用SnaBI和NotI酶切下G2，与经同样两步酶...
- 关键词：
- 关键词：汉坦病毒毕赤酵母克隆表达肾综合征出血热
- 部分国产艾滋病病毒抗体检测试剂临床应用质量评价被引量：12
- 1999年
- 目的 为掌握国产艾滋病病毒（ＨＩＶ） 抗体筛选酶免试剂的实际应用状况，对８ 种主要的国产ＨＩＶ抗体筛选酶免试剂进行了临床应用质量评价。方法 以一种进口ＨＩＶ 抗体筛选酶免试剂为参比，用８ 种考评试剂对２００ 份标本进行了统一的检测。２００ 份标本包括１００ 份经过确认的ＨＩＶ抗体阳性、阴性、可疑标本和１００ 份新疆吸毒人群的血清标本。结果 参比试剂可以检出全部７４ 份阳性标本，敏感性为１００ ％ ，而考评试剂有６ ～１８ 份不等的假阴性结果，敏感性为８１．１％ ～９１．９％ 。假阴性结果主要发生于来自吸毒人群的ＨＩＶ 抗体弱阳性标本。考评试剂的特异性相对较好，在１０７ 份阴性标本中，参比试剂将２ 份错判为阳性，特异性为９８ ．１ ％ ，考评试剂有０～８ 份标本错判为阳性，特异性为９２．５ ％ ～１００％ 。结论 考评试剂的主要问题是敏感性低，这可能与检测原理是间接法、抗原组成不全面、反应条件不合理等因素有关。
- 李敬云鲍作义吕富双王宏霞
- 关键词：艾滋病病毒抗体
- 基因芯片技术检测10种烈性RNA病毒被引量：8
- 2006年
- 目的利用基因芯片技术检测包括披膜病毒科甲病毒属、黄病毒科黄病毒属、布尼亚病毒科汉坦病毒属及SARS病毒等10种烈性RNA病毒。方法设计了甲病毒属的属保守区通用引物和黄病毒属的通用引物,与布尼亚病毒及SARS病毒的引物一起用于扩增靶核酸。另外,在通用引物所能扩增的区域内设计每种病毒的特异引物,利用该引物通过PCR反应制备cDNA克隆探针,在判定其特异性后,制备氨基化探针。对探针浓度、杂交温度、杂交时间、不同杂交液及杂交后芯片的洗涤方法进行了优化。结果核酸探针浓度为0·3μg/μl时,可获得杂交信号;在杂交液终浓度含20%甲酰胺、杂交60℃、1·5h的条件下,可分别获得以上10种病毒的特异杂交信号。利用多重PCR扩增靶序列时,可获得2种或4种混合病原体的特异性杂交信号。结论利用基因芯片技术检测病毒性病原体是可行的,关键在于设计合适的引物及探针序列。
- 杨银辉杨瑞馥常国辉司炳银翟俊辉吕富双周东生韩伟国祝庆余
- 关键词：寡核苷酸序列分析
- 灭活前后HIV-1生物学性状改变的研究被引量：3
- 2000年
- 樊卫平陈向伟李敬云王红霞吕富双
- 关键词：HIV-1生物学性状血液制品病毒灭活
- SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果观察被引量：5
- 2004年
- 观察SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果 ,为进一步的临床研究奠定基础 .将BJ0 1株SARS病毒感染的Vero细胞的培养液过滤澄清 ,经 β 丙内酯灭活和超滤浓缩 ,然后经凝胶过滤和离子交换层析获得纯化的SARS灭活疫苗 .经HPLC分析其纯度为 97.6 % ,在电子显微镜下可观察到SARS病毒样颗粒 .蛋白质印迹 (westernblotting)分析表明 ,纯化SARS灭活疫苗可与SARS患者恢复期血清起反应 .纯化的SARS灭活疫苗符合有关的质量标准 .用SARS灭活疫苗免疫猴体可产生高效价的中和抗体 ,可阻止SARS病毒在猴体内增殖 ,且对SARS病毒攻击具有保护作用 .在低中和抗体情况下 ,用SARS病毒攻击免疫猴后没有出现感染增强现象 .猴体免疫SARS灭活疫苗后 ,无论正常剂量还是大剂量疫苗免疫 ,均未发现局部和全身副反应 。
- 秦鄂德石慧颖唐琳王翠娥常国辉丁志芬赵铠汪建于曼司炳银刘建源陈则吴东来彭文明孟庆文刘伯华韩伟国尹训南段鸿元杨保安战大伟田龙程晓洁吴劲松谭刚李懿李豫川李双利刘永刚刘洪
- 关键词：猴体SARS病毒灭活疫苗免疫原性中和抗体疫苗免疫
- SARS相关病毒(BJ01株)的全序列及其比较分析被引量：23
- 2003年
- 严重急性呼吸综合征(SARS)是一种新发现的急性传染病。对一株已确认为SARS病原体的冠状病毒(BJ01)进行了全基因组序列测定,并与其他已知病毒进行了比较分析。该病毒基因组全长为29.725kb,含11个可读框(ORFs),由1个稳定区和1个可变区组成,其中稳定区编码RNA依赖性RNA聚合酶,包括两个ORFs;可变区含有4个蛋白质编码序列(CDSs),分别编码病毒的4个结构蛋白(S,E,M,N蛋白)。此外,可变区还包括5个非典型的预测蛋白(PUPs)。此病毒基因的排列顺序与其他已知的冠状病毒一致。通过与已知RNA病毒的序列比对,可以确认该病毒属于冠状病毒科(Coronaviridae)。与GenBank中已知的5个SARS相关病毒全基因组序列的比较分析显示,已在30个核苷酸位置上检出序列差异,总体突变率为0.1％,其中15个变异位点在编码区,可能会导致蛋白质的氨基酸改变(异义突变)。S蛋白中已发现3处可能引起该蛋白质物化特征变化的变异,而该蛋白质可能参与病毒与宿主间的免疫反应.与病毒包膜形成相关的M蛋白中则已发现两处氨基酸变化。进化分析表明,SARS病毒可能不是来源于人类,但没有证据证明是人为制造的。为了阐明SARS相关病毒的病因学以及排除其他可能的SARS病原体的存在,仍需进行更深入的研究。
- 秦鄂德祝庆余于曼范宝昌常国辉司炳银杨保安彭文明姜涛刘伯华邓永强刘洪张雨王翠娥李豫川甘永华李晓萸吕富双谭刚曹务春杨瑞馥汪建李蔚徐祖元李彦吴清发林伟陈维军唐琳邓亚军韩玉军李昌峰雷蒙李国庆
- 关键词：冠状病毒基因组系统发生学
