周爱萍
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系更多>>
- 发文基金：陕西省卫生厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三羟异黄酮对肝癌细胞HepG2的ADAM17表达的调节被引量：3
- 2009年
- 目的:观察三羟异黄酮(genistein)对肝癌细胞HepG2的生长增殖及ADAM17基因表达的影响。方法:培养肝癌细胞HepG2,加入三羟异黄酮特异性阻断酪氨酸蛋白激酶(TPK),MTT法观察genistein对HepG2细胞生长增殖的影响,PCR分析ADAM17基因水平变化,免疫组化法观察细胞水平ADAM17蛋白表达的变化。结果:经过genistein处理的肝癌细胞HepG2生长增殖受到明显抑制,在48、72和96小时有统计学意义(P<0.01);而且ADAM17的基因表达和蛋白表达都受到明显抑制(P<0.05),抑制程度呈现时间依赖性关系。结论:三羟异黄酮可以通过抑制TPK通路抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖,并且抑制ADAM17基因和蛋白表达水平,从而间接调节HepG2细胞生长信号的传递。
- 刘永存王作仁周爱萍李锋
- 关键词：三羟异黄酮HEPG2ADAM17MTTPCR技术
- 结核杆菌DnaA蛋白的原核表达及免疫血清的制备和检测被引量：3
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白,对表达产物进行纯化、鉴定后制备DnaA蛋白特异性免疫血清并进行Western blot检测。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,PCR扩增DnaA基因,构建DnaA原核表达质粒pET-DnaA,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,非变性条件下镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白pET-DnaA,并用Western blot检测和鉴定重组蛋白,用纯化得到的重组蛋白制备特异性免疫血清。结果成功构建了结核杆菌pET-DnaA重组质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达;用分离纯化后的重组蛋白免疫动物,获得高效价的特异性免疫血清。结论结核杆菌DnaA蛋白及其特异性抗体的成功制备,为进一步研究该蛋白在结核菌DNA复制机制中的作用奠定了基础。
- 周爱萍韩蕾王娟段艳吴晓康徐纪茹
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 结核杆菌DnaA蛋白在耻垢分枝杆菌中的同源表达被引量：2
- 2010年
- 目的:在耻垢分枝杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白并对表达产物进行鉴定。方法:用PCR的方法扩增结核杆菌dnaA基因并克隆至表达载体pMF406中,构建重组大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pMF-dnaA。经双酶切及测序鉴定后,用电转化的方法将重组质粒转至耻垢分枝杆菌mc2155中。用0.02%乙酰胺诱导重组耻垢分枝杆菌,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测和鉴定。结果:重组耻垢分枝杆菌构建成功,SDS-PAGE及Western blotting结果显示该重组耻垢杆菌可以实现结核杆菌DnaA蛋白的同源高效表达。结论:结核杆菌DnaA蛋白的同源表达为结核杆菌DNA复制机制的研究奠定了基础。
- 周爱萍陈艳炯李薇张旭燕徐纪茹
- 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌
